Distribution of respiratory infection pathogens and their drug resistance in intensive care unit in hospital, 2010-2011
GE Guo-xing, WANG Zong-xin, WANG Qing
Shaoxing People’s Hospital, Shaoxing 312000, Zhejiang, China
Abstract
Objective To understand the distribution of respiratory infection pathogens and their drug resistance in the intensive care unit(ICU) in our hospital and provide evidence for the rational use of antibiotics in clinical practice and effective control of nosocomial infection. Methods Pathogens were isolated from the respiratory samples of the patients with respiratory infection in ICU in our hospital from 2010 to 2011,the identification of the pathogens were conducted by using microbiological analyzer and related drug susceptibility test was done by disk diffusion test(K-B). Results Among the pathogens isolated from the respiratory samples, the majority were gram-negative bacilli, accounting for 80.50%, in which, Acinetobacter baumannii accounted for the largest proportion(27.36%), gram positive coccus accounted for 8.20%, in which 5.53% were Staphylococcus aureus, fungi accounted for 11.23%, in which, 8.20% were Candida albicans. The overall drug resistant rate was high. The detection rate of methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA) was 28.60%; The detection rates of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae ESBLs were 58.70% and 27.20%. Conclusion The pathogens detected in the ICU patients with respiratory infection were mainly gram-negative bacilli, and fungal infections tended to increase. Multi drug resistance was serious. It is necessary to strengthen the surveillance of pathogens’ drug resistance to guide clinical antibiotic use.
医院重症监护病房呼吸道感染患者病原菌种类及耐药状况调查
葛国兴, 王宗欣, 王清
绍兴市人民医院, 浙江 绍兴 312000
摘要
目的 调查浙江省绍兴市人民医院重症监护病房(ICU)常见呼吸系统感染病原菌的种类分布和耐药状况,为临床指导用药和控制医院感染提供依据。 方法 对2010-2011年医院ICU呼吸道感染患者的痰液及深部导管等标本中分离出的病原菌,用专用微生物鉴定仪分析,同时采用K-B纸片扩散法进行病原菌药敏分析。 结果 呼吸道标本(痰和导管)分离出的病原菌以革兰阴性杆菌为主,占80.50%,菌种以鲍氏不动杆菌为主,占27.36%; 革兰阳性球菌占8.20%,以金黄色葡萄球菌为主,占5.53%;真菌占11.23%,以白色假丝酵母菌为主,占8.20%,高于革兰阳性球菌所占比例。病原菌的耐药性较广泛,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为28.60%;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的β-内酰胺酶(ESBLs)检出率分别为58.70%和27.20%;真菌耐药有增高趋势。 结论 ICU患者呼吸系统感染病原菌主要为革兰阴性杆菌,真菌感染有增高趋势。多种抗菌药耐药情况严重,医院应加强病原菌耐药率的监测,指导临床合理使用抗菌药物。
内容大纲
-
1 材料与方法
- 1.1 菌株来源
- 1.2 实验材料与仪器
- 1.3 病原菌的鉴定及药敏试验
- 1.4 质控菌株
- 1.5 统计学分析
- 2.1 病原菌分布情况
- 2.2 病原菌的体外药敏状况
1 材料与方法
1.1 菌株来源 收集2010年1月至2011年12月各种重症病因住入ICU符合医院呼吸道感染诊断标准的1422例患者临床资料，年龄1～94岁，中位数66岁。按照卫生部制定的《医院感染监测规范》中有关ICU医院感染目标监测的方法要求，送检4754份痰、深部导管(肺部痰液引流管)、咽拭子标本进行培养。
标本采集方法：气管插管或气管切开者用无菌痰液收集器，采集深部下呼吸道分泌物作痰标本或直接取深部引流痰液导管作标本，参照《全国临床检验操作规程》(第3版)方法进行病原细菌有氧培养、真菌培养及分离，同一患者同一部位取第1次培养阳性结果进行分析。
1.2 实验材料与仪器
法国生物梅里埃公司VTYEK-AMS全自动微生物鉴定仪及配套鉴定卡对病原菌进行鉴定；均购自英国Oxoid公司产品。
1.3 病原菌的鉴定及药敏试验
鉴定方法和结果判定均按照操作说明书进行；药敏试验应用K-B纸片扩散法，结果判断按美国CLSI 2008年标准；产超β-内酰胺酶(ESBLs)的检测，抗生素纸片组合为头孢他啶和头孢他啶+克拉维酸，头孢噻肟和头孢噻肟+克拉维酸，按标准KB法操作，35 ℃培养过夜。如两组纸片中有任一组含克拉维酸的纸片抑菌环直径比不含克拉维酸的纸片抑菌环直径>5 mm时，即为ESBLs阳性。
MRSA药物敏感试验：将检测所得62株金黄色葡萄球菌接种在M-H琼脂培养皿上，于恒温孵育箱18 h后取出，用琼脂稀释法测定细菌的最低抑菌浓度(MIC)。根据CLSI 2008年标准，以苯唑西林MIC≥4 mg/L为标准。
1.4 质控菌株
采用卫生部临床检验中心提供的大肠埃希菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC 27853、金黄色葡萄球菌ATCC 25923及肺炎克雷伯菌ATCC700603、白色念珠菌 ATCC90028。
1.5 统计学分析
采用WHO细菌耐药性监测中心的WHONET5计算机软件完成。
2 结果
2.1 病原菌分布情况 2010-2011年绍兴市人民 医院ICU呼吸道感染患者的4754份痰、深部导管、咽拭子等标本中分离出1122株菌(其中985株痰标本培养得到，86株深部导管培养得到，51株咽拭子培养得到)，标本阳性检测率为23.6%，其中革兰阴性菌904株，占80.57%;革兰阳性菌92株，占8.20%；真菌126株，占11.23%。主要病原菌构成比见表1。
表1 2010-2011年ICU主要呼吸道感染病原菌分布及构成情况
Table 1 Distribution and proportion of respiratory infection pathogens detected in ICU，2010-2011
| 病原菌 | 2010年 | 2011年 | 合计 | |||||
| 株数 | 构成比(%) | 株数 | 构成比(%) | 株数 | 构成比(%) | |||
| 革兰阴性菌 | 449 | 75.97 | 455 | 85.69 | 904 | 80.57 | ||
| 鲍氏不动杆菌 | 138 | 23.35 | 169 | 31.83 | 307 | 27.36 | ||
| 肺炎克雷伯菌 | 98 | 16.58 | 82 | 15.44 | 180 | 16.04 | ||
| 铜绿假单胞菌 | 76 | 12.86 | 88 | 16.57 | 164 | 14.62 | ||
| 大肠埃希菌 | 27 | 4.57 | 36 | 6.78 | 63 | 5.61 | ||
| 嗜麦芽寡养单胞菌 | 39 | 6.60 | 20 | 3.77 | 59 | 5.26 | ||
| 洋葱伯克霍尔德菌 | 26 | 4.40 | 23 | 4.33 | 49 | 4.37 | ||
| 粘质沙雷菌 | 11 | 1.86 | 14 | 2.64 | 25 | 2.23 | ||
| 阴沟肠杆菌 | 15 | 2.54 | 10 | 1.88 | 25 | 2.23 | ||
| 产气肠杆菌 | 10 | 1.69 | 9 | 1.69 | 19 | 1.69 | ||
| 其他革兰阴性菌 | 9 | 1.52 | 4 | 0.75 | 13 | 1.16 | ||
| 革兰阳性菌 | 59 | 9.98 | 33 | 6.21 | 92 | 8.20 | ||
| 金黄色葡萄球菌 | 42 | 7.11 | 20 | 3.77 | 62 | 5.53 | ||
| 溶血葡萄球菌 | 9 | 1.52 | 7 | 1.32 | 15 | 1.34 | ||
| 表皮葡萄球菌 | 6 | 1.02 | 4 | 0.75 | 10 | 0.89 | ||
| 其他革兰阳性菌 | 2 | 0.34 | 2 | 0.38 | 5 | 0.45 | ||
| 真菌 | 83 | 14.04 | 43 | 8.10 | 126 | 11.23 | ||
| 热带假丝酵母菌 | 18 | 3.05 | 7 | 1.32 | 25 | 2.23 | ||
| 白色假丝酵母菌 | 60 | 10.15 | 32 | 6.03 | 92 | 8.20 | ||
| 光滑假丝酵母菌 | 3 | 0.51 | 2 | 0.38 | 5 | 0.45 | ||
| 其他真菌 | 2 | 0.34 | 2 | 0.38 | 4 | 0.36 | ||
| 合计 | 591 | 100.00 | 531 | 100.00 | 1122 | 100.00 | ||
2.2 病原菌的体外药敏状况
革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌和真菌的耐药情况见表2~4。金黄色葡萄球菌中 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 检出16株，占28.6%(16/62)。而产超广谱β-内酰胺酶的菌属中肺炎克雷伯菌检出49株，占27.2% (49/180)，大肠埃希菌检出36株，占58.7%(37/63)。
表2 革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药率
Table 2 Drug resistant rate of gram-negative bacilli
| 抗生素 | 鲍氏不动杆菌(n=307) | 铜绿假单胞菌(n=164) | 肺炎克雷伯菌(n=180) | 大肠埃希菌(n=63) | |||||||
| 株数 | 耐药率(%) | 株数 | 耐药率(%) | 株数 | 耐药率(%) | 株数 | 耐药率(%) | ||||
| 阿米卡星 | 68.00 | 22.10 | 0.00 | 0.00 | 4.00 | 2.00 | 7.00 | 11.60 | |||
| 亚胺培南 | 215.00 | 70.00 | 82.00 | 50.00 | 2.00 | 1.10 | 1.00 | 1.80 | |||
| 哌拉西林/他唑巴坦 | 218.00 | 71.10 | 92.00 | 56.00 | 15.00 | 8.20 | 7.00 | 10.50 | |||
| 复方新诺明 | 231.00 | 75.20 | 161.00 | 98.00 | 43.00 | 24.00 | 45.00 | 72.10 | |||
| 头孢他啶 | 87.00 | 28.30 | 72.00 | 44.00 | 54.00 | 30.00 | 51.00 | 81.50 | |||
| 头孢吡肟 | 240.00 | 78.10 | 80.00 | 49.00 | 51.00 | 28.10 | 49.00 | 78.00 | |||
| 头孢哌酮/舒巴坦 | 226.00 | 73.50 | 89.00 | 54.00 | 33.00 | 18.20 | 53.00 | 84.10 | |||
| 头孢噻肟 | 301.00 | 98.10 | 156.00 | 95.00 | 54.00 | 30.00 | 48.00 | 76.00 | |||
| 妥布霉素 | 74.00 | 24.10 | 33.00 | 20.00 | 29.00 | 16.00 | 37.00 | 59.00 | |||
| 庆大霉素 | 227.00 | 74.00 | 69.00 | 42.00 | 38.00 | 21.30 | 36.00 | 57.00 | |||
| 环丙沙星 | 233.00 | 76.00 | 49.00 | 30.10 | 34.00 | 19.00 | 45.00 | 72.00 | |||
| 多粘菌数B | 2.00 | 0.50 | 3.00 | 2.00 | - | - | - | - | |||
| 阿莫西林/克拉维酸 | 239.77 | 78.10 | 101.68 | 62.00 | - | - | - | - | |||
表3 革兰阳性球菌对抗菌药物的耐药率
Table 3 Drug resistant rate of gram positive coccus
| 病原菌 | 金黄色葡萄球菌(n=62) | 溶血葡萄球菌(n=15) | 表皮葡萄球菌(n=15) | |||||
| 株数 | 构成比(%) | 株数 | 构成比(%) | 株数 | 构成比(%) | |||
| 庆大霉素 | 22.00 | 35.50 | 7.00 | 45.00 | 4.00 | 39.50 | ||
| 左旋氧氟沙星 | 24.00 | 38.70 | 9.00 | 60.00 | 1.00 | 6.70 | ||
| 万古霉素 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | ||
| 复方新诺明 | 7.00 | 11.30 | 5.00 | 35.00 | 5.00 | 50.00 | ||
| 替考拉宁 | 0.00 | 0.00 | 6.00 | 38.00 | 0.00 | 0.00 | ||
| 喹诺普汀/达福普汀 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 2.90 | 0.00 | 2.00 | ||
| 红霉素 | 29.00 | 46.80 | 11.00 | 71.00 | 8.00 | 77.00 | ||
| 苯唑西林 | 17.00 | 27.40 | 14.00 | 95.00 | 8.00 | 83.00 | ||
| 青霉素G | 59.00 | 95.20 | 15.00 | 100.00 | 10.00 | 97.00 | ||
| 利奈唑烷 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 0.00 | 1.00 | ||
表4 真菌耐药性结果
Table 4 Drug resistance of fungi
| 抗真菌药 | 白色假丝酵母(n=92) | 光滑假丝酵母(n=5) | 热带假丝酵母(n=25) | |||||
| 耐药株数 | 耐药率(%) | 耐药株数 | 耐药率(%) | 耐药株数 | 耐药率(%) | |||
| 5-氟胞嘧啶 | 6 | 6.5 | 0 | 0.0 | 1 | 4.0 | ||
| 伊曲康唑 | 1 | 1.1 | 0 | 0.0 | 2 | 8.0 | ||
| 两性霉素B | 3 | 3.3 | 0 | 0.0 | 1 | 4.0 | ||
| 氟康唑 | 1 | 1.1 | 1 | 20.0 | 0 | 0.0 | ||
| 合计 | 11 | 11.9 | 1 | 20.0 | 4 | 16.0 | ||
3 讨论
绍兴市人民医院综合重症监护病房患者标本致病菌检出率较高。检出的致病菌以革兰阴性杆菌为主，多数是机会致病菌，以非发酵菌中的鲍氏不动杆菌为主，占总菌株数的27.4%，占革兰阴性菌的33.9%，次之为肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、肠杆菌科的大肠埃希菌、嗜麦芽寡养单胞菌和阴沟肠杆菌，与国内外报道相似 。肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌也是最常见引起ICU呼吸道感染的重要条件致病菌之一，近年来耐药率不断增加，多药耐药铜绿假单胞菌已成为医院感染最常见的病原菌[3]。本研究表明，2010-2011年该院ICU住院患者呼吸道感染痰标本中铜绿假单胞菌共检出164株，占所有病原菌的14.62%，位居革兰阴性菌的第3位。铜绿假单胞菌引起的感染日益增多，病原菌检出率高，且耐药性问题日趋严重。从检出致病菌的标本来源说明，重症监护病房感染部位以呼吸道为主，主要原因是重症监护病房室内空气和医务人员手的污染。患者的病情严重，仰卧位患者多，鼻饲、气管插管等侵入性操作，导致呼吸道感染机会增加。因此，应加强环境消毒管理，加强患者呼吸道护理和各项诊疗操作的无菌技术，以控制呼吸道感染。
数据显示，真菌感染有增加趋势，以白色假丝酵母菌为主，高于革兰阳性菌，与金晓冰等[4]报道基本一致。真菌体外药敏试验分析，白色假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、热带假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶、伊曲康唑、两性霉素B、氟康唑耐药率均较低，在10%以下，分离的白色念珠菌对两性霉素 B、伊曲康唑的耐药率较低仅3.3%和1.1%，但对5-氟胞嘧啶的耐药率为 6.5%，与陈晶等[5]报道基本一致。5-氟胞嘧啶主要用于真菌所致系统性真菌感染的治疗，是唯一的抗代谢抗真菌药，但是由于 5-氟胞嘧啶容易诱导耐药，建议在临床用药中宜与两性霉素 B等抗真菌药物同时应用。本研究中光滑念珠菌对氟康唑的耐药率达到20.0%，可能存在光滑念珠菌对氟康唑天然耐药。若盲目经验性的广泛使用氟康唑，更易造成耐药菌株在临床的播散和流行，增加治疗难度。应该引起广大临床医生和临床微生物工作者的高度重视，真菌培养和药敏试验非常必要。
随着广谱抗菌药物在临床广泛使用， 革兰阴性杆菌耐药率不断升高，主要是产ESBLs菌亦不断增加。ESBLs多在肠杆菌科大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产生，均是产超广谱β-内酰胺酶的代表菌，目前已成为感染的重要病原菌[6]。本研究表明，从分离的63株大肠埃希菌中检出产ESBLs菌37株，总检出率58.7%。克雷伯菌的产酶率为27.2%。而产ESBLs的菌株对亚胺培南的耐药率低于2%，对哌拉西林/他唑巴坦敏感性亦较高，故根据体外药敏试验碳青霉烯类、含酶抑制剂抗生素等可作为临床治疗ESBLs菌一线用药。MRSA目前已是感染的重要病原菌之一，并成为临床治疗的难题[7]。本次研究中，金黄色葡萄球菌中MRSA检出16株，占28.6%。高于相关报道[8]。因此ICU患者有气管切开部位，要求严密观察，及时消毒，更换敷料，减少导管在体内留置时间；若发生感染流行或多重耐药菌感染，应追溯感染源，对患者实施隔离。
参考文献
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