疾病监测  2016, Vol. 31 Issue (2): 171-173

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吕冰, 贾蕾, 张新, 曲梅, 张海艳, 严寒秋, 黄瑛, 李洁, 林长缨, 高志勇, 梁志超, 王全意
LYU Bing, JIA Lei, ZHANG Xin, QU Mei, ZHANG Hai-yan, YAN Han-qiu, HUANG Ying, LI Jie, LIN Chang-ying, GAO Zhi-yong, LIANG Zhi-chao, WANG Quan-yi
2015年北京一起鼠伤寒沙门菌暴发流行的病原学检测分析
Etiologic detection of an outbreak of Salmonella typhimurium infection in Beijing, 2015
疾病监测, 2016, 31(2): 171-173
Disease Surveillance, 2016, 31(2): 171-173
10.3784/j.issn.1003-9961.2016.02.019

文章历史

收稿日期: 2015-07-13
2015年北京一起鼠伤寒沙门菌暴发流行的病原学检测分析
吕冰1, 贾蕾1, 张新1, 曲梅1, 张海艳2, 严寒秋1, 黄瑛1, 李洁1, 林长缨1, 高志勇1, 梁志超1, 王全意1     
1. 北京市疾病预防控制中心, 北京 100013;
2. 北京市东城区疾病预防控制中心, 北京 100009
摘要: 2015年5月北京一家大型企业发生聚集性腹泻疫情,流行病学调查后收集现场样本,经过实验室检测确认该次疫情为鼠伤寒沙门菌暴发流行。分离到的18株鼠伤寒沙门菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)图谱带型一致,在北京市沙门菌PFGE数据库中未发现相同带型。药物敏感试验结果显示有一株菌株对12种抗生素耐药。这种耐药模式的出现提示需加强耐药监测。
关键词: 鼠伤寒沙门菌    暴发    脉冲场凝胶电泳    耐药    
Etiologic detection of an outbreak of Salmonella typhimurium infection in Beijing, 2015
LYU Bing1, JIA Lei1, ZHANG Xin1, QU Mei1, ZHANG Hai-yan2, YAN Han-qiu1, HUANG Ying1, LI Jie1, LIN Chang-ying1, GAO Zhi-yong1, LIANG Zhi-chao1, WANG Quan-yi1     
1. Beijing Center for Disease Control and Prevention, Beijing 100013, China;
2. Dongcheng District Center for Disease Control and Prevention, Beijing, Beijing 100009, China
Abstract: A cluster of diarrheal cases was reported in a big company in Beijing in May 2015, and Salmonella typhimurium outbreak was laboratory confirmed after epidemiological survey.The PFGE patterns of 18 strains isolated from the cases were the same, but different from that in Beijing Salmonella PFGE database. One of the 18 strains was resistant to 12 antibiotics, including ciprofloxacin and ceftriaxone, suggesting the necessity to strengthen drug resistance surveillance.
Key words: Salmonella typhimurium    Outbreak    Pulsed field gel electrophoresis    Drug resistant    

沙门菌属广泛存在于人类和动物肠道中,主要污染动物性食品,极易引起人类感染。近几年有报道沙门菌在多个国家暴发[1, 2],而国内也经常有报道发现沙门菌引起的疫情,提示沙门菌仍然是腹泻病的一个重要病原体。

2015年5月北京一家大型企业发生一起聚集性腹泻疫情,通过疾病预防控制中心(CDC)流行病学调查,实验室样品检测综合分析后,最终确定此次疫情为鼠伤寒沙门菌的暴发流行。

1 流行病学调查

2015年5月北京市东城区某大型国企的多名职工出现腹泻、发热等症状,东城区CDC在5月8日接到报告后开展了流行病学调查。

首发病例发病时间为5月5日03:00,截至5月12日17:00,统计病例共66例。病例发病时间集中在5月5日,该日共发病52例(78.79%),主要症状以腹泻、发热为主。根据时间分布,短时间发病人数快速上升,高峰过后发病人数快速下降,呈现单峰曲线,考虑存在食源性污染的可能。

2 实验室检测 2.1 样品采集

5月8日和11日共采集15名可能病例以及18名无症状人员粪便样品共33份;采集5月6日晚餐及5月7日三餐留样44件食品样品;5月12日采集食堂环境样品20件。

2.2 肠道多病原快速检测

应用荧光定量PCR-TaqMan探针法对所有采集到的样本进行肠道多病原检测[3, 4, 5, 6]。食品样品中3份沙门菌基因检测阳性,食堂环境样品中 13份沙门菌基因检测阳性,粪便样品中 9份沙门菌基因检测阳性。初步判断此次疫情病原体为沙门菌。核酸提取试剂盒由Qiagen公司提供;病原体荧光定量PCR检测试剂盒由上海之江生物公司提供。

2.3 菌株分离及鉴定

根据《感染性腹泻病诊断标准WS 271-2007》,《食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验沙门菌标准 GB 4789.4-2010》,采集样品经增菌、选择培养基培养,并完成生化鉴定,共分离18株沙门菌,其中 2株沙门菌分离自食堂环境样品,分别为食堂粗加工间的清洗池下水口涂抹和鱼铁刷子涂抹样品;16株沙门菌分离自16件粪便样品。血清鉴定结果为鼠伤寒沙门菌[4,5,12:i:2]。

2.4 脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型

按照美国CDC公布的沙门菌PFGE标准分型方法,对18株沙门菌菌株进行分子分型。聚类图见图 1,18株菌株呈现一致的带型,在北京市沙门菌PFGE数据库中未发现和此次疫情相同的菌株。

2.5 耐药性检测

药敏试验用最小抑菌浓度(MIC)法,使用上海星佰生物技术有限公司生产的革兰阴性需氧菌药敏检测板,其结果与《抗菌药物敏感性试验执行标准:第23版资料增刊(2013年1月)》比较,以大肠埃希菌(ATCC25922)作为质控菌株。应用的抗生素及18株沙门菌耐药性检测结果见图 1,方框内为本次疫情分离到的18株鼠伤寒沙门菌,图中可见除2015DCSM073一株外,其他菌株耐药检测结果几乎一致。而菌株2015DCSM073对12种药物耐药,包括氟喹诺酮类的环丙沙星及三代头孢类头孢曲松等。

注:方框内为此次疫情分离到的18株鼠伤寒沙门菌。* 由外环境分离到鼠伤寒沙门菌。 CIP:环丙沙星;STR:链霉素;AMP:氨苄西林;CHL:氯霉素;SUL:磺胺异恶唑;SXT:复方新诺明;NAL:萘啶酸;AUG:阿莫西林-克拉维甲酸;CRO:头孢曲松;DOX:强力霉素;GEN:庆大霉素;AZM:阿奇霉素;TET:四环素;FOX:头孢西丁;FEP:头孢吡肟;IMP:亚胺培南。 图 1 18株鼠伤寒沙门菌在北京市沙门菌PFGE数据库中的比对结果 Figure 1 The PFGE pattern of 18 Salmonella strains compared in Beijing Salmonella database
3 讨论

目前荧光定量PCR方法已成为病原体快速筛查的手段之一,为迅速控制传染源减少疫情传播提供了初步的理论依据。大大提高了疫情分析的工作效率。

根据近年来的监测数据,在北京地区引起腹泻的病原体仍以志贺菌、沙门菌、致泻性大肠埃希菌及轮状病毒等为主[7]。此次疫情病原体为鼠伤寒沙门菌,符合北京地区沙门菌分布规律[8]。根据以往PFGE分型研究[9],北京地区分离到的鼠伤寒沙门菌带型之间的相似度不高,呈高度散发状态。这种高度散发可能与北京市的人口特征有关,北京地区人口密集、流动性大,输入性感染的机会比较多,也增加了病原体重组的机会。

根据文献报道[10],多重耐药菌的常见模式为抗氨苄西林、氯霉素、链霉素、磺胺类药物和四环素5种抗生素为主,而此次分离到的菌株比较符合该耐药模式,但是发现1株对12种抗生素耐药的菌株。根据以往对沙门菌的耐药监测[11],环丙沙星及头孢曲松往年的耐药率仅为2.61%和1.96%,耐12种药物耐药率仅为1.64%。耐药菌株的产生往往与抗生素的不当使用有关,说明了对抗生素耐药这一问题的预防控制工作任重而道远。

参考文献
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