乙型病毒性肝炎(乙肝)是一个世界性的公共卫生问题^[1]。据世界卫生组织报道，全球约有20亿人曾感染过乙肝病毒 (Hepatitis B virus，HBV)，3.5亿人患有慢性肝病，每年约100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌^[2]。我国是乙肝的高发地区之一，2006年全国乙肝血清流行病学调查显示1~59岁人群乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)流行率为7.18%，其中15~59岁人群HBsAg流行率为8.57%^[3]。成人乙肝疫苗接种工作在我国还未系统开展，因此研究成人乙肝疫苗的免疫策略是开展成人乙肝防制的重点工作。本研究通过按不同的接种程序接种乙肝疫苗，观察其免疫效果，与标准的接种程序进行比较，探讨适用于成年人接种乙肝疫苗的有效接种程序。

在浙江省湖州市南浔区选择菱湖、善琏、千金、练市、和孚及旧馆6个乡镇(街道)16~49岁成年人，性别不限。调查前对目标人群采集外周静脉血2 ml，分离血清后，检测HBsAg、抗乙肝病毒表面抗原抗体(antibody to HBsAg，抗-HBs)和抗乙肝病毒核心抗原抗体(antibody to HBV core antigen，抗-HBc)，对HBsAg、抗-HBs和抗-HBc均为阴性者开展流行病学个案调查，按乡镇(街道)为单位分为A、B两组，A组按0，1，3月程序接种20 μg重组(CHO)乙肝疫苗，B组按0，1，12月程序接种。对所有完成全程接种的对象，第三针接种后1个月采集静脉血3 ml，分离血清后置-20 ℃保存备检。

纳入标准：自愿参加本研究，经过筛选HBsAg、抗-HBs、抗-HBc均阴性，全程接种并完成免疫后1个月采血的研究对象。

排除标准：已知或筛选检测HBsAg、抗-HBs、抗-HBc有一项阳性者；不愿意或不可能参与此项观察计划；有过敏史者，发生过严重疫苗反应者；已知或预知有免疫功能损害；接受免疫抑制治疗者(接受任何注射或口服考地松或癌症化疗者)；接受免疫刺激剂者；过去4周内曾接种过任何一种疫苗；过去4周内曾接种过任何一种观察药物；过去7天内曾患有任何急性疾病；过去7天内曾患有需要接受抗生素或抗病毒治疗的感染；过去3天内曾患有发热 (腋温≥38 ℃)。

本研究使用的疫苗为华北制药金坦生物技术股份有限公司生产的20 μg重组(CHO细胞) 乙肝疫苗(规格：20 μg/1.0 ml/支)，使用的批号和有效期分别为：批号200802A2102，有效期2011.1；批号2008021A2103，有效期2011.1；批号201002X2201，有效期2013.1；批号201002X2104，有效期2013.1。分别采用0，1，3月和0，1，12月程序于上臂外侧三角肌接种乙肝疫苗。

HBsAg、抗-HBc、抗-HBs的检测由杭州市艾迪康医学检验中心使用化学发光法完成。应用美国ABBOTT公司ARCHITETi2000化学发光免疫分析仪，检测HBsAg的判别标准是S/N≥0.05为阳性；抗-HBs的判别标准是抗-HBs≥10 mIU/ml为阳性；检测抗-HBc的判别标准是抗-HBc≥1 mIU/ml为阳性。HBsAg、抗-HBs检测结果不相符者，重新检测；标本抗-HBs≥15 000 mIU/ml者不再稀释检测。

检测结果采用EpiData软件建立数据库，双录入数据；运用SPSS 13.0软件进行统计分析整理。对不同年龄组进行分析时年龄划分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组，其中Ⅰ组为16~25岁，Ⅱ组为26~35岁，Ⅲ组为36~49岁。计数资料采用χ²检验或Fisher确切概率法，计量资料服从正态分布或经对数转换后服从正态分布时采用方差分析。研究结果判定时，P值取双侧概率，检验水准α定为0.05。在计算抗-HBs的几何平均浓度(geometric mean concentration，GMC)时，对于无法检测到抗-HBs(抗-HBs < 0.01 mIU/ml)的研究对象，统一赋值为0.001 mIU/ml进行计算。

本次研究共对1544人进行采血筛查，其中HBsAg、抗-HBs、抗-HBc均阴性者526人，完全程接种并免后1个月采血者有435人，其中男性有205人，女性有230人，平均年龄为(30.96±8.47)岁，各组性别分布和年龄情况见表1。两组性别分布差异有统计学意义(χ²=6.963，P=0.008)，两组年龄差异无统计学意义(t=-0.708，P=0.480)。对两种程序的不同性别年龄分布统计，其中A组男性和女性的平均年龄分别为(30.57±9.39)岁和(30.79±7.89)岁，差异无统计学意义(t=-0.183，P=0.855)；B组男性和女性的平均年龄分别为(29.36±8.24)岁和(32.69±8.03)岁，差异有统计学意义(t=-2.959，P=0.003)。

全程免疫后不同年龄组间抗-HBs的阳转率和GMC的差异均无统计学意义(P>0.05)。A组抗-HBs GMC各年龄组间的差异有统计学意义(F=3.881，P=0.022)；Ⅱ组与Ⅲ组的抗-HBs GMC低于Ⅰ组，差异有统计学意义(P < 0.05)；Ⅲ组的抗HBs阳转率低于Ⅰ组，差异有统计学意义(P < 0.05)，见表2。

全程免疫后1个月男性抗-HBs阳转率为80.00%，女性抗-HBs阳转率为79.57%，不同性别抗-HBs阳转率的差异无统计学意义(χ²=0.013，P=0.910)。A组的不同性别间抗-HBs阳转率差异无统计学意义(P>0.05)，B组的不同性别间抗-HBs阳转率差异有统计学意义(P < 0.05)，见表3。

全程免疫后整体抗-HBs阳性率为79.77%。B组的抗-HBs阳性率和GMC分别为95.87%和893.53 mIU/ml； A组的抗-HBs阳性率和GMC分别为63.59%和31.99 mIU/ml，见表4。两组的抗-HBs阳性率差异有统计学意义(χ²=70.207，P < 0.001)；两组抗-HBs GMC差异有统计学意义(F=89.609，P < 0.001)。

乙肝疫苗问世以来，新生儿乙肝疫苗免疫阻断母婴传播的成效已为国内外所证实^[4]。 普通人群的乙肝携带率已有所下降^[5]，但仍处于较高水平，如果仅通过对新生儿的普遍接种，随着年龄增加而降低HBsAg流行率，那么控制乙肝则需要很长时间。另外成年人和新生儿也是两个不同的免疫人群，成年人的流动性较大，对于固定的免疫程序，往往不能完成全程免疫。因此探讨不同免疫程序接种乙肝疫苗后的免疫效果对于制定成年人接种乙肝疫苗的免疫策略具有十分重要意义。

本研究采用0，1，3月和0，1，12月的两种程序分别对2组成年人群接种乙肝疫苗。结果发现0，1，3月程序全程接种后1个月抗-HBs的阳转率为63.59%(57.06%~69.81%)，0，1，12月程序全程接种后1个月抗-HBs的阳转率为95.87% (92.68%~97.99%)。龚晓红等^[6]和刘重程等^[7]的研究采用传统的0，1，6月程序接种20 μg重组(CHO)乙肝疫苗后抗-HBs的阳转率为98.72%和99.07%。比较发现0，1，12月程序组的抗-HBs阳转率与传统的0，1，6月程序一致，而0，1，3月程序组的抗-HBs阳转率较低，对GMC的比较也显示0，1，3月程序低于0，1，6月程序和0，1，12月程序。可能是由于0，1，3月程序第三针与前两针间隔时间短所致^[8]，为获得更好免疫效果可适当延长第三针的间隔。所以成年人按0，1，12月程序接种乙肝疫苗也能取得良好的免疫效果，0，1，3月程序的免疫效果相对次之。

将所有受试者根据其年龄分组，比较发现整体上抗-HBs的阳性率和GMC差异均无统计学意义。0，1，3月程序组的抗-HBs的GMC在各年龄组间的差异有统计学意义，随着年龄增加GMC降低，与周波青^[9]的研究结果一致，提示应尽早接种乙肝疫苗。各个年龄组内比较发现0，1，12月程序组的抗-HBs阳性率和GMC均高于0，1，3月程序组，提示0，1，12月程序接种乙肝疫苗的效果优于0，1，3月程序。

有研究认为女性接种乙肝疫苗的免疫效果好于男性^[10]。本研究结果显示接种乙肝疫苗后整体上男女性别间抗-HBs的差异无统计学意义，与徐峰等^[11]研究结果一致。但就具体程序而言，0，1，12月程序组接种乙肝疫苗后男性的免疫效果好于女性，通过进一步分析发现0，1，12月程序组中男性的年龄偏小，有研究也发现年龄越小^{[12, 13, 14]}，接种乙肝疫苗后可获得较好的免疫学效果。

乙肝疫苗全程免疫后免疫效果受诸多的因素影响，但接种的程序和乙肝疫苗的剂量是其中的主要因素。由于本次研究只做了一种剂量的观察，观察时间也只有1个月，而且样本量有限，对于接种不同剂量乙肝疫苗的免疫效果及其免疫的持久性观察还有待进一步研究。