疾病监测, 2012, 27(12): 987-989
DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2012.12.018
Report of a household clustering of novel bunyavirus infection
YE Ling1, REN Yi1, MAO Bin1, LIU Rui-ding2
Daishan County Center for Disease Control and Prevention, Zhoushan 316200, Zhejiang, China
Abstract
Objective To explore the transmission route and vector of a household clustering of novel bunyavirus infection. Methods Epidemiological survey was conducted. Results Among the 4 family members, 2 had fever, diarrhea, abdominal pain and nausea. The first case had been bitten by ticks before the onset, and another case had WBC and PLT progressive reduction. The real-time fluorescent RT-PCR test and acute phase IgM serum test results of the 2 cases were positive. The RNA of new bunyavirus was detected in ticks collected with white cloth from external environment, but not by PCR test in lung, liver and spleen of live rats captured by cage-trap method. Conclusion No blood borne transmission of the disease was found in the family. Further research is needed to explore the transmission route and vector of the disease.
Keywords:    epidemiological study   case clustering   novel bunyavirus  

一起家庭聚集性新布尼亚病毒感染病例的报道
叶凌1, 任宜1, 毛彬1, 刘瑞定2
1. 岱山县疾病预防控制中心, 浙江 舟山 316200;
2. 岱山县第一人民医院
摘要
目的 分析和探讨聚集性新布尼亚病毒感染病例的传播途径和传播媒介。方法 通过对一起家庭聚集性新布尼亚病毒感染病例的流行病学调查,探索该新发传染病的流行病学特征。结果 家庭成员4人中,2例有发热、腹泻、腹痛和恶心症状,其中首发病例发病前有蜱叮咬史,另一例病例血WBC和PLT呈进行性下降,实时荧光定量反转录-聚合酶链反应检测报告2例病例均为阳性;急性期血清检测IgM报告阳性。外环境用布旗法采集蜱类标本中检测出新型布尼亚病毒核酸阳性。鼠笼法进行捕鼠后,采集肺、肝、脾等器官进行PCR检测未发现核酸阳性。结论 此次家庭聚集性发病并未见明显的血液传播,2例病例间属于共同暴露还是家庭内传播,人际传播的途径还有待于进一步探讨和研究。蜱外是否存在其他传播媒介,该病的储存宿主、传播途径和传播媒介尚需进一步验证。
关键词:    流行病学研究   聚集性发病   新布尼亚病毒  

内容大纲
1 对象与方法
1.1 对象
1.2 方法
1.3 实验室检测
2 结果
2.1 流行病学调查
2.2 临床特征和治疗
2.3 实验室检测结果
2.3.1 实验室检测
2.3.2 媒介宿主动物感染情况
3 讨论
　　自2010年中国疾病预防控制中心(CDC)分离并确认新布尼亚病毒及其致发热伴血小板减少综合征(SFTSV)以来，浙江省也于2011年首次报道病例发生并分离出1株新型布尼亚病毒，提示浙江省存在新型布尼亚病毒自然疫源地的可能[1]。岱山县作为浙江省新型布尼亚病例的高发县，近两年报告的病例数一直位居全省之首，仅在2011年浙江省9例确诊病例中，有6例来自该县，年发病率为2.97/10万，但都作为散发病例报告[2]。2012年5月，首次在岱山县发现一起家庭聚集性病例，为进一步探索该新发传染病的流行病学特征，现报告如下。
1 对象与方法
1.1 对象
　　研究对象为2012年5月发生在岱山县某乡镇的一起新型布尼亚病毒感染疫情中的实验室确诊病例和其家庭成员，其中确诊病例2例，家庭成员2例。病例诊断标准参照卫生部下发的《发热伴血小板减少综合征防治指南(2010版)》[3]。
1.2 方法
　　对2例确诊病例的流行病学个案调查和医院临床病案资料进行分析，探索家庭聚集性发病的可能传播因素。病例血清由浙江省CDC实验室采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应 (real time fluorescent quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction, rRT-PCR)检测病毒核酸。对病例急性期血清和家庭成员血清，采用ELISA法对IgM抗体定性检测，IgM抗体检测试剂盒由无锡鑫连鑫生物医药科技有限公司赠送。
标本采集：医疗机构采集病例急性期(发病1周内)血液标本：用无菌真空管采集急性期血液标本5 ml,分离血清，冰排冷藏运送县CDC -70 ℃保存。
1.3 实验室检测
　　rRT-PCR检测：病毒核酸提取试剂盒、荧光PCR扩增试剂盒、特异性引物和探针分别由德国QIAGEN公司、大连TaKaRa生物工程有限公司与浙江省CDC提供。取1.5 ml Eppendorf管，加入RLT 600 μl,再加入β-二巯基乙醇6 μl。加入200 μl样本，剧烈振荡1 min，加600 μl 75%乙醇混匀。离心后加入RW1，再次离心加入RPE，弃去离心液及收集管，取新的1.5 ml Eppendorf管置滤柱下面，加入50 μl 无RNAase的去离子水于柱子中离心后获得相应的模板。配制体系DDR064A，设置反应程序：42 ℃反转录5 min；95 ℃预变性15 s，1个循环；95 ℃变性5 s，60 ℃退火30 s，进行45个循环。采集荧光信号，同时设立阴阳性对照，通过Ct值和扩增曲线判读结果。
岱山县CDC对附近山区使用布旗法采集蜱类标本送浙江省CDC鉴定和病毒分离，采用鼠笼法捕鼠54只，采集肺、肝、脾等器官进行检测。
2 结果
2.1 流行病学调查
　　首发病例陈某某，男性，50岁，离异，职业家务待业，浙江省舟山市岱山县东沙镇人。居住地属于丘陵地区，父母和女儿4人共同居住。5月18日出现头晕、发热(体温38.4 ℃)、头痛、腹痛、恶心等症状，并伴有清水样腹泻，5～6次/d。病例呈急性病容状，发病期间体重一度下降5～6 kg。在当地卫生服务中心门诊就诊，给予“硫酸阿米卡星、盐酸去氧氟沙星”治疗4 d，腹泻及体温渐退。由于家庭经济条件较差，患者未前往县人民医院就诊，自行在当地医疗点买药治疗。病例无外出旅游史，发病前2周曾前往附近山上劳作，有被蜱叮咬史。病例发现吸满血的蜱后，自行将蜱拉扯断并用嘴吸过咬伤部位的血液，手臂部位留下明显的蜱叮咬痕迹。病例家中未饲养犬、猫等动物，有鼠类出没，周边环境清洁。
病例2,曹某某，女，85岁，为陈某某的母亲，与陈某某共同居住。5月20日在无明显诱因下出现发热(最高体温39.4 ℃)，伴腹泻10余次，水样便，偶有下腹疼痛，无鼻塞、流涕，左侧颈部可及4～5枚黄豆大小肿大淋巴结，压痛。在当地卫生服务中心门诊就诊。由于病情加重，5月26日由县第一人民医院以“发热伴腹泻1周”收治入院。本人近期无外出史，否认有蜱叮咬史，查体无皮肤破损。
2.2 临床特征和治疗
　　病例陈某某未经过正规治疗，缺乏临床试验室及辅助检查资料。病例曹某某入院体检：心律齐，双肺呼吸音清，肝脾肋下未及，实验室检查：血WBC下降至(0.8～2.5)×109/L、PLT为(33～54)×109/L，呈进行性下降，中性粒细胞数(0.2～0.4)×109/L、淋巴细胞数(0.4～1.0)×109/L。血液生化检测转氨酶和心肌酶谱均异常升高；尿素氮12.3 mmol/L、肌酐174 μmol/L、尿酸346 μmol/L，肾功能明显异常。以头孢呋辛静滴抗炎、利巴韦林静滴抗病毒及营养、支持、对症治疗，于6月14日痊愈出院。
2.3.1 实验室检测
　　5月26日县CDC采集病例非抗凝血和抗凝血各5 ml送浙江省CDC实验室核酸检测，rRT-PCR检测报告2例病例均为阳性；急性期血清检测IgM报告阳性。对共同居住的陈某某父亲(89岁)和女儿(21岁)的血清进行IgM检测，结果阴性。
2.3.2 媒介宿主动物感染情况
　　岱山县CDC对附近山区通过布旗法采集蜱类标本送浙江省CDC鉴定和病毒分离，确定优势蜱种为长角血蜱，并从蜱中检测出新型布尼亚病毒核酸阳性。采用鼠笼法进行捕鼠54只，采集肺、肝、脾等器官进行检测，PCR检测未发现核酸阳性。
3 讨论
　　岱山县作为浙江省海岛丘陵地区，人员流动性少，海岛间居住环境隔离，地域环境具有相对封闭的特点。县CDC通过回顾性调查发现，近10年来每年4-9月都有类似症状的病例发生，病例大多居住于山丘附近，平时以务农为主，年龄相对较大，未有外出史，2011年曾有报告1例浙江省慈溪市人进入岱山县山丘地带活动而得病的病例，推断岱山县已成为SFTSV本土疫源性流行区域[4]。上述2例确诊病例为家庭聚集性发病，首发病例有明确的蜱叮咬史，捕获的蜱类中也发现阳性报告。国内相关文献报道曾有家庭内通过血液传播感染新布尼亚病例的报道 ,但此次家庭聚集性发病并未见明显的血液传播，家庭内共同居住生活的另外2例成员也未见感染，2例病例发病究竟属于共同暴露还是家庭内传播难以确定，人际传播的途径还有待于进一步探讨和研究，是否存在腹泻等污染造成的生活密切接触传播。2011年7月，离该家庭几百米距离也曾有1例确诊病例报告，发病前10 d有被黄蜂蜇咬史。蜱是否为新布尼亚病毒的主要媒介，在蜱外是否存在其他传播媒介，该病的储存宿主、传播途径和传播媒介尚需进一步验证。
由于新布尼亚病毒感染早期的临床症状不具有特异性，基层卫生服务中心临床医生对新发传染病也缺乏必要的认知和警觉，容易造成病例的误诊和漏诊，有可能延迟病例的救治，致使病例转为重症及死亡。在医务人员中开展新发传染病的业务培训，并在医疗单位开展早期的症状监测，有利于做到早发现、早报告、早治疗，降低疾病的传播和死亡概率。

参考文献
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[2] Li SB, Xue C,Ding XJ,et al. Clinical features and genetic sequences of severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus in a new-epidemic region of Zhejiang province, China[J]. Chinese Journal of Infectious Diseases,2012,30(5):268-272.(in Chinese) 李世波,薛川,丁贤君,等.浙江地区散发新型布尼亚病毒感染患者的临床特点及其基因序列[J].中华传染病杂志,2012,30(5):268-272.
[3] The Ministry of the People’s Republic of China. Prevention and treatment guideline of thrombocytopenia syndrome accompanied by fever (2010 edition) [S]. Beijing: The Ministry of the People’s Republic of China,2010.(in Chinese) 中华人民共和国卫生部.发热伴血小板减少综合征防治指南(2010版)[S].北京:中华人民共和国卫生部,2010.
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