2013年10月，浙江省余姚市主城区等区域遭遇特大暴雨袭击，部分区域降水量达到500 mm/24 h以上，造成土地和河流等大面积被淹没，增加了各种肠道传染病的流行风险。由于沙门菌是引起人类和畜禽类疾病的主要细菌之一，其致病力强，且对外界环境抵抗力强，易传染，故对河水中沙门菌的调查可以在一定程度上反映河水的污染程度^[1]。为了解余姚市主城区河水中沙门菌的污染情况、血清型分型和药物敏感情况，笔者于2013年10月至2015年12月对余姚市主城区河水进行沙门菌检测与分析，现报道如下。

在余姚市主城区3条河道(最良江、姚江、候青江)，其中姚江最长，根据河道长度和居民密集处设12个监测点(最良江望江花园、最良江市政府、最良江兰墅大桥、姚江西石山桥、姚江姚江桥、姚江龙山剧院、姚江三管堂、姚江三江口、姚江中山路、候青江原家禽医、候青江原人民医院、候青江丹凤新村)；其中最后2个监测点是从2014年第四季度开始增设的。2013年10月到2013年12月每月检测一次，2014-2015年每季度监测一次，共检测11次，每次采集500 ml水样标本。

SBG增菌液、SS琼脂、XLD琼脂、克氏双糖铁琼脂、M-H琼脂由青岛海博生物技术有限公司生产。科玛嘉沙门菌显色培养基由郑州博赛生物技术有限公司生产。沙门菌诊断血清由宁波天润生物药业有限公司和丹麦国家血清研究院生产。20种抗生素纸片由英国OXIOD公司生产。GN细菌生化鉴定条和VITEK2 compact细菌鉴定仪由法国生物梅里埃公司生产。0.45 μm滤膜和MILIPORE 3702液体微生物过滤系统由法国密理博公司生产。

每次采集表层水500 ml于无菌容器中，2 h内送实验室检测。

500 ml水样通过0.45 μm滤膜抽滤后，将滤膜移至于50 ml SBG增菌液中，摇匀，37 ℃增菌18 h后，划线接种XLD、SS、科玛嘉沙门菌显色平板等3种选择性平板，同时将增菌液继续培养18 h后再用上述选择性平板分离。

从SS平板、XLD平板、科玛嘉沙门菌显色平板挑取可疑菌落接种于克氏双糖琼脂，36 ℃培养24 h，结果为K/A，产气+/-，H₂S+/-的菌株用沙门菌GN细菌生化鉴定条，经VITEK2 compact细菌鉴定仪做系统生化鉴定，符合沙门菌生化的菌株再用血清学试验确定沙门菌血清型，以宁波天润沙门菌诊断血清做初筛，用丹麦沙门菌诊断血清做符合并根据《沙门菌属血清型诊断》确定沙门菌血清型^[2]。

按纸片法抗菌药物敏感试验标准(CLSI2012)进行，以标准菌株大肠埃希菌ATCC25922作为质控菌株，选用8类共20种抗生素。对3类或以上药物种类耐药就定为多重耐药株(multidrug resistance，MDR)。

使用SPSS 15.0软件分析，χ²检验组间差异，P＜0.05为差异有统计学意义。

2013-2015年在12个监测点共检测110份主城区河水，沙门菌阳性的河水58份，总阳性率52.73%(2013-2015年阳性率分别为50.00%、52.50%、53.30%)。候青江阳性率最高(76.19%)，姚江阳性率次之(50.00%)，最良江阳性率最低(27.27%)。其中候青江原人民医院(100.00%)、候青江原家禽医院(81.82%)、姚江姚江桥(72.73%)、姚江三管堂(72.73%)沙门菌污染率较高；最良江市政府和姚江中山路污染率(18.18%)最低。经χ²检验，12个监测点之间的沙门阳性率差异有统计学意义(χ²=22.99，P=0.006)。共检出沙门菌84株，总检出率76.36%。每个监测点均污染2~7种沙门菌，平均5种左右，其中姚江西石山桥、姚江龙山剧院、姚江三管堂、候青江原家禽医院污染的的种类最多，见表 1。

84株沙门菌经血清学试验分为6个群和17个血清型。84株沙门菌均在A~F群，血清群中检出最多的是沙门菌B群43株，占51.19%，其次是沙门菌C1群10株，E1群8株，分别占11.90%和9.52%。血清型中以鼠伤寒沙门菌最多，共29株，占34.52%；德尔卑沙门菌次之，共14株，占16.67%；另外检出较多的有伦敦沙门菌6株(7.14%)，肠炎沙门菌、里森沙门菌各5株(5.95%)，见表 2。

8类共20种抗生素对84株沙门菌进行药敏试验发现，对头孢类、单环β-内酰胺类、β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂、喹诺酮类、氨基糖苷类敏感率较高，对青霉素类和叶酸代谢抑制剂类耐药率较高。其中对亚胺培南敏感率为100.00%；对哌拉西林/他唑巴坦、丁胺卡那、氨曲南、头孢塞吩、头孢曲松、头孢西丁、氟哌酸、环丙沙星、头孢哌酮、头孢唑啉、氧氟沙星11种抗生素的敏感率在98.81%~92.86%之间。对氨苄西林、复方新诺明、哌拉西林耐药率最高，分别为67.86%、53.57%、51.19%，对妥布霉素、庆大霉素、奈替米星耐药率次之，分别为20.24%、17.86%、11.90%，见表 3。

84株沙门菌中耐药株为65株，占77.38%，其中单耐药9株(10.71%)，耐2~16种药物56株(66.67%)，多重耐药18株(21.43%)。单耐药菌株仅对复方新诺明或氨苄西林耐药，多重耐药主要集中在氨苄西林、复方新诺明、哌拉西林、妥布霉素、庆大霉素、奈替米星等抗生素药物。多重耐药菌株中有3株沙门菌耐10种以上抗生素，其中1株德尔卑沙门菌耐5类10种药物(氨苄西林、哌拉西林、头孢唑啉、头孢塞吩、头孢呋辛、头孢哌酮、头孢曲松、庆大霉素、妥布霉素、复方新诺明)，1株印第安纳沙门菌耐5类15种药物(氨苄西林、哌拉西林、头孢唑啉、头孢塞吩、头孢呋辛、头孢哌酮、头孢曲松、庆大霉素、丁胺卡那、妥布霉素、奈替米星、氟哌酸、氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明)，还有1株印第安纳沙门菌耐7类16种药物(氨苄西林、哌拉西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢唑啉、头孢塞吩、头孢呋辛、头孢哌酮、头孢曲松、氨曲南、庆大霉素、妥布霉素、奈替米星、氟哌酸、氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明)。

沙门菌是一种重要的人畜共患病原菌，是引起人类感染性腹泻和食物中毒的重要致病菌，其所致细菌性食物中毒暴发次数和发病人数多年来居我国首位^[3-4]。2013-2015年，在110份余姚市主城区河水标本中，共检出沙门菌84株，检出率76.36%；略高于孙荣高^[5]报道的68.40%，高于陈昕等^[1]报道的16.59%。可能与优化了检验方法以及2013年10月发生的百年不遇的水灾等有关。不同年份河水沙门菌阳性率没有明显变化，但血清分型略有增加，2013年检出10种，2014年检出14种，2015年检出16种。不同时间的11次监测，污染率没有明显的季节性区别，而人群感染沙门菌有明显的季节性^[6]。

110份余姚市主城区河水，沙门菌阳性的河水58份，总阳性率52.73%。3条河道中候青江阳性率最高(76.19%)，姚江阳性率次之(50.00%)，最良江阳性率最低(27.27%)，可能与最良江附近以新小区居多，姚江和候青江附近以老小区居多有关。采样过程中发现老小区附近监测点的中老年居民刷马桶、洗菜、洗衣服等偏多，既污染河水，又增加了被沙门菌感染的机会。12个监测点均污染2~7种沙门菌，平均5种左右，尤其是姚江三管堂、候青江原家禽医院污染率最高，污染种类最多，应加强监测和管理力度。

沙门菌属血清型别复杂，根据Kauffman-White K标准分为2700多个血清型^{[5, 7]}。余姚市河水沙门菌污染率高，菌型繁多。84株沙门菌分为6个群17个血清型。4个血清型雷德巴沙门菌、黄金海岸沙门菌、印第安纳沙门菌、蒙德维的亚沙门菌在宁波地区以往未见报道^[8-9]。在余姚市主城区河水中分离较多的鼠伤寒沙门菌(34.52%)和德尔卑沙门菌(16.67%)，也是余姚市食源性疾病患者中分离到的主要菌型^[10]。说明余姚市河水中沙门菌属分布与食源性疾病患者中沙门菌属的分布情况存在必然联系，符合陈昕等^[1]报道。同时提示河水沙门菌的污染与排放未消毒城市污水有关^[5]。

药敏试验发现，2013-2015年检出的沙门菌，耐药率没有明显变化。候青江检出的沙门菌耐药率明显高于其他2条江，可能与检出的2株鸡源性沙门菌--印第安纳沙门菌有关。84株沙门菌对氨苄西林、复方新诺明、哌拉西林耐药率最高，对妥布霉素、庆大霉素、奈替米星耐药率次之，与该市2007-2009年腹泻成年人沙门菌耐药率相近^[11]。84株沙门菌中耐药株为65株，占77.38%，多重耐药18株(21.43%)。多重耐药主要集中在氨苄西林、复方新诺明、哌拉西林、妥布霉素、庆大霉素、奈替米星等抗生素药物。陆彦等^[12-13]报道鸡源性沙门菌--印第安纳沙门菌多药耐药问题严重。

此次监测填补了余姚市河水沙门菌污染情况的空白，结果表明余姚市主城区河水沙门菌污染率高、菌型繁多、耐药率高。同时，根据2014年食源性疾病的监测工作，余姚市由沙门菌属引起的食源性疾病上升趋势明显。因此，环保部门应加强对城市医院和生活污水的管理，卫生和计划生育委员会应加强水中细菌学的监控和食源性疾病的监测，同时提醒市民不用未经消毒的河水洗涤食物及餐具，不用河水刷马桶。

作者贡献:

张建群   ORCID:0000-0003-4455-0912

张建群，黄邵军：细菌分离，血清分型

罗学辉：药敏试验

苗超：样品采集

杨元斌：血清分型复核