可传播性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies，TSEs)是一类侵袭人类及多种动物中枢神经系统的退行性脑病，潜伏期长，致死率达100%。其感染因子目前认为是一种不含核酸、具有自我复制能力的感染性蛋白粒子-朊病毒(Prion)，因此此类疾病又称之为朊病毒病^[1]。目前已经在人类以及20余种动物中发现有自然发生或感染的TSE。人类的TSE，包括克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob，CJD)、致死性家族型失眠症(fatal familial insomnia，FFI)、吉斯特曼-斯特劳斯综合征(gerstmann-strussler-scheinker syndrome，GSS)和库鲁病(Kurn)^[2]。CJD又根据病因的不同可以分为4类：

散发型CJD(sporadic CJD， sCJD)、家族遗传型CJD(familial CJD or genetic CJD， fCJD or gCJD)、医源型CJD(iatrogenic CJD， iCJD)及变异型CJD(variant CJD， vCJD)^[3]。2006年中国疾病预防控制中心(CDC )病毒病预防控制所克雅氏病监测中心开始了全国CJD(包括GSS和FFI)监测，目前监测点覆盖了12个省(直辖市、自治区)。本研究主要对我国(未包括香港、澳门和台湾地区，以下同)2012年CJD的监测数据进行总结和分析。

我国CJD的监测系统覆盖北京、上海、天津、重庆、吉林、陕西、湖北、广东、贵州、安徽、河南、新疆12个省(直辖市、自治区)。每个监测省设置1～2个哨点医院(省级三甲医院)，在各省级CDC的协调下完成监测工作。哨点医院神经科医生主要负责收集临床病例资料及样品，省级CDC主要负责收集病例的流行病学资料，并将收集到的临床病例资料、流行病学资料及样品送至中国CDC病毒病预防控制所克雅氏病监测中心进行实验室检测。专家组根据病例的临床资料，脑组织、脑脊液和血液的各种检测结果进行会诊，依据《克雅氏病诊断标准》做出处理意见^[4]，并将最后的处理意见反馈给省级CDC，再由省级CDC反馈给相应的哨点医院。

所有CJD监测病例均按照《我国CJD监测实施方案》中的相应报告表格填写临床及流行病学信息表。其中临床病例资料主要包括病例的一般情况、首发症状、主要临床表现、临床检查(包括脑电图、睡眠运动扫描、磁共振成像)结果、样品信息及病例的死亡信息。流行病学资料主要包括居住信息、家族信息(是否在家族成员中出现过痴呆患者)、既往病史(外科手术病史及器官移植史、脑垂体提取激素使用史、输血及献血史)、特殊职业(包括医护人员、兽医及屠户)。病例诊断所收集的临床样本包括脑组织、脑脊液(CSF)及抗凝血。

活检及尸检的脑组织样 本，-80 ℃保存；脑脊液样本采集1～2 ml，外观透亮，无血液污染，-20 ℃保存；血液样本采集1～2 ml外周静脉的抗凝血，-20 ℃保存。所有样本需按传染性物质相关运输规定进行低温运输。

(1) 脑脊液中14-3-3蛋白检测 脑脊液中14-3-3蛋白阳性是CJD诊断的重要参考条件之一。取脑脊液标本20 μl，加入等量的2×SDS上样缓冲液，煮沸后按照标准操作流程进行Western blot检测，其中一抗用1 ∶ 1000稀释的14-3-3蛋白特异性多克隆抗体(Santa Cruz公司)，二抗用1 ∶ 5000稀释的辣根过氧化物酶标记抗兔IgG(Thermo公司)，最后用ECL检测试剂盒进行显色^[5]。阳性对照采用10%羊脑组织匀浆。

(2) PRNP基因的扩增和序列分析  PRNP基因是朊蛋白基因，PRNP基因突变，可导致遗传型朊病毒病发生。人类PRNP基因129位氨基酸呈多态性分布，包括Met/Met(M/M)纯合子、Met/Val(M/V)杂合子、Val/Val(V/V)纯合子。129位氨基酸多态性与疾病易感性有关，同时参与决定疾病神经病理变化、临床病程等，129为氨基酸纯合子比杂合子更容易患sCJD。利用DNA提取试剂盒(QIAGEN公司)，从外周血中提取基因组DNA。然后用PRNP基因特异性引物进行PCR扩增、测序^[6]，并与PRNP基因标准序列(NCBI:NM-183079.1)进行比对，检测129位氨基酸的多态性和PRNP基因是否有突变。

2012年CJD监测网络共上报CJD监测病例242例，根据《克雅氏病诊断标准》^[4]，发现sCJD确定诊断病例1例，脑组织中PrPSc蛋白检测为阳性；sCJD临床诊断病例63例，占报告病例的26.03%；sCJD疑似诊断病例29例，占报告病例的11.98%；fCJD或gCJD诊断病例8例，占报告病例的3.31%; 致死性家族型失眠症(D178N突变，129M/M)病例5例，占报告病例的2.07%。遗传型CJD病例突变分别为R208H、E196A和V180I各1例、E200K 2例、T188K3例。

2012年度首例病例报告日期为1月19日，最后1例病例报告日期为12月26日，病例报告无季节聚集性。

2012年总共有17个省(直辖市)有病例报送，其中病例的主要来源省份仍为监测点省份，位于前3的省份分别为北京、河南和上海。另外，非监测点省份中河北、福建、浙江、山西、江苏、甘肃、山东也有病例的上报，见图1。

sCJD临床诊断病例年龄中值为59岁(39， 79)，其中男性为30例，女性为33例，男女性别比为0.91 ∶ 1；sCJD疑似诊断病例年龄中值为53岁(36， 84)，其中，男性为17例，女性为12例，男女性别比为1.41 ∶ 1。sCJD临床及疑似诊断病例的长久居住地呈散在分布，符合sCJD的发病特点。从临床及疑似病例职业分布来看，职业分布广泛，包括工人、农民、干部、教师等，见表1。

sCJD临床及疑似诊断病例的首发症状以快速进行性痴呆为最多，占所有病例的46.74%，其他症状包括精神症状、小脑症状、缓慢进行性痴呆、锥体系症状、皮质性失明等，见图2。

比较63例临床诊断病例和29例疑似诊断病例的临床表现，所有患者在病程的不同时期均出现进行性痴呆症状，而诊断标准中的4项典型临床表现(肌阵挛、视觉或小脑症状、锥体/锥体外系功能异 常、无动性缄默)在临床诊断病例和疑似诊断病例中出现的频率有所差异。除进行性痴呆外，在临床和疑似诊断病例中，同时出现4种临床表现，临床诊断病例为12.70%，疑似诊断病例为0；同时出现3种临床表现的在临床及疑似诊断病例中分别为46.03%和27.59%；同时出现2种临床表现的在临床及疑似诊断病例中分别为41.27%和72.41%，见表2。虽然在临床及疑似诊断病例中，大部分都仅有2种典型的临床表现，但是在2012年的监测病例中同时出现4种临床表现的病例大部分都出现在临床诊断病例中，提示CJD临床诊断病例较疑似诊断病例可能出现更多典型的临床表现。

脑脊液14-3-3蛋白阳性、脑电图EEG阳性以及头颅磁共振成像(MRI)典型改变均是CJD诊断的重要参考条件，我们把实验室检测结果中14-3-3蛋白阳性的病例定为A，EEG出现周期性三相波的病例定为B、头颅MRI出现特异性病变的病例定为C，见图3。3项检测中，把仅有1项检测结果阳性的定义为Ⅰ组即(A、B、C)，把同时出现2项检测结果阳性的定义为Ⅱ组即(A+B、A+C、B+C)，把同时出现3项检测结果阳性的定义为Ⅲ组即(A+B+C)，见表3。经数据分析，在临床诊断病例中Ⅱ和Ⅲ组的病例比Ⅰ组的病例表现出更多的典型临床症状。

在监测方案的指导下，通过2012年度全国CJD的监测工作，收集到了大量相对高质量的监测数据，完成了监测任务。根据2012年全国CJD的监测数据显示，监测病例数较2011年有所增加，其中临床诊断病例数有增加，但占总病例数的比例较2011年略有减少，整体发病情况基本符合sCJD的发病规律。

我国CJD监测系统自2006年全面开展以来，经过几年的运行已显示了良好的监测能力。通过此监测系统，收集到包括监测点及非监测点在内的病例，并且病例的数量呈逐年增长趋势。CJD监测中心对每个病例收集到的样本(包括脑组织、脑脊液、血液)依据实验标准操作流程进行检测，并依据此检测结果经专家会诊做出最后诊断，保证了诊断结果的准确性和可靠性。

2012年通过此监测系统共上报CJD监测病例242例，其中sCJD临床诊断病例63例，sCJD疑似诊断病例29例。通过对临床及疑似病例的流行病学资料进行分析，病例的报告时间分散，没有时间的聚集性；居住地点散在，没有地区的聚集性；职业分布广泛，没有人群中的聚集性；整体符合CJD三间分布的特点。

通过对血液的PRNP检测，共发现13例具有突变的病例，占总病例的4.32%，全部突变的位点在世界上已有报道。脑脊液14-3-3蛋白和脑电图特征性改变是CJD重要的临床诊断指标^[7]，通常在疾病发病的早期就有相应的改变，而且同时具有两者检测阳性的病例也相对具有较多的临床症状。但是脑脊液14-3-3蛋白在发病初期可能为阴性，脑电图在发病初期也很少出现特征性的改变，这些都为诊断带来很大的困难。在CJD的发病过程中，这两个指标也会经常出现波动状态。因此，在实际工作中我们也鼓励患者在脑脊液14-3-3蛋白阴性的时候要再次进行脑脊液的检测，并且条件允许的话，进行脑电图动态监测，这对于早期发现患者有很大的意义。经临床实践，疾病早期头颅MRI呈现壳核/尾状核异常高信号，特别是弥散加权像(DW)显示对称性或不对称性皮质(或皮层)“缎带(ribbon) 征”，对于该病的早期诊断有着重要意义，目前已纳入WHO对于CJD的诊断标准中^[8]。在2012年的63例临床诊断病例中，有27例在发病早期出现脑MRI检测尾状核及壳核高信号，而且其中有4例早于脑脊液14-3-3蛋白阳性的出现。通过对224份血液样品PRNP基因的检测，其中219例为M/M纯合子，占到97.77%，只有5例为M/V杂合子，此分布符合我国汉族人群129位等位基因分布特征，129位等位基因纯合子比杂合子更容易患sCJD^[9][10]。

2012年监测病例中首发症状仍然是以快速进行性痴呆最多，其他的症状包括精神症状、小脑症状、缓慢进行性痴呆、锥体系症状、皮质性失明等。对于临床及疑似诊断的sCJD病例，在病程的发展过程中均会出现进行性痴呆症状，而同时具有两项症状的病例占绝大多数，具有3项症状的次之，具有4项症状的最少。临床诊断病例相对比疑似诊断病例会出现较多的典型的临床症状。综合临床诊断病例的临床症状及实验室检查结果，脑脊液14-3-3蛋白、脑电图EEG以及头颅MRI 3项检测结果中，出现阳性结果越多的病例表现出更多的典型临床表现。

目前国际上对于CJD的监测已经从发达国家逐渐扩展到发展中国家，而且国际间的交流和共享更为密切。为了提高监测质量，我国CJD监测系统也进一步加强了各监测点之间的交流和合作。遵循CJD的监测方案，进一步扩大监测网络的范围，提高监测网络的质量对于全面掌握我国CJD的发病流行状况，严密监控vCJD在我国的出现，以及最大限度地减少CJD对我国公共卫生的威胁至关重要。