疾病监测, 2013, 28(8): 617-620
DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2013.8.004
Estimation of new HIV-1 infection in high risk groups with BED-CEIA in Zhejiang, 2010-2012
GUO Zhi-hong, XU Yun, XIA Yan, YANG Jie-zhe, DING Xiao-bei, ZHANG Jia-feng, PAN Xiao-hong
Zhejiang Provincial Center for Disease Control and Prevention, Hangzhou 310051, Zhejiang, China
Abstract
Objective To estimate the new infection rate of HIV-1 in high risk groups in Zhejiang province from 2010 to 2012. Methods New infection was detected by using 665 positive samples collected through HIV/AIDS sentinel surveillance and 4030 samples collected from newly reported confirmed cases in Zhejiang during this period with BED HIV-1 capture enzyme immunoassay (BED-CEIA). Results The new HIV-1 infection rate in men who have sex with men (MSM) was 3.52% (2.22%-4.83%) in 2010, 6.63% (4.65%-7.94%) in 2011 and 6.33% (4.83%-7.84%) in 2012,respectively. The proportion of positive samples in total BED tested samples was 27.08% in 2010, 26.09% in 2011 and 30.35% in 2012,respectively.The new infections in MSM accounted for 40.17% in 2011 and 42.05% in 2012 of total MSM cases. Conclusion The incidence of HIV-1 infection in MSM increased rapidly from 2010 to 2011, slightly decreased from 2011 to 2012, indicating that the prevalence of HIV-1 infection in MSM is still high in Zhejiang. It is very important to strengthen the intervention in MSM.
Keywords:    human immunodeficiency virus   new infection   BED HIV-1 capture enzyme immunoassay  

应用捕获酶联免疫测定法估算2010-2012年浙江省重点人群人类免疫缺陷病毒1型新发感染率
郭志宏, 徐云, 夏燕, 杨介者, 丁晓贝, 张佳峰, 潘晓红
浙江省疾病预防控制中心, 浙江 杭州 310051
摘要
目的 估计浙江省2010-2012年重点人群人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)新发感染情况及其发展趋势。 方法 收集浙江省2010-2012年665例HIV哨点监测阳性样本和4030例新报告确证阳性病例样本,应用BED HIV-1捕获酶联免疫测定法(BED HIV-1 capture enzyme immunoassay,BED-CEIA)检测新发感染,利用公式I=[F×(365/W)×R]/[N+F×(365/W)×R/2]×100% 估算人群的HIV-1新发感染率,并对同期新报告确证阳性病例计算新发感染比例。 结果 浙江省2010-2012年HIV监测哨点重点人群的男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)HIV-1新发感染率最高,分别为3.52%(2.22%~4.83%)、6.63%(4.65%~7.94%)和6.33%(4.83%~7.84%),其他人群均较低。浙江省2010-2012年报告阳性病例新发感染比例分别为27.08%、26.09%和30.35%,2011年和2012年MSM报告阳性病例新发感染比例分别为40.17%和42.05%。 结论 浙江省MSM人群HIV-1新发感染率2010 2011年增长较快,2011-2012年稍有下降但仍维持较高水平,其他人群相对较低。报告阳性病例中MSM人群新发感染比例也较高。浙江省MSM人群HIV流行形势仍然非常严峻,应加大对该人群的干预力度。
关键词:    艾滋病病毒   新发感染率   BED HIV-1捕获酶联免疫测定法  

内容大纲
1 对象与方法
1.1 研究对象
1.2 试剂和仪器
1.3 检测方法和结果判断
1.4 统计学方法
2 结果
2.1 哨点监测重点人群感染率和新发感染率
2.2 报告阳性病例中新发感染的比例
3 讨论
　　浙江省同国内其他省份一样，每年对重点人群如男男性行为者(men who have sex with men, MSM)、性病患者(sexually transmitted diseases，STD)、女性性工作者(female sex workers，FSW)、静脉吸毒者(drug users,DUS)、男性流动人群(male mobile population，MPO)、长卡司机(long-distance truck drivers，DRY)、青年学生(young student，YST)、孕产妇(pregnant women，PRG)等常规开展人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus, HIV-1)综合监测，监测方法通常为哨点监测、行为监测和病例报告等，只是掌握各人群艾滋病流行态势，但不能判定为新发感染还是既往感染，不能敏感地反映疫情的真正变化趋势，难以有效反映干预措施的效果[1]。确定新发感染和准确地估计新发感染率通常只能依靠传统的队列研究[2]，但队列研究所需费用昂贵，组织难度大，难于维持队列，可能存在偏性等，不能有效反映整个人群HIV新发感染的情况。近年来，随着实验室技术的发展，血清学方法监测HIV-1新发感染成为可能。应用实验室方法 估计HIV-1新发感染率受到了越来越多的关注。2002年Parekh等[4]设计和建立 HIV-1捕获酶联免疫测定法(BED HIV-1 capture enzyme immunoassay，BED-CEIA)用于检测新发感染样本以估算HIV-1新发感染率，美国疾病预防控制中心(CDC)对BED-CEIA方法经过多年的研究于2006年6月将BED-CEIA方法纳入国家艾滋病常规监测体系，为各国开展该领域工作提供了重要技术支持。中国CDC于2005年起引进了BED-CEIA方法，通过系统评价获得了适宜我国人群的重要技术参数，经过多次的试点地区的应用于2011年3月正式在国内推广应用[5]，本研究目的是通过应用BED-CEIA方法，对浙江省2010 2012年哨点监测重点人群和病例报告阳性病例进行新发感染检测，估计新发感染率，为判断浙江省艾滋病流行形势和疫情变化，评估艾滋病综合防治效果提供科学依据。
1 对象与方法
1.1 研究对象
　　研究样本信息来自浙江省哨点监测系统和全国艾滋病信息系统，每年哨点监测和病例报告阳性样本均收集进入浙江省艾滋病阳性样本库，所有样本均保存于-80 ℃超低温冰箱。其中2010 2012年哨点监测总阳性样本665份，报告阳性病例4030例。均为经初筛和确证阳性病例，入选研究样本必须为HIV-1确证阳性的样品，如果同一人在6个月以内出现2份或2份以上确认阳性样品，将第1份样品纳入新发感染检测，同时排除所有艾滋病患者样品和所有接受抗病毒治疗的HIV-1感染者样品。
1.2 试剂和仪器
　　HIV-1新发感染检测采用 SediaTM BED HIV-1 Incidence EIA 试剂盒(Sedia Biosciences Corporation，美国)。试验的仪器为Authos 2010酶标仪和Authos Fluido洗板机(Authos Labtec Instruments公司，奥地利)。
1.3 检测方法和结果判断
　　实验方法为酶联免疫吸附试验(ELISA)法，分为初筛试验和确认试验。初筛检测样本An值≤1.2时需要做确认检测。初筛检测为单孔检测，确认检测为3孔检测，检测方法均相同，但判读结果不同，试验前建立标准操作规程，每批实验对照和样品分别稀释100倍，吸取100 μl移至微孔板中，37 ℃孵育1 h。用洗板机冲洗4次，每孔中加入100 μl HIV-1生物素-抗原肽，37 ℃孵育1 h。每孔中加入100 μl稀释的结合物，37 ℃孵育90 min。每孔中加入100 μl TMB底物，25 ℃下严格孵育15 min进行显色。每孔中加入100 μl终止液来终止反应。用酶标仪波长450 nm(参考波长为630~650 nm)进行读数。初筛检测各样品的An值＝各样品的A值/校准品的中值A，确认检测：各样品的An值＝各样品的中值A值/校准品的中值A，确认检测样本An值≤0.8时，该份样品认为是近期感染，任何初筛检测样本An值≥1.2和确证检测样本An值>0.8均判为长期感染。
各批号试剂均在有效期内使用，每批检测前均参加中国CDC性病艾滋病预防控制中心组织的HIV-1新发感染能力验证并获得合格。
1.4 统计学方法
　　HIV-1新发感染率，应用McDougal计算法中点公式[5]I= ／ ×100％。其中N为HIV检测为阴性的总人数，R为BED-CEIA检测为新发感染的总人数，F为调整灵敏度或特异度的调整因子，W为窗口期(为168 d)，95％ 可信区间95％CI=±1.96×I／SQRT(R)。
报告阳性病例新发感染的比例[5]=BED-CEIA检测为新发感染的人数／同期经BED-CEIA检测样本总数×100％。
感染率(%)=HIV抗体阳性人数／检测总数×100％。
2 结果
2.1 哨点监测重点人群感染率和新发感染率
　　浙江省2010 2012年HIV监测哨点重点人群的总体HIV-1感染率分别为0.62%、0.66%和0.70%,新发感染率分别为0.23%(0.15％～0.30％)、0.37% (0.28％～0.46％)和0.43% (0.33％～0.53％)。3年均维持在较低水准，但其中MSM人群感染率分别为8.54%、8.35%和7.87%，3年小幅度下降但维持在较高水平，而MSM人群HIV-1新发感染率分别为3.52%(2.22％～4.83％)、6.63%(4.65％～7.94％)和6.33%(4.83％～7.84％)，MSM人群HIV-1新发感染率2010 2011年增长较快，2011 2012年稍有下降但仍保持在较高水平，其他人群均保持较低水平。同期哨点重点人群总体和MSM人群感染率均高于新发感染率。结果见表1(2010 2012年青年学生检测人数分别是1609、1600、1600人，未发现HIV/BED感染者，表1未列出)。3年重点人群总体和MSM人群感染率和新发感染率趋势见图1。

表1 2010-2012年浙江省哨点监测重点人群HIV新发感染率
Table 1 New HIV-1 infection rate in high risk group in Zhejiang, 2010-2012
年份 男男性接触者 性病患者
检测人数 抗体 BED 新发感染率/% 检测人数 抗体 BED 新发感染率/%
阳性数 感染率/% 检测数 阳性数 均值 95%CI 阳性数 感染率/% 检测数 阳性数 均值 95%CI
20101 8381578.54103283.522.22～4.837 227160.22930.12-0.02～0.26
20111 9411628.35123566.634.65～7.947 239200.281550.130.02～0.24
20122 2371767.87168686.334.83～7.847 287220.301420.04-0.02～0.01
合计6 0164958.233941525.574.68～6.4521 753580.2738100.100.04～0.16
年份 女性性工作者 静脉吸毒者
检测人数 抗体 BED 新发感染率/% 检测人数 抗体 BED 新发感染率/%
阳性数 感染率/% 检测数 阳性数 均值 95%CI 阳性数 感染率/% 检测数 阳性数 均值 95%CI
20107 02470.10400.0003 620320.881750.270.03～0.50
20117 16540.06410.02-0.02～0.073 562230.6590--
20127 10740.0630--3 639350.961740.200.00～0.39
合计21 296150.071110.000.00～0.0110 821900.834390.140.05～0.23
年份 男性流动人群 长卡司机
检测人数 抗体 BED 新发感染率/% 检测人数 抗体 BED 新发感染率/%
阳性数 感染率/% 检测数 阳性数 均值 95%CI 阳性数 感染率/% 检测数 阳性数 均值 95%CI
2010年4 45700.00----1 22200.00----
2011年2 07810.05----1 20510.0810--
2012年4 43640.09310.06-0.05～0.171 20500.00----
合计10 97150.05310.03-0.03～0.083 63210.0310--
年份 孕产妇 合 计
检测人数 抗体 BED 新发感染率/% 检测人数 抗体 BED 新发感染率/%
阳性数 感染率/% 检测数 阳性数 均值 95%CI 阳性数 感染率/% 检测数 阳性数 均值 95%CI
20107 30500.00----34 3022120.62133360.230.15～0.30
20117 31700.00----32 1072110.66152620.390.30～0.49
20127 30810.01----34 8192420.70205750.430.33～0.53
合计21 93010.00----1E+056650.664901730.36 0.31～0.42


2.2 报告阳性病例中新发感染的比例
　　浙江省2010 2012年报告阳性病例新发感染比例分别为27.08%、26.09%和30.35%，2011年和2012年MSM报告阳性病例新发感染比例分别为40.17%和42.05%。明显高于同期的重点人群水准，见表2。
3 讨论
　　BED-CEIA方法是一种体外定量的酶联免疫实验，是经过系统评价、目前国内外应用最广的实验室方法估计HIV-1新发感染率的方法之一 ，其工作原理是通过检测样本中的HIV-1特异性的IgG

表2 2010-2012 年浙江省报告HIV-1阳性病例新发感染比例
Table 2 Proportion of new HIV-1 infection in reported positive cases,2010-2012
报告阳性病例类别 报告阳性人数 BED检测人数 新近感染
人数 构成比
%
全部病例
 2010年第一季度3402777527.08
 2011年第二季度65854814326.09
 2012年第一、二季度121082725130.35
MSM病例
 2011年83758023340.17
 2012年98558524642.05


图1 2010-2012 年浙江省哨点监测重点人群总体感染率、MSM人群感染率和新发感染率趋势图
Figure 1 Estimation of HIV-1 infection in high risk groups in Zhejiang with BED-CEIA,2010-2012
2010-2012 年浙江省哨点监测重点人群总体感染率、MSM人群感染率和新发感染率趋势图


抗体相对于总IgG抗体的比例来确定HIV-1感染的 时间。新发感染特异性IgG 较低，占总IgG 抗体的比例也较低，反之长期感染特异性IgG 相对较高，占总IgG抗体的比例也较高。BED-CEIA方法应用于公共卫生领域，如人群发病率的估计来帮助制定预防项目，分配卫生资源，监测和评估，识别高危人群和疫苗试验人群。该实验不用于个体诊断 。
本研究中，在浙江省哨点监测的各重点人群中，MSM人群的感染率和新发感染率均明显高于其他人群，表明MSM人群是浙江省HIV感染的重要的目标人群，与江苏[6]、北京[7]和河南[8]等省(直辖市)相似。浙江省MSM人群2010 2012年在感染率维持较高的水准下，2010 2011年新发感染率有较大的增高， 表明这一时期MSM人群中HIV的传播已呈现出快速上升的趋势，2011 2012年新发感染率没有继续大幅度增高，而是稍有降低仍维持在较高水平，与近2年对MSM扩大预防干预覆盖面，创新开展性伴推动检测扩大检测覆盖，加强MSM感染者/患者随访管理、扩大抗病毒治疗，开展规范化性病诊疗，降低艾滋病感染和传播风险等干预力度加大有关，是防治措施效果初步显现的原因。可以预见，随着对MSM人群干预工作进一步加强，MSM人群新发感染率逐渐下降也将成为可能。同时也表明相对于感染率指标，新发感染率能够比较敏感反映疫情的变化。
本研究同时也对2010 2012年新报告HIV阳性病例应用BED-CEIA方法检测新发感染，计算新发感染比例，3年新发感染总比例维持在26.09%～30.35%之间，但新报告MSM HIV阳性病例新发感染比例均高于40%，明显高于总报告阳性病例新发感染比例，也说明近几年MSM人群新发感染处于较 高的流行。但是由于是比例，不能明确说明该人群新发感染的真正情况，有关流行病学意义需要进一步的评估。
本研究中由于重点人群中除MSM人群以外，其他人群的阳性人数较少，导致BED检测人数和BED阳性人数均很少，由于BED-CEIA方法的局限性，这些人群的新发感染率的估算并不十分准确，只能认定这些人群的感染率、新发感染水平很低。

参考文献
[1] Lyu F,Zhao JK,Jiang Y,et al.The application of BED HIV-1 incidence assay[J]. Chinese Journal of AIDS & STD,2006,12(2):179-181.(in Chinese) 吕繁,赵金扣,蒋岩,等.BED HIV-1发病监测方法及其应用[J].中国艾滋病性病,2006,12(2):179-181.
[2] Ruan YH,Jia YJ,Zhang XX,et al. Incidence of HIV-1,syphilis,hepatitis B,and hepatitis C virus infections and predictors associated with retention in a 12-month follow-up study among men who have sex with men in Beijing,China[J].AIDS,2009,52(5):604-609.
[3] Shen S,Jiang Y. The advance of study on BED HIV-1 incidence assay[J]. Chinese Journal of Epidemiology,2010,31(4):102-105.(in Chinese) 沈圣,蒋岩. HIV新近感染检测方法研究进展[J].中华流行病学杂志,2010,31(4):102-105.
[4] Parekh BS, Kennedy MS,Dobbs T,et al.Quantittative detection of increasing HIV type l antibodies after seroconversion:asimple assay for detecting recent HIV infection and estimating incidence[J].AIDS Res Hum Retroviruses,2002,18(4):295-307.
[5] Chinese center for disease control and prevention.National guideline for HIV-1 incidence test by serum assay[S].Beijing: Chinese Center for Disease Control and Prevention,2011. (in Chinese) 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心.HIV-1新发感染血清学方法检测方案[S].北京:中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心,2011.
[6] Hu HY,Shen S,Huan XP,et al.Estimation of HIV-1 incidence of MSM in Jiangsu province with BED-CEIA assay[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing:Natural Science,2010,30(4):467-471.(in Chinese) 胡海洋,沈圣,还锡萍,等.应用BED-CEIA方法估算江苏省男男性行为人群艾滋病病毒感染的新发感染率[J].南京医科大学学报:自然科学版,2010,30(4):467-471.
[7] Chen Q,Li Y,Sun YM,et al.A survey of HIV prevalence and incidence in men who have sex with men in Beijing,2008-2009[J].Chinese Medicinal Biotechnology,2011,6(4):270-273. (in Chinese) 陈强,李洋,孙燕鸣,等.2008 2009年北京市男男性行为者HIV-1感染率与新发感染率调查[J].中国医药生物技术,2011,6(4):270-273.
[8] Cui WG,Liu J,Nie YG,et al.Estimation of HIV type 1 incidence with BED-CEIA among High-risk populations in Henan,2009[J].Chinese Journal of Viral Diseases,2011,1(2):116-118.(in Chinese) 崔为国,刘佳,聂玉刚,等.应用BED-CEIA方法估算河南省2009年多类高危人群HIV-1新近感染率[J].中国病毒病杂志,2011,1(2):116-118.