疾病监测  2015, Vol. 30 Issue (4): 284-286

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张海龙, 叶郁辉, 陈小珍, 吴延杰, 杨洪, 姚相杰, 陈龙, 何雅青
ZHANG Hai-long, YE Yu-hui, CHEN Xiao-zhen, WU Yan-jie, YANG Hong, YAO Xiang-jie, CHEN Long, HE Ya-qing
2011-2013年深圳市福田区轮状病毒感染情况分析
Rotavirus infection status among patients with diarrhea in Futian, Shenzhen,2011-2013
疾病监测, 2015, 30(4): 284-286
Disease Surveillance, 2015, 30(4): 284-286
10.3784/j.issn.1003-9961.2015.04.010

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收稿日期：2014-06-09
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张海龙, 叶郁辉, 陈小珍, 吴延杰, 杨洪, 姚相杰, 陈龙, 何雅青. 2011-2013年深圳市福田区轮状病毒感染情况分析[J]. 疾病监测, 2015, 30(4): 284-286.
ZHANG Hai-long, YE Yu-hui, CHEN Xiao-zhen, WU Yan-jie, YANG Hong, YAO Xiang-jie, CHEN Long, HE Ya-qing. Rotavirus infection status among patients with diarrhea in Futian, Shenzhen,2011-2013[J]. Disease Surveillance, 2015, 30(4): 284-286.
2011-2013年深圳市福田区轮状病毒感染情况分析
张海龙1, 叶郁辉2, 陈小珍3, 吴延杰2, 杨洪1, 姚相杰1, 陈龙1, 何雅青1     
1. 深圳市疾病预防控制中心, 深圳市重大传染病监测重点实验室, 广东 深圳 518055;
2. 北京大学深圳医院, 广东 深圳 518036;
3. 深圳市儿童医院, 广东 深圳 518026
收稿日期:2014-06-09
作者简介: 张海龙,男,广东省梅江区人,副主任技师,硕士,主要从事肠道病毒的研究;叶郁辉, 男,广东省五华县人,主任医师,本科,主要从事预防医学研究
通信作者：何雅青,Tel:0755-25623660,Email:heyaqing1019@126.com
摘要：目的 了解深圳市福田区轮状病毒的感染情况,为制定预防轮状病毒感染的策略提供依据. 方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)对2011-2013年深圳市福田区1728例疑似病毒性腹泻患者粪便标本进行轮状病毒的核酸检测. 结果 2011-2013年福田区轮状病毒的总体检出率为18.29%(316/1728),2011-2013年检出率起伏较大,分别为22.16%(115/519)、13.13%(73/556)和19.60%(128/653);男性检出率为18.53%(184/993),女性检出率为19.96%(132/735);轮状病毒在冬季的检出率最高(34.79%,167/480),秋季次之(20.67%,87/421),春季、夏季的检出率较低.0~5岁年龄组患者的检出率(21.01%,232/1104)显著高于5岁以上年龄组患者的检出率(13.46%,84/624),差异有统计学意义,(χ2=29.5786,P <0.05). 结论 轮状病毒是福田区病毒性腹泻的重要病原体之一,2011-2013年检出率呈较大起伏;冬季是轮状病毒感染的高发季节;0~5岁婴幼儿患者是轮状病毒感染的重点人群;应加强对轮状病毒腹泻的监测,尤其应加强对婴幼儿轮状病毒感染的预防控制.
关键词： 轮状病毒    实时荧光RT-PCR    监测    
Rotavirus infection status among patients with diarrhea in Futian, Shenzhen,2011-2013
ZHANG Hai-long1, YE Yu-hui2, CHEN Xiao-zhen3, WU Yan-jie2, YANG Hong1, YAO Xiang-jie1, CHEN Long1, HE Ya-qing1     
1. Key Laboratory for Priority Communicable Disease Surveillance, Shenzhen Center for Disease Control and Prevention, Shenzhen 518055, Guangdong, China;
2. Peking University Shenzhen Hospital, Shenzhen 518036, Guangdong, China;
3. Shenzhen Children's Hospital, Shenzhen 518026, Guangdong, China
Abstract:Objective To investigate the infection status of rotavirus in Futian district of Shenzhen, Guangdong province, and provide evidence for the prevention and treatment of diarrhea. Methods Stool samples were collected from suspected viral diarrhea patients in Futian. Rotaviruses were detected by using real time polymerase chain reaction(real-time PCR). Results From January 2011 to December 2013, a total of 1728 stool samples were collected, the overall detection rate of rotavirus was 18.29%(316/1728), while the annual detection rates were 22.16%(115/519),13.13%(73/556), and 19.60%(128/653) respectively. The detected rate of rotavirus was 18.53% among males(184/993) and 19.96% among females(132/735). The detection rate was highest in winter(34.79%, 167/480), followed by autumn(20.67%, 87/421), while the detection rate was low in spring and summer. The detection rate was significantly higher in age group 0-5 years(21.01%) than in age group>5 years(13.46%). Conclusion Rotavirus was one of the major pathogens causing viral diarrhea in Futian district, while the detection rates showed marked fluctuation from 2011 to 2013. The rotavirus infection had obvious seasonality with incidence peak in winter. Infants and young children were more susceptible. Therefore, it is necessary to strengthen the prevention and control of viral diarrhea caused by rotavirus, especially among infants and young children.
Key words: Rotavirus    Real-time PCR    Surveillance    

轮状病毒(Rotavirus，RV)，属呼肠孤病毒科(Reoviridae)，是各种幼龄动物非菌性腹泻的主要病原之一，其中人RV是引起婴幼儿腹泻的重要病原，也可引起成人感染。发展中国家每年约有1亿例儿童RV感染，是5岁以下儿童死亡的重要因素[1]。RV在发达国家的感染率也很高，但病死率较低[2]。福田区是深圳市经济特区的核心区域，各种社会、经济活动非常活跃，各项社会事业飞速发展，包括病毒性腹泻在内的感染性腹泻发病率高、增长速度快，给患者造成较重的疾病负担，对经济发展造成不利的影响[3]。目前，福田区有两家医院作为哨点医院被纳入深圳市疾病预防控制中心(CDC)的病毒性腹泻监测网络。通过监测RV感染的变化趋势，可为福田区RV的预防控制提供科学依据。现将2011年1月至2013年12月的监测情况汇报如下。

1  材料与方法 1.1  研究对象

采集2011年1月至2013年12月福田区两家深圳市病毒性腹泻监测网络哨点医院门诊及住院急性腹泻病例患者粪便标本1728份，粪便性状为蛋花样、稀糊样、黏液样及稀水样，排除脓血便，并经常规细菌鉴定为阴性，置-80 ℃冰箱保存待检。

1.2  试剂

Roche High Pure Viral Nucleic Acid Kit试剂盒，无水乙醇，深圳市太太基因生物工程有限公司提供的RV荧光PCR试剂盒，生理盐水。

1.3  病毒RNA的提取

取50~100 μl水样便，加生理盐水500 μl制成10%~20%的悬液，8000 r/min离心5 min，取200 μl标本上清加400 μl结合液，混合均匀，加入纯化过滤管中，10 000 r/min离心1 min，弃去过滤液，换一新的收集管，加入500 μl抑制剂去除液，10 000 r/min离心1 min，弃去过滤液，再换一新的收集管，加入450 μl洗液，10 000 r/min离心1 min，重洗1次，最后离心13 000 r/min，10 s，弃去残余的洗液；去掉收集管，换一个干净的无菌的1.5 ml EP管，加入50 μl洗脱液洗脱病毒核酸，置-80 ℃保存备用。

1.4  实时定量荧光聚合酶链反应(real-time quantitative PCR，real-time PCR)检测

深圳市太太基因生物工程有限公司提供的RV荧光PCR试剂盒，将提取的病毒RNA样本在ABI7500荧光PCR仪上进行real-time PCR反应。试剂配制及荧光PCR反应条件参见试剂盒说明书。

2  结果 2.1  RV感染的总体检出情况

经检测，本研究采集的1728份疑似感染性腹泻粪便标本中，316份检出RV阳性，总体阳性率为18.29%。

2.2  RV感染的性别分布情况

本研究采集的1728份疑似感染性腹泻粪便标本中，男性患者标本993份，阳性184份，阳性率为18.53%；女性735份，阳性132份，阳性率为19.96%。经统计学检验，不同性别的RV检出率差异无统计学意义 (χ2=0.0920，P>0.05)。

2.3   2011-2013年各年度RV检出情况

2011-2013 年福田区RV的检出率呈较大起伏，见表1。经统计学检验，2011年与2012年RV的检出率差异有统计学意义(χ2=15.1635，P < 0.05)；2011年与2013年RV的检出率差异无统计学意义(χ2=1.1496，P > 0.05)；2012年与2013年RV的检出率差异有统计学意义(χ2=9.0757，P < 0.05)。

表 1 2011-2013年深圳市福田区各年度RV感染的检出情况 Table 1 Annual detection of rotavirus in Futian，2011-2013
年份检测数检出数阳性率(%)
201151911522.16
20125567313.13
201365312819.60
合计172831618.29
表选项
2.4  福田区RV感染的季节分布情况

深圳市福田区为亚热带海洋性季风气候，一般春季为2-4月，夏季为5-7月，秋季为8-10月，冬季为11月至次年1月。冬季福田区RV的检出率最高，秋季次之，春季、夏季的检出率则相对较低，见表2。

表 2 2011-2013年深圳市福田区各季度RV感染的检出情况 Table 2 Season specific detection of rotavirus in Futian，2011-2013
季节检测数检出数阳性率(%)
春季389317.97
夏季438317.08
秋季4218720.67
冬季48016734.79
合计172831618.29
表选项
2.5  RV感染的年龄分布情况

3~4岁年龄组患者RV的检出率最高，0~2岁年龄组患者的检出率次之，但3~4岁年龄组患者的标本数量较少，其检出率受检出数的变化的影响较大，见表3。将5岁以下婴幼儿患者(0~2岁年龄组及3~4岁年龄组患者)的检出情况(21.01%，232/1104)与5岁以上年龄组患者的检出情况(13.46%，84/624)比较，差异有统计学意义(χ2=15.2198，P < 0.05)。

表 3 2011-2013年深圳市福田区不同年龄组RV感染的检出情况 Table 3 Age specific detection of rotavirus in Futian，2011-2013
年龄组(岁)检测数检出数阳性率(%)
0~108422720.94
3~20525.00
5~29310.34
15~2328.70
20~5727913.81
合计172831618.29
表选项
3  讨论

RV是世界各地非菌性腹泻的主要病原之一，不同地区RV的感染率有所不同[4, 5, 6]，可能与地理分布、检测方法的不同等因素有关。本研究中2011-2013年深圳市福田区RV的总体检出率为18.29%，与本地区同时期诺如病毒大体一致(20.14%，348/1728)，显著高于肠道腺病毒和星状病毒(分别为1.85%，32/1728；1.39%，24/1728)，显示RV是本地区病毒性腹泻的重要病原体之一，与深圳市2010年总体的检出情况一致[7]。

本研究中，RV的检出率起伏较大。影响RV感染率的可能因素：(1) RV疫苗的推广使用[8]；(2)气候条件变化可能引起RV感染模式发生变化[9]；(3)病毒流行株构成及毒力的变化[10]。本研究未考察RV疫苗的推广使用及气候条件变化对RV检出率变化的影响，有待于未来相关实验数据的收集与分析。值得注意的是，本实验室对RV进行的分子分型研究显示，近年来G9型RV在总体RV的构成比中呈逐年下降趋势(另文发表)。本研究中RV的检出率呈较大起伏与G9型RV在总体RV的构成比中呈逐年下降趋势是否存在关联，亦值得进一步深入研究。

本研究中冬季RV的检出率最高，秋季次之，春季、夏季的检出率则相对较低，与相关报道一致[11]。另外，本研究中5岁以下婴幼儿患者RV的检出率为21.01%(232/1104)，显著高于5岁以上年龄组患者RV的检出率(13.46%，84/624)，显示婴幼儿是RV最重要的易感人群，可能与婴幼儿的抵抗力较差有关。但本研究中，20岁以上成年人RV的感染率为13.81%(79/572)，提示应加强对成年人RV感染的监测[12]。

( 志谢： 本研究得到深圳市病原微生物资源库建立与应用公共服务平台项目大力支持。)

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