2013年3月以来，我国长江三角洲部分省份出现人感染H7N9禽流感疫情，是全球首次报道人感染这一亚型禽流感病毒^[1]。广东省肇庆市怀集县自2014年1月30日报告首例病例，截至5月31日累计报告病例9例。为了解人感染H7N9禽流感病例的特征，为制定防控措施提供依据，对9例病例的流行病学资料进行分析以及对活禽市场休市措施进行评估。 1 对象与方法 1.1 研究对象 1.1.1 确诊病例

根据国家卫生和计划生育委员会《人感染H7N9禽流感诊疗方案(2014年版)》^[2]中的病例诊断标准来执行。 1.1.2 密切接触者

依据《人感染H7N9禽流感疫情防控方案(第3版)》^[3]的标准来判定。 1.1.3 病例发现途径

病例的发现途径分为3种：住院重症肺炎病例排查、密切接触者排查、H7N9禽流感疫点流感样病例强化监测。 1.2 研究方法 1.2.1 流行病学调查

根据《人感染H7N9禽流感疫情防控方案》中“人感染H7N9禽流感流行病学调查方案”的要求进行调查。 1.2.2 标本采集

采集患者的上呼吸道标本(重症肺炎病例采集上、下呼吸道标本)、可疑暴露场所外环境标本和密切接触者咽拭子、血清标本。环境标本类型包括：禽类粪便、笼具表面擦拭标本、宰杀或摆放禽肉案板表面擦拭标本、清洗禽类的污水；数量约5 ml。上述标本均按照国家生物安全的相关规定进行包装运输，24 h内送到肇庆市流感监测网络实验室进行检测。 1.2.3 实验室检测方法

病原学检测采用RNeasy Mini Kit进行病毒RNA的提取；利用实时荧光定量-反转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)进行病毒亚型鉴定。H7N9禽流感病毒核酸检测试剂盒(real time RT-PCR法)由上海之江生物科技有限公司生产。检测所用的仪器为ABI 7500 fast实时荧光PCR仪。反应条件：42 ℃，10 min；95 ℃，15 min；95 ℃，15 s；60 ℃，1 min，共40个循环。 1.3 控制措施

所有确诊(疑似)病例均隔离治疗(观察)；对病例家庭养殖的禽类进行扑杀、环境消毒；全县所有活禽市场进行休市、清洁消毒。消毒所用的药物为含氯消毒剂，按照说明书用自来水配制为有效浓度的消毒液，24 h内使用。 1.4 统计学分析

所有确诊病例流行病学个案调查表、环境标本检测结果、密切接触者信息等资料采用Excel 软件建立数据库，采用SPSS 11.0统计软件对数据进行分析，率的比较采用χ²检验，P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 病例基本情况

截至2014年5月31日24：00时，肇庆市怀集县共报告人感染H7N9禽流感确诊病例9例，无死亡病例。首例病例发病日期为1月22日，末例病例发病日期为2月6日。9例病例中有2例病例是通过住院重症肺炎病例排查的途径被发现，1例是通过密切接触者采样送检的途径被发现，其余6例是疫点流感样病例强化监测送检被发现，见表 1。

9例病例发病至确诊间隔时间在4~10 d，中位数为6 d。病程最长36 d，最短9 d，中位数为14 d。重症病例4例，其余为轻症病例。全部病例均有发热(体温均＞39 ℃)和咳嗽，重症病例均出现重症肺炎表现，轻症病例除病例2出现肺炎症状外，其余只有咳嗽或咽痛、流涕等流感样症状。4例病例有基础性疾病，见表 1。 2.3 流行病学特征 2.3.1 三间分布

9个病例分布在5个镇，其中主城区H镇5例，F、Q、M和L镇各1例。男性7例，女性2例，男女性别比为3.5 ∶ 1。年龄最小4岁，最大62岁，中位数为11岁。职业分布：3例为幼托儿童，学生、工人各2例，农民、家务待业各1例。 2.3.2 活禽接触史

全部病例均否认发病前接触过病死禽，只有1例病例发病前接触过有流感样症状的病例。9例病例发病前10天均有明确的禽类接触史。暴露的禽类种类均为鸡。暴露频次：除病例1、4和5每天均有接触外，其余病例为一周数次接触(非每天)。暴露场所分类中，有3例病例(病例1、6和7)存在市场和家庭养殖两种类型的暴露场所；其余病例的暴露场所均为家庭养殖。 2.4 密切接触者发病情况

全部病例的密切接触者共164人，其中医务人员61人，经过7天的医学观察期，有6人出现流感样症状，其中1人(病例3)经确诊为人感染H7N9禽流感病例。 2.5 环境标本检测情况 2.5.1 病家环境标本检测情况

对9例病例共采集家庭环境标本135份，H7亚型阳性标本9份，阳性率为6.67%。 2.5.2 市场环境标本检测情况

在出现病例后，对病例曾经到过的市场或病例所在地区的市场、抽取部分未发生病例的市场，采集环境标本进行检测。共采集标本161份，H7亚型阳性标本有64份，阳性率为39.75%，其中病例1购买活禽的H1市场阳性率高达67.50%，病例7发病前到过的L镇市场阳性率达70.00%，见表 2。

怀集县政府在出现疫情后，对出现H7阳性的市场的家禽进行扑杀和无害化处理；对全县活禽市场实行关闭市场和彻底的清洁消毒；全县活禽市场落实“一日一清洗，一周一消毒，一月一休市”制度。 2.6.2 休市措施评估 2.6.2.1 新发病例明显减少

怀集县有病例发生的主城区H镇和乡镇在采取市场休市措施后新发病例数均明显下降。H镇末例病例发病日期是2月6日，H7N9禽流感例病潜伏期一般是1~7 d，H镇活禽交易市场于1月31日开始休市，H镇实行活禽市场休市措施后无新增病例；乡镇于2月6日开始休市，休市前病例数为4例，休市后无新增病例。 2.6.2.2 活禽市场环境标本H7型阳性率降低

采取休市措施后，有病例发生的地区活禽市场H7阳性率均大幅度下降。主城区活禽市场阳性率由休市前的65.00%，下降到3.49%，差异有统计学意义(χ²=70.782，P=0.000)；乡镇市场休市前为14.81%，休市后未检出H亚型禽流感病毒，差异有统计学意义(χ²=17.541，P=0.000)，见表 3。

肇庆市怀集县于2014年1月30日报告首例病例，两周时间内共发现9例病例。病例的中位年龄11岁，14岁以下的病例有5例，50岁以上的病例只有1例，与国内报告人感染H7N9禽流感病例以中老年为主不同^[4]。9个病例中重症病例均有基础病史，且均为男性，年龄在28～62岁;轻症病例均无基础病史，年龄均＜14岁。提示患有基础病史的中老年男性可能是人感染H7N9禽流感重症病例的高危人群，与我国其他地区的报道一致^[5]，年轻人感染H7N9后多表现为轻症。9例病例的发现途径，有6例是通过疫点流感样病例强化监测被发现的，强化监测有助于禽流感病例的发现。

流行病学调查显示，9例病例发病前10天均有禽类接触史，病例1、6和7均有到过活禽市场。病例1和6到过的活禽市场(H1、L市场)环境标本H7阳性率均在60%以上。提示发病前到过活禽市场可能是感染H7禽流感病毒的危险因素^[6]。病例7到过的M镇市场未检出H7阳性，可能与该市场采集的标本量较少有关。

病例3是病例2的密切接触者，在观察期内被发现感染H7N9禽流感病毒，符合聚集性疫情。据流行病学调查，这2个病例是堂兄妹关系，共同居住在一幢5层的楼房里，平时由祖母照看。其祖母在楼房的顶层养鸡，兄妹二人常跟着祖母给鸡喂食，有时在旁边玩耍。对病家采集环境标本进行流感病毒核酸检测，有3份标本呈H7亚型阳性；2例病例发病相距2 d，而人感染H7N9禽流感的潜伏期一般为1~7 d，因此考虑二者为同源暴露，与王玉林等^[7]报道一致。

怀集县政府于1月31日起暂停主城区的活禽交易，关闭所有农贸市场的活禽摊位，并进行彻底的终末消毒。2月6日对全县所有乡镇的活禽市场进行休市并全面清洁消毒，休市结束时间为2月19日。怀集县在实行活禽市场休市措施后，全县活禽市场H7亚型禽流感病毒阳性率大大下降，人感染H7N9禽流感病例也大幅度下降。以主城区休市时间1月31日(乡镇2月6日)和全县休市结束时间2月19日为时间点划分为休市前和休市后两个时间段，分析在这两个时间段内市场环境H7N9禽流感病毒阳性率与病例数的关系。休市前，H镇市场H7阳性率为65.00%，乡镇市场为14.81%；休市后，H镇市场为3.49%，乡镇市场无检出H7亚型禽流感病毒。H镇共有5个病例，首例于1月22日发病，末例于2月6日发病，距开始休市时间为6 d。H7N9禽流感例病潜伏期一般是1~7 d，末例病例发病时间落在潜伏期内，自2月7日开始H镇无新病例出现。乡镇首例病例于1月27日发病，末例病例发病日期为2月1日，均处于休市前，2月2日开始无新病例出现。

在发现首例人感染H7N9禽流感病例后，怀集县政府采取综合防控措施：对病例进行隔离治疗，密切接触者医学观察，疫点流感样病例强化监测，全县活禽市场休市、清洁消毒。多种措施联合作用，该县自2月7日开始无新发病例出现，疫情得到有效控制。