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文章信息
- 沈美萍, 吴晓燕, 王良平
- SHEN Mei-ping, WU Xiao-yan, WANG Liang-ping
- 2009-2013年浙江省平湖市沙门菌临床感染血清型及耐药性分析
- Serotypes and drub resistance of Salmonella isolated from clinical infection cases in Pinghu, Zhejiang
- 疾病监测, 2014, 29(7): 560-563
- Disease Surveillance, 2014, 29(7): 560-563
- 10.3784/j.issn.1003-9961.2014.07.014
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文章历史
- 收稿日期:2014-2-14
2. 嘉兴市第二医院检验科, 浙江 嘉兴 314000
2. The Second People's Hospital of Jiaxing, Jiaxing 314000, Zhejiang, China
沙门菌是引起人类胃肠炎或食物中毒的常见食源性病原菌之一,血清型复杂 [1],广泛分布于自然界中,可引起暴发流行和食物中毒,也可引起院内交叉感染。为了解浙江省平湖市第一人民医院沙门菌感染的血清型分布和药敏试验及临床特征,对分离到的91株沙门菌进行分析,以其对临床防控及用药作出指导。
1 材料与方法 1.1 标本来源91份标本均来自平湖市第一人民医院2009年1月至2013年6月的门诊和住院患者,并剔除了全院各科不重复病例,其中住院85例,门诊6例,患者年龄从11天至78岁。23株来自血液,67株来自粪便,1株来自胆汁。
1.2 鉴定及药敏细菌鉴定按《全国临床检验操作规程》 [2]进行。血液标本注入血培养需氧瓶和厌氧瓶内增菌,置入梅里埃BacT-ALERT 3D血培养仪,报警后移种血琼脂平板和肠道选择培养基(SS、麦康凯);粪便和胆汁标本直接接种于SS平板、麦康凯平板,37 ℃孵育18~24 h,挑取麦康凯平板上不发酵乳糖的无色透明;SS上不透明或透明、无色或中央带黑色的菌落,接种三糖铁琼脂斜面(KIA)进行初步鉴定。如斜面为红色,底部变黑并产气或不产气,进一步进行生化鉴定。仪器鉴定为沙门菌的菌株,先用多价O抗血清(A~F)对沙门菌分离株进行分群,多价抗血清凝后再用分别代表每个O血清群的单价因子血清定群,O分群之后再用H因子血清检查第一相和第二相H抗原,综合O、H、及Vi因子血清的检查结果判断沙门菌的血清型。鉴定与药敏均采用法国梅里埃公司VITEK-2 compact系统。所有菌株的诊断均经全面生化反应和沙门菌多价抗血清作玻片凝集试验两者相符后确定。系统药敏检测采用微型化的肉汤稀释试验。应用光电比浊原理,根据不同的药物对不同的菌最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)不同,每一种药物一般选用3种不同药物浓度,每一药敏试卡可同时作10种药物的MIC测定,经6 h孵育后,每隔一定时间自动测定小孔中细菌生长状况,即可得到待测菌在各浓度的生长率。待检菌斜率与阳性对照孔斜率之比值,经回归分析得到MIC值,并根据NCCLLS(美国国家临床实验室标准化委员会)标准获得相应的S、I和R结果。
1.3 培养基与试剂SS、麦康凯琼脂粉、鉴定和药敏板均购自法国生物梅里埃公司。沙门菌诊断血清由兰州生物制品检定所提供。
1.4 质控菌株及统计方法质控菌株采用ATCC25922、ATCC27853,数据录入Whonet 5.6软件并统计。
2 结果 2.1 沙门菌菌群分布及菌型分布情况91例沙门菌感染的病例中,男49例,女42例,以<7岁患儿居多,占74.73%(68/91);其中<3岁46例(50.54%),3~6岁22例(24.18%),7~11岁3例(3.3%),12~27岁3例(3.3%),>28岁17例(18.68),菌型分布以鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌为主占53.85%(49/91),各菌型无性别差异。其中血液分离中以甲型副伤寒,伤寒沙门菌为主,粪便则以鼠伤寒与肠炎沙门菌为主,见表 1、2。
血清型 | 株数 | 构成比(%) |
鼠伤寒沙门菌 | 28 | 30.77 |
肠炎沙门菌 | 21 | 23.08 |
甲型副伤寒沙门菌 | 10 | 10.99 |
伤寒沙门菌 | 8 | 8.79 |
丙型副伤寒沙门菌 | 5 | 5.49 |
山夫登沙门菌 | 5 | 5.49 |
都伯林沙门菌 | 5 | 5.49 |
鲁齐齐沙门菌 | 3 | 3.30 |
德比沙门菌 | 3 | 3.30 |
圣保罗沙门菌 | 2 | 2.20 |
伦敦沙门菌 | 1 | 1.10 |
合计 | 91 | 100.00 |
菌株 | 标本来源(株) | ||
血液 | 胆汁 | 粪便 | |
伤寒沙门菌 | 8 | 0 | 0 |
甲型副伤寒沙门菌 | 9 | 1 | 0 |
丙型副伤寒沙门菌 | 4 | 0 | 1 |
鼠伤寒副伤寒 | 1 | 0 | 27 |
肠炎沙门菌 | 1 | 0 | 20 |
山夫登沙门菌 | 0 | 0 | 5 |
都伯林沙门菌 | 0 | 0 | 5 |
鲁齐齐沙门菌 | 0 | 0 | 3 |
德比沙门菌 | 0 | 0 | 3 |
圣保罗沙门菌 | 0 | 0 | 2 |
伦敦沙门菌 | 0 | 0 | 1 |
合计 | 23 | 1 | 67 |
91例沙门菌病例的主要临床表现为发热、腹泻,腹痛以阵痛为主,腹泻以黄色水样便为主,其中血液沙门菌感染临床表现以发热为主,占82.61%(19/23),腹泻、呕吐分别为4.35%(1/23)、8.70%(2/23),黄色水样便占23.09%(6/23)。非入血沙门菌临床表现以腹泻(>3次)、阵痛、黄色水样便为主,分别占70.15%(47/67)、97.15%(65/67)、97.15%(65/67),发热占47.76%(32/67),64.18%(43/67)患者无呕吐。
2.3 病原菌耐药性分析沙门菌属对临床常用的抗菌药物敏感性较高,除对氨苄西林、四环素、哌拉西林耐药率在50%以上,大部分敏感率在70%以上,对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦敏感率甚至在100%,见表 3。5种主要沙门菌血清型对常见抗菌药物的耐药率见表 4。
抗菌药物 | 敏感 | 耐药(1) | |||
敏感株数 | 敏感率(%) | 耐药株数 | 耐药率(%) | ||
氨苄西林 | 31 | 34.07 | 60 | 65.93 | |
氨苄西林/舒巴坦 | 48 | 52.75 | 43 | 47.25 | |
头孢噻肟(头孢曲松) | 73 | 80.22 | 18 | 19.78 | |
头孢他啶 | 70 | 76.92 | 21 | 23.08 | |
头孢吡肟 | 70 | 76.92 | 21 | 23.08 | |
左氧氟沙星 | 86 | 94.51 | 5 | 5.49 | |
亚胺培南 | 91 | 100.00 | 0 | 0.00 | |
美罗培南 | 91 | 100.00 | 0 | 0.00 | |
头孢哌酮/舒巴坦 | 71 | 78.02 | 20 | 21.97 | |
哌拉西林/他唑巴坦 | 91 | 100.00 | 0 | 0.00 | |
四环素 | 41 | 45.05 | 50 | 54.95 | |
氨曲南 | 61 | 97.03 | 30 | 32.97 | |
哌拉西林 | 33 | 36.26 | 58 | 63.74 | |
阿莫西林/克拉维酸 | 86 | 94.51 | 5 | 5.49 | |
环丙沙星 | 79 | 86.81 | 12 | 13.19 | |
复方新诺明 | 71 | 78.02 | 20 | 21.98 | |
;注:(1)表中耐药=耐药+中介。 |
抗菌药物 | 鼠伤寒副伤寒(n=28) | 肠炎沙门菌(n=21) | 甲型副伤寒沙门菌(n=10) | 伤寒沙门菌(n=8) | 丙型副伤寒沙门菌(n=5) | |||||
耐药株数 | 耐药率(%) | 耐药株数 | 耐药率(%) | 耐药株数 | 耐药率(%) | 耐药株数 | 耐药率(%) | 耐药株数 | 耐药率(%) | |
氨苄西林 | 25 | 89.29 | 21 | 100.00 | 4 | 40.00 | 5 | 62.50 | 5 | 100.00 |
氨苄西林/舒巴坦 | 21 | 75.00 | 10 | 47.62 | 1 | 10.00 | 1 | 12.50 | 1 | 20.00 |
头孢曲松 | 7 | 25.00 | 3 | 14.29 | 1 | 10.00 | 1 | 12.50 | 1 | 20.00 |
头孢他啶 | 5 | 17.86 | 6 | 28.57 | 1 | 10.00 | 1 | 12.50 | 1 | 20.00 |
头孢吡肟 | 6 | 21.43 | 5 | 23.81 | 1 | 10.00 | 1 | 12.50 | 0 | 0.00 |
左氧氟沙星 | 2 | 7.14 | 1 | 4.76 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 |
亚胺培南 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 |
美罗培南 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 |
头孢哌酮/舒巴坦 | 2 | 7.14 | 3 | 14.29 | 1 | 10.00 | 1 | 12.50 | 1 | 20.00 |
哌拉西林/他唑巴坦 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 |
四环素 | 22 | 78.57 | 18 | 85.71 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 |
氨曲南 | 5 | 17.86 | 18 | 85.71 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 |
阿莫西林/克拉维酸 | 4 | 14.29 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 |
环丙沙星 | 3 | 10.71 | 3 | 14.29 | 1 | 10.00 | 1 | 12.50 | 0 | 0.00 |
复方新诺明 | 9 | 32.14 | 5 | 23.81 | 0 | 0.00 | 0 | 0.00 | 2 | 40.00 |
沙门菌属肠杆菌科,广泛存在于自然界,在温度7~45 ℃的条件下均可生长。所致疾病主要有两类,一类是伤寒和副伤寒,另一类是急性胃肠炎,此 外亦可引起肠道外的各种炎症如菌血症、胆囊炎、肾盂肾炎等。感染主要 取决于沙门菌的血清型和食 用者的身体状况,受威胁最大的是儿童、老年人及免疫缺陷个体 [3]。
从发病年龄分析,本组资料以<7岁患儿居多,占65.71%(68/91),且主要集中在婴儿期、幼儿期和学龄前期。小儿沙门菌感染在早期无特异性表现,主要表现为发热,多为弛张热或稽留热,大多数患者伴有呼吸道或消化道症状,易被误诊为“上呼吸道感染或腹泻”。同时值得注意的是,非伤寒沙门菌感染虽然先从胃肠道开始,以胃肠炎型最常见,但亦可引起败血症和远隔部位的化脓病变,甚至休克和DIC(弥散性血管内凝血)。尤其是 6个月内患病,病情发展较快 [4]。同时由于接触传播,可在产院婴儿室和儿科新生儿病房发生流行。因此,早期诊断,早期治疗,加强饮食与环境卫生,加强院感控制,及时切断传播途径,同时及时做细菌学培养具有重要意义。
从本组资料分析,平湖市第一人民医院91例沙门菌感染病例临床表现主要为发热、腹泻。腹痛以阵痛为主,腹泻以黄色水样便为主,同时腹泻次数大于3次以上居多,可为今后诊治病例提供参考。其中沙门菌病例血清型监测结果提示,肠道感染以肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为优势血清型,与文献报道结果基本一致 [5]。同时沙门菌的型别较多,呈现多样性。据世界卫生组织全球沙门菌监测网数据显示 [6],肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌是引起食源性疾病的常见菌型。而在我国,每年约有3亿人因沙门菌感染而患病,占病原菌致食源性疾病总数的70%~80%。本研究结果显示,粪便标本沙门菌占总检出率的73.33%,临床上沙门菌主要引起患者的肠道感染,血液感染呈明显下降趋势。通过对本地区菌型分布特征的了解,对沙门菌引起的人畜共患病的流行病学调查有着重要意义。
本组药敏结果显示,沙门菌对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦敏感率为100%,对左氧氟沙星、阿莫西林/克拉维酸敏感率达90%以上,与有关报道基本一致 [7]。值得注意的是,肠道感染的鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌对抗菌药物耐药性普遍比血液感染的伤寒、副伤寒高。以往对沙门菌感染一般选用氯霉素、复方新诺明、氨苄西林或羟氨苄西林,且大多于用药后4~6天热退。本研究结果显示,沙门菌对氨苄西林的耐药率较高,达65.93%,复方新诺明、氯霉素由于对人体副作用较大,尤其是婴幼儿患者,均不建议使用;β-内酰胺类抗菌药物中的三代、四代头孢、碳青霉烯类在本组研究中均有较高的敏感率,可作为沙门菌感染治疗时的经验用药选择依据。
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