钩端螺旋体(钩体)病是由钩体属的不同血清型致病性钩体引起的一种人兽共患病，主要传染源以鼠类、猪和牛等为主，以接触疫水为传播途径。孟连县是钩体病的主要疫源地之一，1988年省地方病防治所在本县做过钩体病原学及血清学调查证实了本县存在钩体病，其发病率排在痢疾、疟疾之后，位居第3位；但部分乡镇的钩体病发病率则高居各类法定报告传染病之首^[1]。随着2005年国家重点传染病防治监测项目的启动，孟连县被确定为钩体病的国家级监测点。孟连县自2005年起，根据国家《全国钩端螺旋体病监测方案》要求，在全县6个乡镇开展了以人间疫情、疫源地宿主动物带菌率、菌群变化等内容为主的钩体病监测工作。现将2005-2013年监测结果报告如下。

全县各医疗单位按照钩体病临床诊断标准，对辖区内就诊的钩体病疑似发热患者，采集未使用抗生素治疗的静脉血 5 ml，注入一次性使用人体静脉血样采集容器中，血样当天分离出血清，注入血清管内放入冰箱冷藏送县疾病预防控制中心(CDC)鉴定。患者血清学监测采用国内参考的15群15型标准菌株，以显微镜凝集试验(MAT)测定血清抗体，凡血清抗体滴度≥1 ∶ 400 者判定为阳性^[2]；患者采血针管中全血分别滴入两支培养基中2~3滴，轻轻摇晃混匀培养基试管，放在常温下保存培养钩体。

每年4 11月，采取夹夜法在各乡镇农耕区(含居民点)进行捕鼠，对不低于100只鼠类进行种类、分布、密度、感染率的监测调查。此外，每年根据具体情况选择2种以上其他动物的样本(如猪肾、青蛙肾、牛尿等)进行病原学分离和培养，每类样本量不低于50份。

病原体分离培养采用8%兔血清磷酸盐缓冲液，即 Kothorf 培养基，检材观察时间为90 d，分离出菌株及时传代定群，然后送云南省地方病防治所人畜共患病科进行复判和进一步鉴定。

每年在钩体病的流行前期，随机采集 10～岁、20～岁、30～岁、40～岁、50～岁共5个年龄组的血清标本100份(每年龄组采集20份)，采用MAT检测抗体，将15群标准血清分别用生理盐水稀释成1 ∶ 25(2.4 ml生理盐水加0.1 ml血清混匀)；用移液器将已稀释的分群标准血清100 μl，分别加入到有机玻璃反应板第1列的15 个凹孔内，用 PBS 倍比稀释成1 ∶ 50，1 ∶ 100等不同稀释度，每孔再用移液器吸取待检菌株100 μl(凹孔内最终浓度为稀释度的2倍)。将反应板置振荡器上摇匀，37 ℃ 2 h(或22～37 ℃ 20 min)。用接种环挑取凹孔内反应物于载玻片上暗视野镜检，观察有无凝集现象。以出现++凝集(即视野中50%钩体凝集)为终点滴度，以最高稀释度的血清群别报告，血清抗体≥1 ∶ 50判定为阳性^[3]。

2005-2013年，全县6个乡镇共发现和报告钩体病172例，年平均发病率为 14.88/10 万，无死亡病例报告。其中，2005 2010年共发病144 例，占总发病例数的83.72%，发病率较高，在此期间各年发病无明显变化；但2011年始，发病数出现了下降趋势，2011-2013年三年间，仅发病 28 例，占总发病例数的 16.28%，发病率相对较低，发病处于稳定水平，见图 1。

图 1 2005-2013年孟连县钩体病发病率 Figure 1 Incidence of leptospirosis in Menglian, 2005-2013

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钩体病的发病呈明显的季节性，发病时间主要集中在 6 10月当地气温和雨量的高峰时节，此期间共发现患者166例，占总发病例数的 96.51%；除5月报告 6 例外，其余各月均无病例报告，见图 2。

图 2 孟连县钩体病的季节分布情况 Figure 2 Seasonal distribution of leptospirosis cases in Menglian

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钩体病在全县6个乡镇均有发病，但各乡镇病例分布差异较大。其中，勐马镇(27.33%)、芒信镇(21.51%)、娜允镇(19.77%)、景信乡(16.28)、富岩乡(11.05%)5个乡镇发病数共占总发病例数的95.93%；公信乡最低，发病仅7例(4.07%)，见表 1。

男性114 例(66.28%)，女性58例(33.72%)，男女性别比为1.97 ∶ 1；年龄最小为 3.9岁，最大为 68岁，病例以16～50岁的青壮年为主(80.23%)；农民发病数140 例(81.4%)，学生 21例(12.21%)，民工及散居儿童各3例(各占1.74)，工人、教师、干部职员、商业服务及待业人员较少，仅各 1例，见表 2。

2005-2013 年共采集发热疑似钩体病患者急性期和/或恢复期血清标本 3888 份，其中MAT 阳性 93 份，阳性率为 2.39%；共检测出 12 个血 清群，菌群以黄疸出血群为主，其次 为澳洲群；黄疸出血群 35 份，阳性率为 37.63%；澳洲群 11 份，阳性率为 11.83%；犬群 7 份，阳性率为 7.53%；秋季热群 6 份，阳性率为 6.45%；致热群、七日热群及巴达维亚群各 5 份,阳性率均为 5.38%；拜伦群、流感伤寒群、塔拉索夫群、明尼群和波摩那群分别是 3、2、2、2 和 1 份，阳性率分别为 3.23%、2.15%、2.15%、2.15%和1.08%。93例实验室诊断病例中，单一感染 84 份,混合感染不同类型菌群者 9 份,构成比分别为 90.32%和9.68%；其中混合感染 2 种菌型者 8 例,感染 3 种菌型者 1 例。显示了该地区流行的钩体菌群多样性较高的特征。

2005-2013 年共检测健康人群血清样本 900 份，阳性 117 份,阳性率 13.00%。其中黄疸出血群 29 份，秋季热 14 份，澳洲群 13 份，七日热群 11 份，致热群 10份，犬群 9 份，拜伦群、流感伤寒群各 7 份，波摩那群、巴达维亚群各 5 份，明尼群 3 份，塔拉索夫群 2 份，爪哇群和曼耗群各 1 份。

2005-2013年每年4 11月，采用夹夜法测定野外鼠密度。共布放有效鼠夹33 944 个,捕鼠499只，平均鼠密度为1.47%。其中，黄胸鼠数量最多，占84.57%；其他依次为斯氏家鼠(6.01%)、臭鼩鼱(4.81%)、小家鼠(1.60%)，共占总鼠数的96.99%。监测表明，黄胸鼠为孟连县数量上的优势鼠种，见表 3。

2005-2013年共培养鼠肾、猪肾、青蛙肾、牛中段尿4类标本2269份，无效5份，分离到钩体菌株53株，总阳性率为2.34%。其中，鼠类的带菌率最高，为3.50%，与其他类标本带菌率相比，差异有统计学意义(χ²=12.740，P<0.001)，见表 4。

根据2005-2013年钩体疫情监测情况，全县钩体病疫情总体趋势稳中有降，2011年下降到最低水平。可能与下列因素有关:(1)生猪圈养、规模化生产及使用添加抗生素的饲料喂养,致猪的带菌率下降；(2)大量使用化肥、农药致疫水中钩体菌密度降低；(3)灭鼠、兴修水利、改造环境等,使自然疫源地面积缩小。病例发生具有明显季节性，多发于6 10 月，此时正值气温和降雨量较高的务农人员夏种秋收季节，提示该地区钩体病的流行与当地的地理和气候环境条件有关。该病主要在农村流行,受害者主要是农民,是由于农民下田劳动接触疫水较多的缘故。本病发病青少年和壮年居多,男性高于女性,可能是由于当地男女从业习惯与接触疫水的机会不同所致。

2005-2013年人间流行菌群均以黄疸出血群为优势菌群，其次为澳洲群，分别占总菌群数的37.63%和11.83%，与云南省其他地区以赛罗群、流感伤寒群为优势菌株不同^[2]；未发现赛罗群和爪哇群，与有关报道的孟连县赛罗群为首占37.90%、爪哇群19.36%、巴达维亚群9.27%、黄疸出血群7.66%相比，在血清型的组成上有明显变化^[2]。引起孟连县钩体病菌群变动或出现更迭的原因，有待进一步调查。

2005-2013年在鼠、猪、蛙和水牛尿等宿主动物中共分离到钩体菌株53株，宿主动物总带菌率2.34%，其中鼠肾阳性率最高，为3.50%，与其他类标本带菌率相比，差异有统计学意义，提示孟连县钩体病传染源以鼠类为主，其次蛙肾阳性率为2.06%，青蛙作为传染源也起了一定作用^[3]。

2005年以来孟连县钩体病流行趋势稳中有降，提示防治措施有效，疾病可防可控。孟连县双季水稻种植和畜牧业并重的生产方式，可能增加务农人员暴露于疫水的风险,更易感染钩体病病原体。根据孟连县目前钩体病的疫情形势,应采取以下预防控制措施：(1)根据本地流行的主要菌群,在钩体病流行季节来临之前(5月)对农民等高危人群选用有针对性的菌苗接种，提高人群免疫力；(2)加强各类高危目标人群的监测，了解人群的疫情动态和趋势，杜绝抗生素滥用，避免误诊漏诊，力争做到“早发现、早诊断、早处理”；(3)加强对宿主动物的监测，密切关注菌群变动；(4)采用灭鼠为主的综合性防治措施，改善环境卫生,降低鼠密度，对猪等家畜进行圈养,粪尿无害化处理；(5)加强重点村寨的钩体病防治健康教育宣传工作，提高广大群众田间作业者的自我保护意识，尽量减少疫水接触,防止钩体病暴发。