疾病监测, 2014, 29(3): 207-209
DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2014.03.011
Outer environment surveillance for avian influenza in Hunan,2009-2011
HU Shi-xiong, SUN Qian-lai, LIU Fu-qiang, YANG Hao, HUANG Yi-wei
Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention, Changsha 410005, Hunan, China
Abstract
Objective To understand the circulation of avian influenza virus in outer environment in Hunan province and provide evidence for the prevention and control of avian influenza. Methods Analysis was conducted on the outer environment surveillance data of avian influenza virus circulation in Hunan from 2009 to 2011. Results A total of 3370 environmental samples were collected and tested during this period, and the overall positive rate of avian influenza A virus was 7.0%. The positive rate of highly pathogenic H5 and H9 viruses was 2.3%. The detection peak was during winter-spring. The detection rates were high in alive poultry markets in urban and rural areas (17.8%), in poultry slaughter houses (14.1%), on chopping boards for killed poultry (17.4%) and in water used for washing poultry (15.7%). The detection rate in duck source samples (24.1%) was higher than that in chicken source samples (9.5%). Conclusion The circulation of avian influenza virus is active during winter-spring in Hunan. It is necessary to conduct target surveillance and health education among the people exposed to poultry in alive poultry markets and poultry slaughter houses. The virus detection in duck raising houses should be strengthened too.
Keywords:    avian influenza   environmental surveillance   epidemiology  

2009-2011年湖南省禽流感外环境监测结果分析
胡世雄, 孙倩莱, 刘富强, 杨浩, 黄一伟
湖南省疾病预防控制中心, 湖南 长沙 410005
收稿日期：2013-12-20
基金项目：湖南省卫生厅重点课题（No.A2011-006）
作者简介：胡世雄，男，湖南省娄底市人，主任医师，从事疾病控制工作
通讯作者：孙倩莱，Tel：0731-84305932，Email：sunql_hncdc@163.com
摘要
目的 分析2009-2011年湖南省禽流感外环境监测结果，了解湖南省外环境中禽流感病毒流行特点和趋势，探讨禽流感防控工作方向。方法 利用传染病监测平台信息管理系统数据，分析2009-2011年湖南省外环境中禽流感病毒三间分布情况。结果 2009-2011年，湖南省共采集并检测各类环境标本3370份，流感病毒总阳性率为7.0%，H5、H9型高致病性禽流感病毒阳性率为2.3%。流感病毒检测阳性率冬春季节存在高峰；且在城乡活禽市场（17.8%）和家禽屠宰厂（14.1%）中、宰杀或摆放禽肉案板表面拭子（17.4%）和清洗禽类的污水（15.7%）中较高；鸭类来源的标本检测率（24.1%）高于鸡类来源的标本（9.5%）。结论 冬春季节湖南省外环境中禽流感病毒流行较为活跃，湖南省应在禽流感流行季节来临前，针对暴露于城乡活禽市场和家禽屠宰厂、从事活禽宰杀工作的高危人群，以及鸭类养殖区域进行重点监测和宣传教育。
关键词:    禽流感   环境监测   流行病学  

内容大纲
1 资料与方法
1.1 标本采集
1.2 标本检测
1.3 数据分析
2 结果
2.1 一般情况
2.2 不同季度检测情况
2.3 不同监测场所检测情况
2.4 不同标本类型检测情况
2.5 有确切禽类来源标本检测情况
3 讨论
　　2005年湖南省发现中国大陆第1例人感染高致病性H5N1禽流感病例，引发了极大关注[1]。其后至今，湖南省发现的7例H5N1确诊病例均与接触或食用禽类动物有关。为了解禽流感病毒在禽类环境中的分布情况，2009年以来在中国疾病预防控制中心(CDC)的指导下，开展了禽类动物环境中禽流感病毒的监测，现将环境监测结果分析报告如下。
1 资料与方法
1.1 标本采集
　　在全省14个市(州)设立城乡活禽市场、家禽屠宰加工厂、家禽散养户集中的地区、家禽规模养殖场(户)和野生候鸟栖息地五类监测场所，每市(州)设两类监测场所作为监测点。每个监测点要求每季度采集10份以上外环境标本。
1.2 标本检测
　　 各市(州)CDC收到标本后1周内完成实时荧光定量PCR检测，步骤如下：3000~4000 r/min，15~20 s涡旋混匀器混匀；4 ℃下3000 r/min离心10 min；取上清液进行标本检测：使用商品化试剂盒，Ct<35判定为阳性。阳性标本送省CDC复核，省CDC经实时荧光定量反转录-聚合酶链反应 (Real Time Fluorescent Quantitative Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, rRT-PCR)复核后的阳性标本上送国家流感中心(CNIC)进行微量中和试验再度复核，以CNIC反馈的微量中和试验结果为准。2009年仅开展A型通用引物检测未作分型，2010年开始增加H5/H9亚型分型。
1.3 数据分析
　　标本信息通过传染病监测平台信息管理系统下载，经整理后和CNIC反馈结果一同录入Excel数据库，计算不同时间、场所和来源的环境标本间A型流感病毒检测阳性率是否存在差异。通过SPSS 11.0和Excel软件进行统计分析，采用χ2检验，检验水准取α=0.05(双侧)。
2 结果
2.1 一般情况
　　2009-2011年共采集并检测各类环境标本3370份。来自城乡活禽市场729份，家禽屠宰加工厂319份，家禽散养户657份，大规模家禽养殖场794份，野生候鸟栖息地692份，标本来源不详179份；35.6%为禽类粪便，27.6%为笼具表面拭子，18.3%、11.3%为禽类饮水和清洗禽类的污水，0.7%为宰杀或摆放禽肉案板表面拭子，其他类型(如禽类羽毛、死禽内外表面拭子等)占6.6%。
3370份标本中，38份为A(H5)型阳性，27份为A(H9)型阳性，14份为A(H5/H9) 型阳性，其他A型阳性156份，流感病毒总阳性率为7.0%，H5或H9型高致病性禽流感病毒阳性率为2.3%，见表1。

表1 2009-2011年湖南省禽流感外环境监测结果
Table 1 Result of outer environment surveillance for avian influenza in Hunan,2009-2011
年份A
(H5)		A
(H9)		A
(H5/H9)		A
(未分型)		阴性总计总阳性率
(%)
2009---476877346.4
2010167533114812095.1
20112220976130014278.9
合计382714156313533707.0
  

2.2 不同季度检测情况
　　2009-2011年间湖南省禽流感外环境监测结果表明，除2010年以外，每年冬春季节(第四季度、第一季度)，环境中流感病毒检测阳性率都会出现一个高峰，见图1。

图1 2009-2011年湖南省外环境监测禽流感病毒检测阳性率时间变化趋势
Figure 1 Trend of detection positive rate of avian influenza virus in outer environment surveillance in Hunan,2009-2011
2009-2011年湖南省外环境监测禽流感病毒检测阳性率时间变化趋势
  注：(1)2009年从第二季度开展外环境监测。

2.3 不同监测场所检测情况
　　城乡活禽市场为17.8%(130/729)，家禽屠宰厂为14.1%(45/319)，家禽散养户为5.2%(34/657)，大规模家禽养殖场为1.8%(14/794)，野生候鸟栖息地为0.6%(4/692)。不同监测场所检测阳性率总体差异有统计学意义(χ2=239.40，P<0.01)，通过两两比较，城乡活禽市场与家禽屠宰场间检测阳性率差异无统计学意义(χ2=2.22，P=0.14)，但两者与家禽散养户、大规模家禽养殖场、野生候鸟栖息地之间检测阳性率差异均有统计学意义(P值均<0.001)，表明城乡活禽市场和家禽屠宰场病毒检测阳性率高于家禽散养户、大规模家禽养殖场、野生候鸟栖息地，见图2。

图2 2009-2011年湖南省外环境监测不同监测场所禽流感病毒检测阳性率
Figure 2 Positive rate of outside environment surveillance of different type of monitoring site in Hunan,2009-2011
2009-2011年湖南省外环境监测不同监测场所禽流感病毒检测阳性率

2.4 不同标本类型检测情况
　　3370份标本中， 宰杀或摆放禽肉案板表面拭子标本检测阳性率为17.4%(4/23)。其余类型标本检测阳性率分别为：清洗禽类的污水15.7%(60/382)，其他类型12.7%(28/221)，粪便6.3%(75/1199)，笼具表面拭子5.3%(49/929)，禽类饮水3.1%(19/616)。不同标本类型检测阳性率总体差异有统计学意义(χ2=79.29，P=0.00)，经两两比较，清洗禽类的污水、宰杀或摆放禽肉案板表面和其他类型标本中检测阳性率无统计学差异，但是清洗禽类的污水标本中检测阳性率明显高于粪便、笼具表面和禽类饮水(P值均<0.001，见图3)。

图3 2009-2011年湖南省外环境监测各种标本类型禽流感病毒检测阳性率
Figure 3 Positive rate of avian influenza virus in different samples in outer environment surveillance in Hunan,2009-2011
2009-2011年湖南省外环境监测各种标本类型禽流感病毒检测阳性率

2.5  有确切禽类来源标本检测情况
　　226份有确切禽类来源的标本表明：鸭源标本禽流感病毒阳性率为24.1%(14/58)，鸡源标本阳性率为9.5%(16/168)。二者差异有统计学意义(χ2=8.00，P<0.01)，表明鸭类中禽流感病毒感染率高于鸡类。
3 讨论
　　从2009-2011年湖南省禽流感外环境监测结果来看，近年来湖南省外环境以及禽类中一直存在流感病毒，并且以A未分型为主，提示血清型复杂。因为目前只做了H5、H9亚型的鉴定，将来可考虑在A未分型标本中开展更多亚型的鉴别。
　　湖南省2009-2011年禽流感外环境监测检测阳性率都出现冬春季节(一、四季度)的高峰，但2010年第一季度环境标本流感病毒检测阳性率呈异常低值，则与2010年湖南省的异常气候有明显关联[2](第一季度平均气温与常年同期相比约高1~2 ℃，而4月平均气温低于常年同期1.9 ℃)，说明低温条件对环境中流感病毒流行极为重要。中国CDC对2003 2010年全国39例人禽流感病例的分析亦表明79.5%的病例在冬春季节发病。因此，开展禽流感防控工作时应教育公众冬春时节尽可能减少与禽类的接触，并采取针对性措施减少感染病毒的风险。
　　监测结果表明湖南省城乡活禽市场和家禽屠宰厂环境中A型流感病毒阳性率分别为17.8%和14.1%，在所有监测环境检测阳性率中居前2位。说明现有禽类活禽宰杀方式下，禽流感病毒在这些地方通过活禽接触而感染人的风险较高，极易造成由禽到人的传播[3]。本研究中，宰杀或摆放禽肉案板表面拭子与清洗禽类的污水检测阳性率较高，与湖北省的研究结果相符[4]，提示宰杀环节中所用的水和案板更容易被病毒污染。现有许多文献都揭示活禽市场是人感染高致病性禽流感的独立危险因素之一 [5]，而且是城市居民的主要感染方式。上述结果提示开展高致病性禽流感防控时需要注意加强动物卫生检疫，并且提高从事活禽宰杀加工等工作人员的自我保护意识。
　　部分有确切禽类来源结果显示鸭类标本检测阳性率远高于鸡类标本，提示湖南省鸭类中流感病毒感染比例很可能高于鸡类，鸭可能是传播过程中的主要宿主，有必要在湖区等水网密布的鸭类养殖区域开展重点监测。
　　综上所述，湖南省2009-2011年禽流感外环境监测结果表明，低温季节外环境中禽流感病毒流行较为活跃，城乡活禽市场和家禽屠宰厂中禽流感病毒检出率较高，鸭可能是湖南省禽流感传播过程中的主要宿主。应在冬春季节来临前，针对暴露于城乡活禽市场和家禽屠宰厂、从事活禽宰杀工作的高危人群和鸭类养殖区域开展重点监测和宣传教育，将来可进一步开展A未分型的亚型鉴定工作。

参考文献
[1] Yu HJ, Chen YX, Shu YL, et al. The first confirmed human case of avian influenza A(H5N1) in mainland, China[J].Chinese Journal of Epidemiology, 2006, 27(4):281-287.(in Chinese) 余宏杰, 陈裕旭, 舒跃龙, 等.中国大陆首例人感染禽流感病毒(H5N1)的调查与确认[J].中华流行病学杂志, 2006, 27(4):281-287.
[2] Hunan Meteorological Administration, Hunan Climate Bulletin in 2010[EB/OL]. (2011-03-22)[2013-05-09]. http://www.hnqx.gov.cn/prod/11/index.htm. (in Chinese) 湖南省气象局. 2010年湖南省气候公报[EB/OL]. (2011-03-22)[2013-05-09]. http://www.hnqx.gov.cn/prod/11/index.htm.
[3] Kang N, Tan Y, He WT, et al. Pathogen surveillance of avian influenza virus in farmers market environment samples in Guangxi, 2009[J].Chinese Journal of Preventive Medicine, 2011, 45(4):374-275.(in Chinese) 康宁, 谭毅, 何为涛, 等.2009年广西农贸市场环境标本禽流感病毒的病原学监测[J].中华预防医学杂志, 2011, 45(4):374-275.
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