疾病监测, 2013, 28(9): 743-747
DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2013.9.013
Epidemiological survey of cervical infection of human papilloma virus among women in Shaoxing, Zhejiang
QIU Yi-chao
Shaoxing Maternal and Child Health Center Shaoxing 312000, Zhejiang, China
Abstract
Objective To understand the cervical infection status of human papilloma virus (HPV) among women and the prevalent HPV genotype distribution in Shaoxing, Zhejiang province, and provide evidence for female genital warts and cervical cancer prevention and treatment as well as the development and wide use of HPV vaccine. Methods Retrospective analysis was conducted on the HPV detection data of women receiving health examination in our center from January 2008 to October 2012. Results Among 5521 women receiving health examination, 754 were infected with HPV (13.7%).The high risk infection accounted for 83.7% (631/754) and the low risk infection accounted for 14.3% (108/754). Simple infection accounted for 85.1% (642/754), mixed infection accounted for 14.9% (112/754). HPV-16 ranked first among 21 HPV genotypes, accounting for 22.5% (170/754), followed by HPV-52, 58, cp8304 and 33. There was no statistical difference in age specific HPV infection rate (P<0.05). Conclusion The overall HPV infection rate was 13.7% among the women in Shaoxing. High risk simple infection was prevalent. The first 10 HPV genotypes detected were 16, 52, 58, cp8304, 33, 11, 18, 53, 6 and 68. The distribution of HPV genotype varied with areas.
Keywords:    human papilloma virus   genotype   cervical cancer   human papilloma virus infection   Shaoxing  

浙江省绍兴地区宫颈人乳头瘤病毒感染流行病学调查
裘轶超
绍兴市妇幼保健院, 浙江 绍兴 312000
摘要
目的 了解浙江省绍兴地区女性宫颈人乳头瘤病毒(human papilloma virus, HPV)感染及亚型分布状况,为针对我国女性生殖器疣、宫颈癌防治,HPV疫苗的研制与推广提供参考。 方法 采用回顾性观察分析法,收集2008年1月至2012年10月在绍兴市妇幼保健院对健康体检女性进行宫颈HPV感染筛检者,统计分析其HPV感染及亚型分布情况。 结果 5521名健康体检女性,HPV总感染754例,总感染率为13.7%(754/5521)。其中高危型感染占83.7%(631/754),低危型感染占14.3%(108/754);单一感染占85.1%(642/754),多重感染占14.9%(112/754);21个亚型中HPV-16感染位居首位,占22.5%(170/754),其次依次为HPV-52,HPV-58, HPV-cp8304和HPV-33;各年龄段总HPV感染率差异无统计学意义(P<0.05)。 结论 绍兴地区普通女性HPV总感染率为13.7%,以高危型、单一感染为主,排名前10位亚型依次为16、52、58、cp8304、33、11、18、53、6、68。HPV亚型分布存在地区差异。
关键词:    人乳头瘤病毒   亚型   宫颈癌   HPV感染   绍兴地区  

内容大纲
1 对象与方法
1.1 一般资料
1.2 标本采集和处理
1.3 检测方法
1.4 统计学方法
2 结果
2.1 各年度的HPV感染情况
2.2 HPV感染率及各亚型分布状况
2.3 HPV感染各年龄段分布状况
2.4 HPV单一感染和多重感染分布状况
2.5 HPV三种未分高低危型别致癌性高低分析
3 讨论
3.1 不同地区HPV总感染率和基因型别比较分析
3.2 HPV感染的年龄阶段比较分析
3.3 三种未分高低危的HPV亚型的分布及宫颈病变发生率探讨分析
　　现代医学界公认高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus， HPV)感染是宫颈癌的主要危险因素。近年来HPV疫苗的研制与推广成为预防HPV感染的热点。但国际上不少地区的流行病学资料表明，HPV感染基因型分布存在地域性差异，其致癌性和预后也不同[1]。现对绍兴地区的5521名健康体检女性，进行宫颈HPV感染状况及基因型的调查分析如下。
1 对象与方法
1.1 一般资料
　　采用回顾性观察分析法，收集2008年1月至2012年10月，在绍兴市妇幼保健院进行妇女病健康检查过程中，接受HPV检测的实验室结果，剔除复诊病例，共5521人进行回顾性统计分析。该人群主要针对的是企事业单位、政府部门等组织健康体检和个人自主健康体检(包括婚前、孕前、产后、各生育年龄段和围绝经期、部分老年期)有性生活的女性。基本代表了绍兴地区有性生活女性各年龄段的宫颈HPV感染状况。对象年龄最小13岁，最大74岁，平均年龄(31.7±7.65)岁。
1.2 标本采集和处理
　　避开月经期，暴露宫颈，并拭去宫颈表面分泌物，用配套宫颈刷 置于宫颈口顺时针轻度用力旋转5～10周，获得足够的移行区上皮细胞样本，将样本放入专用细胞保存液中，折断宫颈刷柄，旋紧管盖，做好样本标记送检。4 ℃保存，3天内检测。
1.3 检测方法
　　应用HPV DNA精确分型检测方法，以凯普医用核酸分子快速杂交仪(Hybrimax)为平台， HPV基因微阵列分型检测试剂盒，经过DNA提取、PCR扩增、导流杂交, 最后在一张低密度基因芯片薄膜上进行杂交结果肉眼判读21种HPV亚型病毒感染结果：高危型HPV(与宫颈癌和宫颈上皮内瘤病变有关)包括HPV-16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68,共13种亚型；低危型HPV(与外生殖器尖锐湿疣等良性病变有关)包括HPV-6、11、42、43、44,共5种亚型；还有3种未明确高低危亚型(HPV53、66、CP8304)。包括HPV混合型感染。
1.4 统计学方法
　　应用SPSS 21统计学软件，不同年龄组感染率比较采用χ2检验，P<0.05,表示差异有统计学意义。对多重感染患者(各亚型有2种或2种以上者)，各型别阳性率重复计算。高危型感染率和低危型感染率的计算在多重感染患者中也重复计算。
2 结果
2.1 各年度的HPV感染情况
　　从2008年1月到2012年10月，年监测人数在逐年上升，从2008年的758人到2012年10月累计1706人，增长1倍多(图1)。可以看出普通女性对宫颈HPV筛查的意识在逐年增强。但总感染率逐年基本呈下降趋势(图2)：2008年总感染率为146/758(19.26%)；2009年为182/977(18.63%),2010年为142/1037(13.69%)，2011年为106/1043(10.16%)；2012年为178/1706(10.43%)。
2.2 HPV感染率及各亚型分布状况
　　5521名健康体检女性中有754名感染HPV，总感染率为13.7％。感染率最高的型别是HPV-16，占22.5%(170／754)，其次常见型别前5名依次为 HPV-52、HPV-58、HPV-cp8304、HPV-33、HPV-11，见表1。其中单一高危型感染461例，前3位依次HPV16、52、58型；单一低危型别感染率78例，以HPV11、6型为主；单一未分高低危型别感染103例,最常见是HPV-cp8304型。

图1 2008-2012年HPV检测情况
Figure 1 Result of HPV detection, 2008-2012
2008-2012年HPV检测情况

图2 2008-2012年HPV感染率比较
Figure 2 Annual HPV infection rate, 2008-2012
2008-2012年HPV感染率比较


表1 754例感染者各HPV亚型分布情况
Table 1 Distribution of HPV genotypes among 754 infection cases
类别亚型例数构成比/%
高危型
HPV-1617022.5
HPV-5211214.9
HPV-5810113.4
HPV-33597.8
HPV-18516.8
HPV-31506.6
HPV-68314.1
HPV-39253.3
HPV-56111.5
HPV-5970.9
HPV-3560.8
HPV-4550.7
HPV-5130.4
合计6310.8
低危型
HPV-11547.2
HPV-6364.8
HPV-43121.6
HPV-4230.4
HPV-4430.4
合计1080.1
未分高低危型
HPV-cp83047610.1
HPV-53496.5
HPV-66293.8
合计1540.2
  注： 若某人同时感染HPV-16、54、cp8304，则计算例数、率时分别在HPV-16，HPV-54，HPV-cp8304各计算一次。计算高危型感染、低危型感染、未分高低危型感染例数和率时也同样重复各计算一次。

2.3 HPV感染各年龄段分布状况
　　HPV受检人群年龄分布与各年龄HPV感染分布趋势基本一致，详见表2。表2表明，受检年龄平均(31.7±7.65)岁，众数29岁；感染平均年龄(32.38±8.07)岁，众数29岁。进而依据年龄组分为11组，各组HPV-DNA检出率。HPV总感染率存在2个高峰：一是20岁以下组，最高占20%(2/10)；二是40～50岁组，占18％以上；感染率最低是65岁以上占7.7％(1/13)。各年龄组总HPV感染率差异无统计学意义 (P>0.05)。高危型感染率高峰在40～50岁组，最低在65岁以上组；低危型感染率最高在20岁以下组，60岁以后基本无感染。
2.4 HPV单一感染和多重感染分布状况
　　不同年龄组HPV单一感染和多重感染检出情况见表3，单一感染642例，占85.1％(642／754)；多重感染112例，占14.9％(112／754)，其中二重感染占11.9％(90／754)，三重感染占2.1％(16／754)，四重感染占0.8％(6／754)，见表3。
2.5 HPV三种未分高低危型别致癌性高低分析
　　 HPV-cp8304具有高感染率，所占比例10.1%(76/754)，位居第4位，对其致癌性高低进行了观察分析。对其中单一感染54例，混合感染22例，进行了细胞学(TCT)和组织学(阴道镜下活检)结果的随访统计。混合感染22例中发生3例宫颈上皮内瘤变(CINⅡ~Ⅲ)，发生率13.6%(3/22)，感染型别均为HPV-16、cp8304双重感染；3例湿疣，发生率13.6%(3/22)，型别分别为：HPV-11、16、53、cp8304；HPV-58、cp8304；HPV-6、16、66、cp8304三组混合感染；显然，混合感染无法从单因素方面分析出HPV-cp8304的致癌性高低。所以再对该3种型别单一感染病例进行了TCT细胞学异常和组织学异常结果观察分析见表4。HPV-53单一感染者的宫颈上皮内瘤变发生率为3.22%(1/31)；HPV-cp8304单一感染的湿疣样良性病变发生率为1.85%(1/54)，未见宫颈癌或癌前病变。HPV-66单一感染中均未见到良恶性或癌前病变。

表2 不同年龄组HPV感染状况
Table 2 HPV infection status in all age groups
年龄组(岁) 受检人数 总感染 高危型感染 低危型感染 未分高低感染
人数 构成比/% 人数 构成比/% 人数 构成比/% 人数 构成比/%
<2010220.0110.0110.000.0
20~4537616.85612.4143.1153.3
25~240427711.52078.0411.7632.6
30~124816413.112510.0241.9282.2
35~5669015.96411.3132.3162.8
40~3676718.35314.471.9102.7
45~2815118.14114.631.1124.3
50~1071413.198.421.932.8
55~50918.0714.012.036.0
60~22313.6313.600.014.5
>651317.717.700.000.0
合计552175413.756710.31061.91512.7
  注：若某对象既有高危型16感染，又有低危型41感染，其计算时分别重复计入高危型感染率和低危型感染人数和率。各年龄组间总感染率 χ2检验，χ2=0.818，P>0.05，差异无统计学意义；其他各种型别感染率各年龄组统计分析，P>0.05，差异无统计学意义。

表3 HPV单一感染和多重感染不同年龄组构成情况
Table 3 Distribution of simple and mixed HPV infections in all age groups
年龄组(岁) 单一感染 双重感染 三重感染 四重感染 多重感染
人数 构成比/% 人数 构成比/% 人数 构成比/% 人数 构成比/% 人数 构成比/%
<20150.0150.000.000.0150.0
20~6180.31114.533.911.31519.7
25~23283.83512.682.920.74516.2
30~14487.8169.821.221.22012.2
35~8291.177.800.011.188.9
40~5886.6811.911.500.0913.4
45~4078.41019.612.000.01121.6
50~14100.000.000.000.000.0
55~777.8111.1111.100.0222.2
60~266.7133.300.000.0133.3
>651100.000.000.000.000.0
合计64285.19011.9162.160.811214.9


表4 不同型别单一感染病例TCT异常及随访情况
Table 4 TCT abnormality and histological abnormality of simple infection cases of 3 unknown genotypes
型别 单一感染数 TCT异常情况 组织学随诊情况
ASC-US LSIL HSIL 未见异常 湿疣 CINⅠ~Ⅲ 失访
HPV-cp8304542201102
HPV-53312001010
HPV-66182202000

3 讨论
　　本次调查发现绍兴地区普通女性HPV总感染率13.70%，以高危型、单一感染为主。高危型感染占83.70%单一感染占85.10％，多重感染占14.90％，其中二重、三重、四重感染所占比例逐渐下降，五重感染以上为零。近5年HPV检测人数逐年上升，而感染率基本呈逐年下降趋势。分析原因，可能与普通女性对宫颈HPV检测意识，防御意识的逐步增强相关。
3.1 不同地区HPV总感染率和基因型别比较分析
　　 根据国内文献报道，本次研究发现绍兴地区女性总HPV感染率与闽南地区女性人乳头瘤病毒感染率13.40％相当[2]。除汕头市澄海区8.03%相对偏低外[3]，普遍低于大部分地区的感染率，如成都市龙泉驿区24.00％[4]，成都农村地区21.98％[5]，惠州惠城区17.71%[6]，梅州地区18.15％[7]，四川南充地区52.00％[8]，乐清地区32.67％[9]，山西大同市39.70％[10]，常德市16.70％[11]，广西玉林市19.14％[12]，天津市29.20％[13]，广东虎门地区19.00％[14]，福建感染率32.10%[15]。本研究是针对普通健康体检女性，更接近绍兴地区普通女性的HPV感染情况。
本研究结果显示绍兴地区排名前10位亚型依次为HPV-16、52、58、cp8304、33、11、18、53、6、68.符合HPV-16是最普遍的宫颈HPV病毒感染的癌基因类型[16]这一结论；并且与绍兴地区妇科门诊患者HPV感染率前几位型别一致[17]，高危型以16、52、58为主，低危以11、6为主。通过观察分析一些文献报道的不同地区的HPV感染状况 。国内多数地区HPV高危型感染以16、52、58为主，低危以11、6为主，仅存在次序性差异。HPV-cp8304、53在绍兴、闽南地区感染率相对比较高，由于很多地区忽略了HPV-cp8304的感染率统计，因此HPV-cp8304是否为中国人常见亚型的这一观点还需要大面积的流行病学调查。
3.2 HPV感染的年龄阶段比较分析
　　因为受检年龄频数差异较大，受检人数分布最多的是育龄高峰年龄段25~35岁，该阶段感染人数最多。但不同年龄段感染率在统计学上不存在明显差异。但相对来说，20岁以下、40~50岁是感染的两组高峰年龄段；40~50岁是高危型感染高峰年龄段；20岁以下是低危型感染高峰年龄段，65岁以上无论高危型还是低危型都是感染率最低的年龄段。分析其原因，HPV感染可能跟性生活的频繁相关，65岁以上，绝大部分性生活次数明显减少，所以感染率最低，尤其低危型，60岁以上基本没有感染；20岁以下总感染率和低危型感染率最高，可能跟此年龄段的性开放、宫颈阴道环境成熟度不够等相关。高危型感染以40～50岁为多数，考虑原因与该年龄段处于绝经前身体免疫低下状态等有关。
3.3 三种未分高低危的HPV亚型的分布及宫颈病变发生率探讨分析
　　HPV-cp8304、53、66三种亚型目前还没有明确定义高低危属性，从绍兴地区的统计发现，该三种亚型的感染率并不低，HPV-cp8304位居第四，HPV-53也位居前10位。因此对该三种型别感染与宫颈湿疣等良性病变还是宫颈癌或上皮内瘤变等相关性进行了观察统计，发现HPV-53单一感染者的宫颈上皮内瘤变发生率为3.22%(1/31)，倾向于高危型；HPV-cp8304单一感染的湿疣样良性病变发生率为1.85%(1/54)，未见宫颈癌或癌前病变，倾向于低危型。HPV-66单一感染中均未见到良恶性或癌前病变。由于样本量的限制，以上3型HPV的致癌性高低还有待于流行病学进一步调查分析。
综上所述，HPV感染率及不同亚型分布存在地区性差异，但没有显著的年龄段统计学差异。任何有性生活的女性都可能感染HPV，因此HPV的筛检十分必要。HPV疫苗的研制与推广应因地而异，HPV-16、52、58、cp8304疫苗研制亦可能成为国内不少地区的热点。当然疫苗的实用性还需要考虑不同HPV型别的致癌性差异，这方面还有待进一步研究探讨。

参考文献
[1] Szostek S,Klimek M,Zawiliska B,et al.Genotype specific human papilloma virus detection in cervical smears[J].Acta Biochim pol,2008,55：1-6.
[2]Jiang Y, Li Q,Li J,et al. Epidem iological investigation on human papilomavirus infection women in southern Fujian[J].Modern Preventive Medicine,2010,37(1):110-118. (in Chinese)江雨,李清,李健,等.闽南女性人乳头状瘤病毒感染流行病学调查分析[J].现代预防医学,2010,37(1):110-118.
[3] Zheng HS, Zheng DN, Li JM,et al. The survey of human papillomavirus infection and subtype in 2663 women [J]. Contemporary Medicine,2011,17(21)：20-21.(in Chinese)郑华生,郑迪楠,李剑民,等2663例普通女性HPV感染调查及其亚型分布[J].当代医学,2011,17(21)：20-21.
[4]Yang GJ, Liu YF, Zou XH, et al. Analysis on the distrbution of female cervical human papilloma virus infection subtypes in Longquanyi District of Chengdu[J]. Practical Journal of Clinical Medcine, 2012,9(2):87-88.(in Chinese)杨光建,刘远富,邹晓红,等.　成都市龙泉驿区女性宫颈人乳头瘤病毒感染亚型筛查结果分析[J]. 实用医院临床杂志,2012,9(2)：87-88.
[5] Yang XH,Qin XH, Xia FY,et al. Distribution characteristic of HPV genotype among women cervix in the country of Chengdu[J].National Medical Frontiers of China,2012,7(3)：82-83.(in Chinese)杨晓华,秦晓红,夏凤英,等. 成都农村地区女性宫颈HPV感染基因型别分布状况[J]. 中国医疗前沿,2012, 7(3)：82-83.
[6] Zeng YY, Tang GP, Zhong JS, et al. Subtype specific analysis of human papillomavirus infection in gynecological outpatients in Huicheng District of Huizhou [J].Medical Information,2011,24 (8):4994-4995. (in Chinese)曾育英,唐干平,钟继生,等.惠州市惠城区妇科门诊病人中HPV亚型感染分析[J].医学信息,2011,24(8)：4994-4995.
[7]Wang XY. Distribution status of cervix's infection of HPV and the subtypes of gene of women in Meizhou area. IMHN,November,2011,17(24):3103-3106.(in Chinese)王雪英. 梅州地区妇女宫颈HPV感染及基因亚型分布情况调查分析[J]. 国际医药卫生导报,2011,17(24):3103-3106.
[8] Fang L,Huang YS, Tang Z, et al.An investigation of prevalence of HPV infection among women in Nanchong area,Sichuan province[J]. Chinese Journal of Woman and Child Health Research,2011,22(1)：69-71. (in Chinese)方莉,黄义山,唐中,等.南充地区女性人乳头瘤病毒感染状况分析[J].中国妇幼健康研究,2011,22(1)：69-71.

[9] Zhou YQ,Xu H,Shen M,et al.Investigation into the status of HPV infection and distribution of HPV genotypes of women of Childbearing age in Yueqing city[J].Chinese Journal of Heahh Laboratory Technology,2010,20(11)：2868-2870. (in Chinese)周玉群,徐虹,沈默,等.乐清市育龄妇女宫颈脱落细胞检测HPV感染情况及分型[J].中国卫生检验杂志,2010,20(11)：2868-2870.
[10] Guo JC,Zhao FX,Liu RH.Prevalence and type distribution of human papillomavirus infection in women of Datong,China[J].Chin J Public Health Oct, 2009,25(10)：1159-1160. (in Chinese)郭俊成,赵富玺,刘润花.大同市成年女性HPV感染及基因型分析[J].中国公共卫生,2009,25(10)：1159-1160.
[11] Xu W,Zeng ML,Yang LM. Investigation on status of HPV infection in 1285 women engaged patients[J]. Practical Preventive Medicine,2009,16(1)：36-37. (in Chinese)徐维,曾孟兰,杨黎明1285例女性HPV感染状况调查[J]. 实用预防医学,2009,16(1)：36-37.
[12] Luo YD,Deng GS.Infection condition of cervix human papillomavirus infection in 862 women in Yulin[J]. Chinese Joumal of New Clinical Medicine,2009,2(12)：1270-1272. (in Chinese)罗宇迪,邓国生.玉林市862例女性宫颈人类乳头状瘤病毒感染状况分析[J].中国临床新医学,2009,2(12)：1270-1272.
[13] Yu DL, Tian LH, Wang YJ. Analysis on human papillomavirus infections in 1202 women reveiving health examination [J].Maternal and Child Health Care of China,2012,27 (20)：3085-3087. (in Chinese)于德亮,田立慧,王彦锦1202例健康体检妇女HPV感染情况分析[J]. 中国妇幼保健,2012,27(20)：3085-3087.
[14] Zhang X, Ruan JB,Chen JR,et al. Investigation of human papillomavirus infection in gynecological outpatients in Humen, Guangdong [J]. New Chinese Medicine,2011,42 (12)：828-830. (in Chinese)张霞,阮建波,陈金容,等.广东虎门地区门诊女性人乳头瘤病毒感染调查[J].新医学,2011,42(12)：828-830.
[15] Wang XC,Sun PM,Lin F, et al. The relationship between various subtype HPV infection and pathological changes of cervix[J].Int J Lab Med,2011,32(10):1024-1026. (in Chinese)王雪春,孙蓬明,林芬,等.某地区HPV不同亚型感染与宫颈病变的相关研究[J].国际检验医学杂志,2011,32(10):1024-1026.
[16] Li W, Wan YP. Progress in study of function of type 16 E5 protein of human papillomavirus [J]. Progress in Microbiology and Immunology,2010,38(1):63.(in Chinese)李薇,万艳平.人乳头瘤病毒16型E5蛋白功能研究进展[J].微生物学免疫学进展,2010,38(1)：63.
[17]Tao PP,Zhang GR,Bian ML,et al.Analysis of 21 genotypes of human papillomavirus infection in outpatient women[J].Journal of ChinaJapan Friendship Hospital,2008,22(4)：208-211. (in Chinese)陶萍萍,张国荣,卞美璐,等.妇科门诊21种人乳头状瘤病毒感染状况分析[J].中日友好医院学报,2008, 22(4):208-211.