疾病监测, 2014, 29(1): 52-55
DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2014.01.014
Survey of echinococcosis prevalence in area neigbouring Tibet in Yunnan
YANG Ya-ming, WANG Li-bo, WU Fang-wei, YAN Xin-liu, MA Xiao-kun, DU Zun-wei
Yunan Provincial Institute for Parasitosis Prevention and Treatment, Puer 665000, Yunnan, China
Abstract
Objective To understand the prevalence status of echinococcosis in the area neigbouring Tibet in Yunnan province and provide scientific evidence for the prevention and treatment of echinococcosis. Methods The echinococcosis case record in hospitals in these areas were analyzed and field survey was condcuted in the places where echinococcosis cases occurred. The suspected cases in these areas were screened with B ultrasound detection and blood samples were taken from them for echinococcosis antibody detection with ELISA. The registering of domestic dogs, goats and cattle was conducted and dog stool samples were collected for echinococcosis antigen detection with ELISA. The livestock in slaught houses were checked, and samples were taken from these livestock for pathgen detection. Results A total of 35 echinococcosis cases were recorded in hospitals in Dali, Diqing and Lijiang prefectures. Four echinococcosis cases were detected in field survey with B ultrasound detection and serum antibody detection. The sero-antibody positive rate of human ranged from 8.70% to 42.10%(average 20.88%). The antigen positive rate in dog stool samples was 1.24%(0.44%-1.82%). Conclusion The result indicated that echinococcosis might spreaed at low level in Diqing, Lijiang and Dali, an area neighbouring Tibet, in Yunnan province.
Keywords:    Yunnan   echinococcsis   prevalence  

青藏高原向云南延伸地区包虫病现状调查
杨亚明, 汪丽波, 吴方伟, 严信留, 马肖鹍, 杜尊伟
云南省寄生虫病防治所, 云南 普洱 665000
收稿日期:2013-5-18
作者简介:杨亚明,男,云南省楚雄州永仁县人,主任医师,主要从事寄生虫病预防与控制工作
通讯作者:杨亚明,Tel:0879-2143629,Email:yangymsm@126.com
摘要
目的 了解云南与青藏高原接壤地区是否存在包虫病流行,及其流行范围、程度等,为开展云南省包虫病防治提供参考依据。方法 2008年8—10月对调查地区医院病例搜索,以此为依据选择调查点。对调查点居民以B超普查方式筛查疑似患者,采集血清开展包虫病抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)检测。对犬、羊、牛等家畜登记,收集犬粪开展犬粪包虫病抗原ELISA检测。对家畜屠宰场宰杀的家畜进行包块排查,收集样本进一步鉴定病原体。结果 在大理州、迪庆州和丽江地区的州、县医院病例搜索中,发现35例包虫病病例记录。在现场调查中,B超加血清抗体诊断4例包虫病,人血清抗体阳性率在8.70%~42.11%之间(平均20.88%)。犬粪包虫病抗原阳性率1.24%(0.44%~1.82%)。结论 初步可以判定在青藏高原的延伸地区——云南省的迪庆、丽江和大理的半牧半农地区可能为低度包虫病流行区。
关键词:    云南   包虫病   流行  
内容大纲
1 调查内容与方法
1.1 线索调查
1.2 病例的个案调查
1.3 调查地点的选择
1.4 疑似患者血清标本采集与检测
1.5 犬粪标本采集与检测
1.6 数据分析
2 结果
2.1 医院收治包虫病病例情况
2.2 人群B超检查结果
2.3 疑似病例调查结果
2.4 家畜养殖情况
2.5 犬感染检查结果
2.6 家畜棘球蚴病调查
3 讨论

云南省包虫病动物感染最早见于1940年朱佐治的犬感染细粒棘球绦虫报道, 其感染率为9.5%。1985年夏逊等在腾冲、洱源县调查发现羊、牛、猪均有包虫感染。1993年黄德生等在金平、麻栗坡、江城、勐腊调查犬细粒棘球蚴绦虫感染率分别为50%、100%、25%和50%。人体包虫病病例报道较早见于1978年昆明医学院附一、附二院外科的住院病历, 有10余例包虫病的记录,分布在德钦、剑川、丽江、祥云和禄丰等5县; 1981 2001年,云南省经手术确诊的包虫病病例共计24例, 主要集中在滇西的迪庆藏族自治州及大理白族自治州[1-2]。2005 2012年3月8年间云南省有包虫病疫情报告47例,病例较分散。2003年全国第二次重要人体寄生虫病调查,发现1例病例;抗体阳性率13.52%[3]。为了解云南省是否存在包虫病自然疫源地及其流行范围、程度等,为开展云南省包虫病防治提供科学依据。于2012年8 10月在云南省滇西北云岭山区的香格里拉县、维西、德钦、剑川、洱源县开展了调查。

1 调查内容与方法
1.1 线索调查  

在拟调查的州市县具备上腹部手术能力的医院(大理州人民医院、大理学院附属医院、洱源县人民医院、剑川县人民医院、迪庆州医院、迪庆州藏医院、香格里拉县医院、维西县医院、德钦县医院),查阅医院的病案记录,收集2005年以来的所有本省包虫病病例的有关信息,包括患者所在乡镇、村,了解病例的分布范围。

1.2 病例的个案调查  

根据《包虫诊断标准》(WS 257-2006),对接受调查的对象进行B超(疑似病例辅以血清学检查)和诊断;对查出的患者(疑似患者)进行个案调查,明确病例是否为本地感染病例。询问患者有无外出史,是否去过牧区、半农半牧区,当地有无牧业生产和养犬的习惯。

1.3 调查地点的选择  

以2010年 2012年内外科住院病历包虫病为线索,结合疫情分析和其他资料综合分析,并且具备养牛、羊和畅放猪和养犬习惯的村作为调查村。在被调查的县以行政村为单位按牧区、农区和城镇进行分层,按各层人口数占全县人口总数比例确定分层调查人数,再根据各层调查人数确定各层调查村数,每个抽样层4个村,共抽取12个村(每村至少200人,不足人数从邻村补充),全县至少调查2400人。最终选择云南云岭片区的香格里拉县小中甸乡、建塘镇,德钦县云岭乡、燕门乡,维西县永春乡、塔城乡和攀天阁,洱源县南大坪乡、炼铁乡,剑川县甸南镇、沙溪镇作为调查点。

1.4 疑似患者血清标本采集与检测  

通过便捷式黑白B超影像学检查,筛查出疑似包虫病患者,采集疑似患者的全血,现场离心分离,取血清,放入冻存管。保存在液氮罐内,带回省寄生虫病防治所实验室进行包虫IgG抗体(ELISA)检测。包虫IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)Test Kit for IgG to hydatid(ELISA),广东深圳生产,试剂批号:20120703。美国Bio-TeR公司生产的ELX 800自动酶标仪。按照试剂盒操作说明检测,简述:采用ELISA 方法, 每孔加入1 ∶ 100稀释的待检血清100 μl, 另加阳性对照、空白对照各1 孔、阴性对照2孔。置37 ℃避光温育30 min,然后用洗涤液洗涤3次, 除空白对照外每孔加酶标记物50 μl, 置37 ℃避光温育30 min。同前法洗涤后, 加底物和显色剂各50 μl置37 ℃避光反应10 min,立即加终止液50 μl。混匀后用酶标仪测定A450值,A值≥阴性对照3.1倍者判为阳性。

1.5 犬粪标本采集与检测  

在每个被调查县确定的调查村中按牧区、农区进行分层(包虫病大疫情网上患者居住村庄为必抽村庄),每个抽样层4个村,抽取12个村,每村抽取20个养犬户(人数不足时从邻村补足),每户采集1条犬的粪样,共采集240份。收集调查点家犬的犬粪进行分类编号,放置低温保存,带回省寄生虫病防治所实验室检测。为保证实验安全,用-70 ℃至-80 ℃冻存1周以上灭活感染性。犬粪包虫抗原检测试剂盒(酶联免疫法) Test Kit for Canine Hydatid Coproantigen(ELISA),广东深圳生产,试剂批号:20120608。美国Bio-TeR公司生产的ELX 800自动酶标仪按照试剂盒操作说明检测。简述:(1)样品处理:称取1 g犬粪,加入1 ml已稀释的粪便处理液,充分搅拌混匀,静置10 min,再经5000 r/min离心30 min,取上清液检验。(2)ELISA 检测:设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔;其中阴、阳对照孔分别加入阴性、阳性对照各100 μl,其他各样本检测孔先加样品稀释液50 μl,再取犬粪上清液50 μl加入板孔中。置37 ℃避光温育30 min,然后用洗涤液洗涤3次, 除空白对照外每孔加酶标记物50 μl, 置37 ℃避光温育30 min。同前法洗涤后, 加底物和显色剂各50 μl置37 ℃避光反应10 min。立即加终止液50 μl。混匀后用酶标仪测定A450值,A值>阴性对照3.1倍者判为阳性。

1.6 数据分析  

采用SPSS 11.0软件进行统计分析。

2 结果
2.1  医院收治包虫病病例情况  

在县级以上医院线索调查中,共查出包虫病症状的患者35例,其中2006 2012年分别有5、1、5、4、5、6和9例,男性13例、女性22例,年龄在9~70岁之间,其中剑川8例、鹤庆和洱源5例、宾川和香格里拉4例、德钦、祥云和巍山2例、南涧、永平和漾濞各1例。所有病例都来自大理州人民医院,其他医院未查出诊断病例。包虫病病例均由病理或B超等核实。

2.2 人群B超检查结果  

5县B超筛查7512人,平均年龄33.58岁,最小1岁,最大90岁;藏族占36.73%(2759/7511),白族占27.33%(2053/7511),汉族占23.88%(1041/7511),彝族占17.51% (1315/7511),傈僳族占4.06%(305/7511),其余为其他少数民族;男性占42.12%(3164/7511),女性 占57.84%(4345/7511)。共筛查出疑似病例153名, 肾脏囊肿49例,占32.02%,肝脏囊肿100例,占65.35%。现场调查中发现2例患者分别于2009年和2011年在西南医院和大理州医院确诊为包虫病患者并手术治疗,本次B超探查未发现病灶。4例B超检查阳性者,同时包虫抗体检测也阳性。

2.3 疑似病例调查结果  

在包虫病B超筛查中发现肝脏、脾脏、肾脏、腹腔中有囊肿并且不能判断包虫感染的患者,进一步抽取患者血清做包虫抗体检测。各县血清包虫IgG抗体水平差异有统计学意义(χ2=10.498,P<0.05),见表1。

表1 滇西北地区调查点人血清包虫IgG抗体ELISA检测结果
Table 1 Human serum detection result with ELISA in field survey
县名血清学检查
人数
包虫抗体阳性
人数
抗体阳性率
(%)
香格里拉县4648.70
德钦县19842.11
维西县601423.33
洱源县44818.18
剑川县13430.77
合计1823820.88
2.4 家畜养殖情况  

被调查村庄居民犬、牛、羊饲养情况见表2。自宰牛羊时间主要集中在每年12月左右。

表2 滇西北地区调查点家畜养殖情况
Table 2 Livestock raising in areas surveyed
县名 户数 犬(只) 羊(只) 牛(头) 自宰(只/头)
数量均数/户 数量均数/户 数量均数/户 数量均数/户
香格里拉4905641.154901.005 10010.40100.02
德钦5055421.071140.223 4466.824690.98
维西4652710.5836877.921 8964.074941.06
洱源9466370.6741454.381 2861.3000.00
剑川5641300.23760.132120.3700.00
合计297021440.7295123.2011 9404.029730.32
2.5 犬感染检查结果  

5个县共收集到犬粪样本1293份,抗原检测阳性16份,阳性率为1.24%。各县犬粪抗原检测差异无统计学意义(χ2=4.346, P>0.05),见表3。

表3 滇西北地区调查点犬粪包虫病抗原ELISA检测结果
Table 3 Echinococcosis antigen detection result in dog stool samples
县名检查犬数抗原阳性
犬数
抗原阳性率
(%)
香格里拉县38571.82
德钦县27951.79
维西县11910.84
洱源县45120.44
剑川县5911.69
合计1293161.24
2.6 家畜棘球蚴病调查  

选择有当地感染包虫病病例,并且具备养牛、羊和畅放猪习惯的县屠宰场作为调查点,检查肝、肺等器官,触摸有无囊状物、包块或结节,5县共调查家畜1965,其中羊60只,牛215条,猪1595只,均未发现异常情况。

3 讨论

本次流行病学调查,香格里拉县建塘镇红坡村在线索调查中发现1例包虫病例、现场调查B超诊断中发现2例阳性病例、犬粪中有发现5份阳性。血清学检查3份阳性,其中2份血清B超检查阳性。洱源县三营镇南大坪村在线索调查中发现1例包虫病例、现场调查B超诊断中发现2例阳性病例、犬粪中有发现1份阳性。血清学检查5份阳性,其中2份血清B超检查阳性。高度提示在所选调查地存在包虫病自然疫源地可能。初步证实在迪庆州香格里拉县和大理市洱源县存在棘球蚴绦虫。结合多年疫情报告以及其他调查资料分析,基本可以判定在青藏高原的延伸地区-云南省迪庆、丽江和大理的半牧半农地区包虫病低度流行。与之相邻的四川甘孜州、西藏昌都等地区是包虫病高度流行区[4-6],其地理环境、气候特征和半牧半农的少数民族生活习性与该调查地区很相似,可间接支持本次调查结论。建议将云南迪庆藏族及其相连地区纳入全国包虫病防治项目中,尽早开展防治和健康教育等综合防控。

本次调查也提示云南只有很少的医院能够诊断和治疗包虫病,需提高疫区B超医生和临床医生对包虫病的防病意识,加强他们的诊断知识和技能培训,以免误诊、漏诊包虫病。

云南省在1985年和1993年对包虫病的动物宿主开展过感染调查,但是对迪庆藏族自治州,大理白族自治州等地的犬、羊、猪等家畜宿主未见棘球蚴绦虫感染源报道 。本次调查仅对终宿主犬开展棘球蚴绦虫抗原筛查,抗原阳性率1.24%,提示犬可能是重要的传染源。犬、羊、猪等家畜未发现病原体。建议进一步开展相关调查与研究,探明棘球蚴绦虫的分布、种类。

本次调查获得的包虫抗体感率较高,接近高度流行区的水平[7-8],然而,包虫病例发现较少。这可能与当地发现病例能力较低有关,也可能与血清学检测方法特异性不高有关,特别是与带绦虫有交叉反应,值得进一步研究。

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