男男性行为(men who have sex with men，MSM)人群是通过性传播艾滋病的高危人群。在我国MSM数量快速增长，尤其在2006年以后MSM人群中HIV感染率也呈逐年上升趋势^[1]。2012年哨点监测发现，我国MSM人群HIV感染率为6.7%，高于2011年的6.3%^[2]。世界卫生组织(WHO)曾指出≥50岁人群HIV感染率正在逐年上升^[3]，我国每年报告的艾滋病感染者和艾滋病患者(HIV/AIDS)中，≥50岁年龄组构成比呈逐年上升趋势，同性传播构成比从2006年的0.7%上升至2009年的3.0%^[4]。MSM人群中≥50岁年龄组问题日渐凸显，已成为国内外当前防治HIV感染和流行的关注热点^[5]。为此，本研究选择上海市2013年新发现的、有男男同性性行为的HIV-1感染者为研究对象，对于当年新发现年龄≥50岁感染者的人口学、行为学及分子生物学特征进行分析比较，为制定艾滋病防控策略提供依据。

2013年新发现、有MSM的艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者643例，均未接受抗病毒药物治疗。

在知情同意前提下采用一对一访谈方式进行问卷调查，并采集血样。

(1) 主要试剂及仪器QIAcube HT Kit及QIAcube HT Plasticare购自德国QIAGEN公司，提取RNA，-80 ℃冻存。(2)反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)第一轮反应引物序列为MAW-26(5′- TGG AAA TGT GGA AAG GAA GGA C-3′)和RT-21(5′- CTG TAT TTC TGC TAT TAA GTC TTT TGA-3′)，扩增条件分别为50 ℃ 30 min，94 ℃ 2 min后，94 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 3 min，30个循环，72 ℃ 10 min，4 ℃保温。第二轮反应引物为RT-20(5′-TCG CCA GTT CTA GCT CTG CTT C-3′)和PR1(5′- ATG ATG CAG AGA GGC AAT TT-3′)，扩增条件分别为94 ℃ 5 min预变性后，94 ℃ 30 s，63 ℃ 30 s，72 ℃ 150 s，30个循环，72 ℃ 10 min，4 ℃保温。(3)扩增片段电泳：用毛细管电泳仪QIAxcel DNA 及QIAxcel DNA Screening Kit扩增。(4)PCR扩增产物的纯化和DNA测序：PCR扩增产物由上海欧易生物技术有限公司纯化和测序。(5)序列分析：使用Squencer 4.9等软件进行序列的排列、比对和编辑，以确定HIV-1基因亚型。

EpiData 3.1软件建立数据库,SPSS 18.0软件对数据进行描述和统计学分析。采用Pearson's χ²检验分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

将643例HIV感染者分为两组，≥50岁组(50～72岁)为52例，占8.0%,平均年龄为(57.62±7.48)岁,以本地户籍45例(86.5%)为主；＜50岁组(16～49岁)为591例(92.0%)，以外地户籍439例(74.3%)为主。≥50岁组在婚比例(23.1%)高于＜50岁组(10.8%)。文化程度高中及以上(51.9%)低于＜50岁年龄组(82.1%)。当年发现HIV感染进展为艾滋病比例(42.3%)高于＜50岁年龄组(22.2%)。≥50岁组发现HIV感染并死亡的比例(3.8%)高于＜50岁组(0.3%)。两组在是否曾经有过婚外异性性行为及最近3个月的性伴个数、CD₄⁺T淋巴细胞计数等方面差异均无统计学意义，见表 1。

根据亚型分型结果，本研究对象中≥50岁年龄组亚型分布广泛，其中CRF01_AE所占比例最大，占48.1%(25/52)，其次为CRF07_BC占26.9%(14/52)，B亚型占11.5%(6/52)，CRF08_BC占3.8% (2/52)，01B亚型占9.6%(5/52)。＜50岁年龄组亚型构成比为CRF01_AE占63.8% (377/591)，CRF07_BC占26.2%(155/591)，B亚型占4.9%(29/591)，CRF08_BC为0(0/591)，01B亚型占5.1%(30/591)。经统计分析发现CRF01_AE在≥50岁年龄组中的比例明显低于＜50岁组，差异有统计学意义(P＜0.05)。其他亚型无差异(表 1)。本研究还发现CRF01B亚型35例，包括CRF55_01B及未定型CRF01B，虽经统计未显示有统计学意义，但其在≥50岁年龄组中所占的实际比例(9.6%)高于＜50岁年龄组(5.1%)，值得关注。

近年来，≥50岁MSM人群HIV感染率上升较快，本研究对2013年上海地区MSM人群HIV感染者进行了监测，并将≥50岁及＜50岁两个年龄组做了对比分析。结果发现≥50岁年龄组CRF01_AE亚型所占比例显著低于＜50岁年龄组。陶艳琳等^[6]对20002012年我国HIV基因亚型进行Meta分析后发现各省市HIV-1亚型分布具有多样性、复杂性，CRF01_AE亚型的流行区域广泛，几乎见于所有调查地区，经同性性传播途径感染者以CRF01_AE和B亚型为主，与本研究结果一致。20092011年我国9个HIV-1感染高发城市MSM人群的分子流行病学调查显示，CRF01_AE、CRF07_BC和B亚型为主要亚型，分别为62.1%、18.2%和15.9%^[7]，本研究与其相比，≥50岁年龄组中CRF01_AE所占比例(48.1%)偏低，低于陕西省(54.9%)、广州市(64.71%)等地的MSM人群相关研究^[8-9]。国际上已有专家提出50岁以上老年人群在感染HIV后潜伏期较年轻人显著缩短^[10]。也有研究指出CRF01_AE亚型可能会加速艾滋病的进程^[11]。本研究中50岁以上MSM人群在性行为及性伴个数等方面均与低年龄组无异，说明50岁以上MSM感染风险不低于年轻人。针对50岁以上HIV-1感染者开展分子生物学研究、关注其CRF01_AE亚型在该人群中的分布及其变化是有必要的。

CRF01B亚型是2011年由我国安徽省首次在MSM人群中发现的，以MSM人群传播为主。CRF55_01B在华南和中南地区某些城市流行率已达10%，CRF59_01B散在分布于全国多个省份。在广州市的一项研究中也有同样的发现^[9]。本研究发现35例重组亚型CRF01B，其在≥50岁年龄组中的比例(9.6％)高于＜50岁年龄组(5.1%)，虽差异无统计学意义，但CRF01B在MSM人群中发现，提示HIV-1在50岁以上的MSM感染者体内更容易发生重组，从而产生新的亚型。该研究50岁以上感染者数量有限，拟今后进一步加强研究。

老年人同样存在危险性行为^[12-14]，而他们在性行为过程中更少使用安全套^[15-16]。本研究中≥50岁年龄组MSM人群以本地户籍为主，其原因可能是老年男性流动性相对较小。23.1%老年MSM人群HIV感染者处于在婚状态，其配偶间接成为高危人群。应加强对≥50岁男性人群，尤其是MSM人群的预防、干预和治疗，关注老年男性性健康。