2014年7月20日晨，浙江省台州市路桥区疾病预防控制中心(CDC)接到横街中心卫生院报告：自凌晨起，相继有20余人因急性腹痛、腹泻、呕吐等食物中毒症状入院治疗。台州市路桥区CDC应急机动队第一时间赴现场调查。经流行病学调查、实验室检测结合临床分析，证实为一起由奇异变形杆菌污染食物引起的食物中毒事件，现报告如下。

2014年7月19日18：00时，本区横街镇一村民家办喜宴，就餐人数约120人，截至7月20日09：30止，共有23人入院治疗。发病者男性8例，女性15例；年龄最小3岁，最大68岁。7月19日约23：00时出现首发病例，发病高峰期9 h，潜伏期5～29 h，发病者均出现不同程度的胃肠炎症状，主要表现为恶心、呕吐(2～4次/d)、腹痛、腹泻(3～6次/d为主，最高频次9次/d)、头痛、低热等。腹泻物性状以黄色水样便为主，腹痛为上腹部和脐周绞痛，发热多为37.5～38.5 ℃。经及时补液和抗菌治疗后痊愈，无危重和死亡病例。对23名入院患者发病前48 h内的进食情况进行调查，除共同参加了7月19日晚的喜宴外，无其他可疑进食史。

共采集到样品14份，其中患者肛拭或腹泻物8份、呕吐物1份，剩余可疑食物3份、厨师的肛拭1份、菜板涂抹物1份。另抽取患者急性期及恢复期双血清各3份，健康人对照血清1份。

依据GB 4789《食品安全国家标准 食品微生物学检验》、GB/T 4789《食品卫生微生物学检验》及相关卫生部行业标准开展沙门菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、变形杆菌和致泻性大肠埃希菌的检测，3份剩余食物第一时间检测菌落总数。

病原菌检测使用的增菌、分离培养基和生化试剂等购自杭州微生物试剂有限公司，均为新鲜配制效期内使用。API 20E生化鉴定系统由法国生物梅里埃公司提供，诊断血清购自宁波天润生物药业有限公司，效期内使用，毒力试验用小白鼠购自本地花鸟市场。

显微镜下可见大量革兰阴性杆菌，呈多型性。“染片指引法”操作简便，对样本直接涂片、染色、镜检，镜下观察病原菌形态、染色特征，暗视野显微镜下观察细菌动力^[1]。筛选出同一种形态、染色占整个视野的60%以上的优势菌(前提必须保证样品典型、新鲜、未被污染且实验室人员具备一定检测经验)，本法对于金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌等形态特征明显的细菌检测很有实际意义，且经济、便捷。

14份样品直接接种于营养琼脂、血平板、SS、EMB、MYP等平板培养，同时分别接种GN、肠道增菌肉汤、7.5%氯化钠肉汤等增菌液增菌、培养后再次进行病原菌分离。有6份肛拭/腹泻物、1份剩余卤牛肉、1份剩余凉拌鹅肝，共8份检样在营养琼脂平板、血平板和EMB平板上迁徙生长。在SS平板上生长无色半透明、中心黑色、疑似沙门菌或变形杆菌菌落。革兰阴性杆菌，呈多型性，和“染片指引法”直接涂片染色情况一致。血平板、MYP平板无可疑金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌生长。

沙门菌诊断血清A-F 多价血清和志贺多价凝集阴性。根据菌落形态、革兰染色、血清学结果可以排除沙门菌、志贺菌、致泻性大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌。

尿素试验阳性，苯丙氨酸阳性，H₂S阳性，克氏三糖铁结果为斜面产碱，底层产酸产气，H₂S阳性，结合迁徙生长现象，初步鉴定为变形杆菌。进一步做API 20E生化系统鉴定，所分离到的8株可疑菌株呈相同生化型，鉴定编码为0737000，鉴定值：奇异变形杆菌99.9%，结果详见表 1。

按照GB 4789.2 2010方法对卤牛肉、猪肉丸子、凉拌鹅肝进行菌落总数测定。卤牛肉菌落总数高达9.2×10⁶cfu/g，凉拌鹅肝菌落总数为2.8×10⁴cfu/g，猪肉丸子菌落总数为2.2×10³cfu/g。

将从不同样品分离到的变形杆菌分别接种其中2株在营养琼脂平皿两端，经36 ℃培养24 h，菌落自然融合在一起，无明显的分界线，证实之间无拮抗现象。

将食物中毒检样中获得的菌株经36 ℃ 72 h产毒培养后，各取0.5 ml浓菌液对2只健康小白鼠进行腹腔注射，另1只健康小白鼠腹腔注射等量灭菌生理盐水做对照。2只实验组小白鼠分别于45 min、75 min后出现明显的中毒临床症状，对照组小白鼠无症状。

将检出的奇异变形杆菌制作成浓菌液，分别和3例患者急性期与恢复期血清做试管凝集试验，患者恢复期血清效价较急性期均呈4倍以上增长，1份健康人对照血清凝集效价对比无差异。

6份患者肛拭或腹泻物、2份剩余可疑食物(卤牛肉和凉拌鹅肝)中检出同一型别的奇异变形杆菌。中毒原因分析依据GB 14938-1994^[3]和WS/T 9-1996^[4]标准判定。

根据流行病学特点、实验室检验结果和临床症状，判定这是一起由奇异变形杆菌污染卤牛肉和凉拌鹅肝引起的食物中毒事件。通过食物中毒实验室检测分析，提出以下建议：

实验室人员应亲临食物中毒现场采集典型样品，和流行病学调查人员共同设计检测方案。

实验室检测流程应灵活掌控。我国目前对细菌性食物中毒检测没有系统通用标准，严格按照食品检验国家标准来进行检测较为费时，且很多细菌检测无国家标准参考，不建议按部就班严格按照国家标准开展检测，如用“染片指引法”在第一时间探索检测方向。有研究表明荧光定量PCR检测特异性和敏感性高，检测时间短，通过筛查可以很快指向可疑病原菌，大大提高实验室诊断的效率^[5,6]。另外，增菌和选择性分离培养同时开展，采用优势菌可疑菌落直接鉴定，简化了实验步骤，缩短了检测周期，为处理突发公共卫生事件溯源赢取宝贵的时间。

准备充分、反应及时。食物中毒高发的夏秋季节，实验室要准备好采样、检测用品。及时，准确捕获食物中毒检样，以最快的速度检测到引起中毒的致病菌，为流行病学提供科学的病原学依据，为临床用药提供参考。

采样及时、样品有代表性。尽早采集到患者未经抗生素治疗和未被污染的排泄物、呕吐物、肛拭子和剩余可疑食物等。当剩余食物种类繁多时，要结合流行病学调查资料，经统计学方法处理，有重点采集有效样品。争取最大限度避免采样和确定检测项目的盲目性，提高工作效率。

农村聚餐引发食物中毒事件时有发生^[7]，村镇群体食品卫生意识相对薄弱，政府部门要重视对农村家宴的监管，将农村家宴管理纳入食品安全管理。加强对农村厨师的培训，提高农村家宴“厨师”的卫生意识。加强宣传力度和广度，增进广大群众对食物中毒事件危害的了解，不断提高民众特别是农村群体的食品安全意识。