疾病监测  2017, Vol. 32 Issue (5): 399-401

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张建群, 褚爱娟, 袁世杰, 黄邵军, 罗学辉, 许学斌
ZHANG Jian-qun, CHU Ai-juan, YUAN Shi-jie, HUANG Shao-jun, LUO Xue-hui, XU Xue-bin
浙江省余姚市首次检出长湾泥沙门菌
The first Salmonella changwanni isolation in Yuyao
疾病监测, 2017, 32(5): 399-401
Disease Surveillance, 2017, 32(5): 399-401
10.3784/j.issn.1003-9961.2017.05.011

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收稿日期:2016-12-23
浙江省余姚市首次检出长湾泥沙门菌
张建群1, 褚爱娟2, 袁世杰1, 黄邵军1, 罗学辉1, 许学斌3     
1. 余姚市疾病预防控制中心, 浙江 余姚 315400;
2. 余姚市人民医院, 浙江 余姚 315400;
3. 上海市疾病预防控制中心, 上海 200336
摘要:研究浙江省余姚市首次发现的长湾泥沙门菌株的生物学特性和流行病学特征。使用系统生化鉴定、血清分型鉴定和纸片扩散法对菌株进行鉴定,查阅患儿就诊记录和回访进行流行病学调查。菌株符合长湾泥沙门菌株的表型特征,耐药型为单耐药株,为国内首次检出的沙门菌血清型。
关键词长湾泥沙门菌    血清分型    耐药    
The first Salmonella changwanni isolation in Yuyao
ZHANG Jian-qun1, CHU Ai-juan2, YUAN Shi-jie1, HUANG Shao-jun1, LUO Xue-hui1, XU Xue-bin3     
1. Yuyao Prefecture Center for Disease Control and Prevention, Yuyao 315400, Zhejiang, China;
2. Yuyao People's Hospital, Yuyao 315400, Zhejiang, China;
3. Shanghai Municipal Center for Disease Control and Prevention, Shanghai 200336, China
This study was supported by the fund for the Medical Scientific Plan Key Project in Yuyao (No.2016YZD02)
Corresponding author: XU Xue-bin, Email:xbxu@scdc.sh.cn.
Abstract: To study biological and epidemiological characteristics of the first strain of Salmonella changwanni isolated in Yuyao. Systematic biochemical identification, serotype identification and Kirby-Bauer paper diffusion were conducted to identify the strain, and epidemiological survey through sick child medical record review and follow up was conducted. The isolated strain had the phenotypic characteristics of Salmonella changwanni, and it was a single drug resistant strain. It was the first time to detect this serotype of Salmonella in China.
Key words: Salmonella changwanni     Serotype     Drug resistance    

2016年9月6日,从1例女性患儿急性胃肠炎标本中检出1株沙门菌,该菌经形态、生化、血清学证实为长湾泥沙门菌血清型(Salmonella Jangwani,17 : a : 1, 5),系国内首次检出。现将结果报告如下。

1 流行病学调查

患者为1岁女性,浙江省余姚市人。2016年9月4日上午,因发热伴腹泻症状去余姚市某医院小儿科门诊就诊,粪便常规实验室检查:黄色、糊状,常规检查未见红、白细胞,隐血试验阳性,轮状病毒、腺病毒、寄生虫均为阴性,给予退热(布洛芬混悬剂)、抗病毒(干扰素)和益生菌经验治疗(双歧杆菌三联活菌散)。9月5日下午复诊,自诉症状未见明显好转,粪便仍为黄色糊状便,镜检白细胞++,隐血试验阳性,临床诊断为细菌性胃肠炎,进行粪便细菌培养和给予罗氏芬(头孢三嗪)静脉滴注0.5 g/次/d。9月6日复诊,主诉腹痛症状仍未见明显好转,遂医嘱罗氏芬剂量调整为0.7 g/次/d。9月7日复诊,症状仍未见明显好转,临床实验室粪便培养报告检出“甲型副伤寒沙门菌”,并将菌株送至余姚市疾病预防控制中心(CDC)复核。9月7-9日,继续给予罗氏芬0.7 g/次/d静脉滴注后症状缓解,预后良好。后经回顾性家访调查确认,患儿家中曾购买和饲养过1只巴西小乌龟,患病前1周内无外出就餐和旅游史,家中直系亲属亦无腹泻患者。

2 培养基、试剂及仪器

沙门菌志贺菌平板(SS)、克氏双糖铁琼脂(KIA)、水解酪蛋白平板(M-H)购自青岛海博生物技术有限公司;科玛嘉沙门菌显色培养基购自郑州博赛生物技术有限公司。沙门菌诊断血清购自宁波天润生物药业有限公司和丹麦国立血清研究所(SSI);21种抗生素纸片购自英国Oxoid公司;全自动生化鉴定仪VITEK 2 compact 30和生化鉴定板条(GN)购自法国生物梅里埃公司,所有材料试剂等均在有效期内使用。

3 实验室检测结果 3.1 培养特性

菌株在SS平板上, 36 ℃培养24 h,呈现无色半透明、圆形湿润、边缘光滑、中心黑色(产H2S)的菌落特征。在科玛嘉沙门菌显色平板36 ℃培养24 h,呈现紫红色、圆形湿润的菌落特征;经革兰染色镜检见革兰阴性无芽孢杆菌;挑选选择性平板生长的疑似典型菌落接种于双糖铁琼脂,36 ℃培养24 h,结果为斜面产碱,底层产酸(K/A),不产气,H2S+。

3.2 生化反应

用VITEK 2 compact 30全自动生化鉴定仪进行生化鉴定,鉴定结果为沙门菌属。47个生化试验中25个生化试验为阴性,22个生化反应为阳性, 见表 1

表 1 生化反应结果 Table 1 Biochemical reaction results
生化反应 结果
丙氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸芳胺酶(APPA) 阴性
侧金盏花醇(ADO) 阴性
吡咯烷基芳胺酶(PyrA) 阴性
L-阿拉伯醇(IARL) 阴性
D-纤维二糖(dCEL) 阴性
β-半乳糖苷酶(BGAL) 阴性
H2S产生(H2S) 阳性
β-N-乙酰葡萄糖苷酶(BNAG) 阴性
谷氨酰芳胺酶pNA(AGLTP) 阴性
D-葡萄糖(DGLU) 阳性
Y-谷氨酰转移酶(GGT) 阴性
发酵/葡萄糖(OFF) 阳性
β-葡萄糖苷酶(BGLU) 阴性
D-麦芽糖(dMAL) 阳性
D-甘露醇(dMAN) 阳性
D-甘露糖(dMNE) 阳性
β-木糖苷酶(BXYL) 阴性
β-丙氨酸芳胺酶pNA(BAlap) 阴性
L-脯氨酸芳胺酶(ProA) 阳性
脂酶(LIP) 阴性
古老糖(PLE) 阴性
酪氨酸芳胺酶(TyrA) 阳性
尿素酶(URE) 阴性
D-山梨醇(dSOR) 阳性
蔗糖(SAC) 阴性
D-塔格糖(dTAG) 阴性
D-海藻糖(dTRE) 阳性
柠檬酸盐(钠)(CIT) 阳性
丙二酸盐(MNT) 阴性
5-酮-葡萄糖苷(5KG) 阳性
L-乳酸产碱(ILAK) 阳性
α-葡萄糖(AGLU) 阴性
琥珀酸盐产碱(SUCT) 阳性
N-乙酰-β-半乳糖苷酶(NAGA) 阴性
α-半乳糖苷酶(AGAL) 阳性
磷酸酶(PHOS) 阳性
氨基乙酸芳胺酶(GlyA) 阳性
鸟氨酸脱羧酶(ODC) 阳性
赖氨酸脱羧酶(LDC) 阳性
组氨酸同化(IHISA) 阴性
COURMARATE(CMT) 阳性
β-葡萄糖苷酸酶(BGUR) 阳性
O/129耐受(O129R) 阳性
谷氨酸-甘氨酸-精氨酸芳胺酶(GGAA) 阴性
L-苹果酸盐同化(IMLTa) 阴性
ELLMAN(ELLM) 阴性
L-乳酸盐同化(ILATa) 阴性
3.3 血清学试验

菌株先用宁波天润沙门菌血清进行初筛,然后用丹麦SSI沙门菌血清进行复核。依据Kauffman-White血清分型标准,进行菌株血清型别鉴定。血清型最后由宁波市CDC和上海市CDC用丹麦SSI沙门菌血清复核鉴定。根据血清型鉴定结果,查Kaufmam-White抗原表,鉴定为长湾泥沙门菌血清型(Salmonella Jangwani,17:a:1, 5)。经宁波市CDC和上海市CDC复核,结果一致。

3.4 药敏试验

按纸片法抗菌药物敏感试验参照2016年度美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准进行,质控菌株为大肠埃希菌(ATCC25922),挑选9类共21种抗生素纸片:氨苄西林(10 μg)、哌拉西林(100 μg)、阿莫西林/克拉维酸(20/10 μg)、哌拉西林/他唑巴坦(100/10 μg)、头孢唑林(30 μg)、头孢呋辛(30 μg)、头孢塞吩(30 μg)、头孢曲松(30 μg)、头孢噻肟(30 μg)、亚胺培南(10 μg)、氨曲南(30 μg)、庆大霉素(10 μg)、奈替米星(30 μg)、妥布霉素(10 μg)、四环素(30 μg)、环丙沙星(5 μg)、诺氟沙星(10 μg)、氧氟沙星(5 μg)、萘啶酸(30 μg)、利福平(5 μg)、复方新诺明(1.25/13.75 μg)。受试的21种抗生素中,除对利福平耐受外,其余均敏感。

4 讨论

沙门菌属血清型别复杂,据已经公布的Kauffman-White抗原表共有2 700多个血清型[1-2]。我国报道的血清型有300多个[3]。本次在浙江省余姚市腹泻患儿粪便中分离的长湾泥沙门菌(Salmonella Jangwani,17:a:1, 5) 属于O抗原17的J群,其抗原群和血清型均为国内首次发现,对增加国内沙门菌血清型的多样性和生物溯源研究有重要公共卫生学意义。

长湾泥沙门菌首次报道时间为1955年[4]。1991-1996年,在加拿大由于外来宠物引起的沙门菌病导致严重公共健康问题,Woodward等[5]从患者粪便标本中分离出13株长湾泥沙门菌;尤其在1994-1996年的沙门菌感染者与外来宠物的联系调查中发现,10起长湾泥沙门菌的感染都与宠物乌龟接触有关。所有人感染沙门菌病例中约3%~5%的暴露因素与接触外来(进口)宠物有关,在这些沙门菌感染病例中,多个血清型与外来宠物有关,包括乙型副伤寒爪哇变种、斯坦利、浦那、长湾泥、利奇菲尔德、曼哈顿、波摩那、迈阿密等[6]。本次案例经回顾性家庭调查确认,腹泻患儿家中恰好也有1年的宠物小乌龟饲养史,患儿与养殖宠物有密切接触史而导致发病。因此建议:对感染性腹泻的易感人群(特别是儿童),应尽量避免接触外来宠物。

沙门菌导致感染主要取决于血清型别和患者个体的身体状况[3]。幼儿因自身肠道免疫功能尚未发育成熟,抵抗力低,最易感染。本株长湾泥沙门菌对20种药物敏感,仅对利福平耐药,患儿预后良好,无并发症和后遗症。鉴于余姚市儿童沙门菌感染存在菌型的多样性,儿童沙门菌的血清型比成年人更多、更分散[7],同时新型菌株的不断发现,公共卫生部门更应加强对低年龄组儿童防范肠道传染病的宣教,做好儿童感染沙门菌的实验室检测和常规质控工作。

作者贡献:

张建群  ORCID:0000-0003-4455-0912

张建群:细菌鉴定,血清分型

褚爱娟:细菌分离并上送

袁世杰:英文文献检索

黄邵军:药物敏感

罗学辉:流行病学调查

许学斌:技术指导,血清复核

参考文献
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