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文章信息
- 吕冰, 贾蕾, 张新, 曲梅, 张海艳, 严寒秋, 黄瑛, 李洁, 林长缨, 高志勇, 梁志超, 王全意
- LYU Bing, JIA Lei, ZHANG Xin, QU Mei, ZHANG Hai-yan, YAN Han-qiu, HUANG Ying, LI Jie, LIN Chang-ying, GAO Zhi-yong, LIANG Zhi-chao, WANG Quan-yi
- 2015年北京一起鼠伤寒沙门菌暴发流行的病原学检测分析
- Etiologic detection of an outbreak of Salmonella typhimurium infection in Beijing, 2015
- 疾病监测, 2016, 31(2): 171-173
- Disease Surveillance, 2016, 31(2): 171-173
- 10.3784/j.issn.1003-9961.2016.02.019
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文章历史
- 收稿日期: 2015-07-13
2. 北京市东城区疾病预防控制中心, 北京 100009
2. Dongcheng District Center for Disease Control and Prevention, Beijing, Beijing 100009, China
沙门菌属广泛存在于人类和动物肠道中,主要污染动物性食品,极易引起人类感染。近几年有报道沙门菌在多个国家暴发[1, 2],而国内也经常有报道发现沙门菌引起的疫情,提示沙门菌仍然是腹泻病的一个重要病原体。
2015年5月北京一家大型企业发生一起聚集性腹泻疫情,通过疾病预防控制中心(CDC)流行病学调查,实验室样品检测综合分析后,最终确定此次疫情为鼠伤寒沙门菌的暴发流行。
1 流行病学调查2015年5月北京市东城区某大型国企的多名职工出现腹泻、发热等症状,东城区CDC在5月8日接到报告后开展了流行病学调查。
首发病例发病时间为5月5日03:00,截至5月12日17:00,统计病例共66例。病例发病时间集中在5月5日,该日共发病52例(78.79%),主要症状以腹泻、发热为主。根据时间分布,短时间发病人数快速上升,高峰过后发病人数快速下降,呈现单峰曲线,考虑存在食源性污染的可能。
2 实验室检测 2.1 样品采集5月8日和11日共采集15名可能病例以及18名无症状人员粪便样品共33份;采集5月6日晚餐及5月7日三餐留样44件食品样品;5月12日采集食堂环境样品20件。
2.2 肠道多病原快速检测应用荧光定量PCR-TaqMan探针法对所有采集到的样本进行肠道多病原检测[3, 4, 5, 6]。食品样品中3份沙门菌基因检测阳性,食堂环境样品中 13份沙门菌基因检测阳性,粪便样品中 9份沙门菌基因检测阳性。初步判断此次疫情病原体为沙门菌。核酸提取试剂盒由Qiagen公司提供;病原体荧光定量PCR检测试剂盒由上海之江生物公司提供。
2.3 菌株分离及鉴定根据《感染性腹泻病诊断标准WS 271-2007》,《食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验沙门菌标准 GB 4789.4-2010》,采集样品经增菌、选择培养基培养,并完成生化鉴定,共分离18株沙门菌,其中 2株沙门菌分离自食堂环境样品,分别为食堂粗加工间的清洗池下水口涂抹和鱼铁刷子涂抹样品;16株沙门菌分离自16件粪便样品。血清鉴定结果为鼠伤寒沙门菌[4,5,12:i:2]。
2.4 脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型按照美国CDC公布的沙门菌PFGE标准分型方法,对18株沙门菌菌株进行分子分型。聚类图见图 1,18株菌株呈现一致的带型,在北京市沙门菌PFGE数据库中未发现和此次疫情相同的菌株。
2.5 耐药性检测药敏试验用最小抑菌浓度(MIC)法,使用上海星佰生物技术有限公司生产的革兰阴性需氧菌药敏检测板,其结果与《抗菌药物敏感性试验执行标准:第23版资料增刊(2013年1月)》比较,以大肠埃希菌(ATCC25922)作为质控菌株。应用的抗生素及18株沙门菌耐药性检测结果见图 1,方框内为本次疫情分离到的18株鼠伤寒沙门菌,图中可见除2015DCSM073一株外,其他菌株耐药检测结果几乎一致。而菌株2015DCSM073对12种药物耐药,包括氟喹诺酮类的环丙沙星及三代头孢类头孢曲松等。
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注:方框内为此次疫情分离到的18株鼠伤寒沙门菌。* 由外环境分离到鼠伤寒沙门菌。 CIP:环丙沙星;STR:链霉素;AMP:氨苄西林;CHL:氯霉素;SUL:磺胺异恶唑;SXT:复方新诺明;NAL:萘啶酸;AUG:阿莫西林-克拉维甲酸;CRO:头孢曲松;DOX:强力霉素;GEN:庆大霉素;AZM:阿奇霉素;TET:四环素;FOX:头孢西丁;FEP:头孢吡肟;IMP:亚胺培南。 图 1 18株鼠伤寒沙门菌在北京市沙门菌PFGE数据库中的比对结果 Figure 1 The PFGE pattern of 18 Salmonella strains compared in Beijing Salmonella database |
目前荧光定量PCR方法已成为病原体快速筛查的手段之一,为迅速控制传染源减少疫情传播提供了初步的理论依据。大大提高了疫情分析的工作效率。
根据近年来的监测数据,在北京地区引起腹泻的病原体仍以志贺菌、沙门菌、致泻性大肠埃希菌及轮状病毒等为主[7]。此次疫情病原体为鼠伤寒沙门菌,符合北京地区沙门菌分布规律[8]。根据以往PFGE分型研究[9],北京地区分离到的鼠伤寒沙门菌带型之间的相似度不高,呈高度散发状态。这种高度散发可能与北京市的人口特征有关,北京地区人口密集、流动性大,输入性感染的机会比较多,也增加了病原体重组的机会。
根据文献报道[10],多重耐药菌的常见模式为抗氨苄西林、氯霉素、链霉素、磺胺类药物和四环素5种抗生素为主,而此次分离到的菌株比较符合该耐药模式,但是发现1株对12种抗生素耐药的菌株。根据以往对沙门菌的耐药监测[11],环丙沙星及头孢曲松往年的耐药率仅为2.61%和1.96%,耐12种药物耐药率仅为1.64%。耐药菌株的产生往往与抗生素的不当使用有关,说明了对抗生素耐药这一问题的预防控制工作任重而道远。
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