2016, Vol. 31扩展功能
文章信息
- 向国锋, 于德山, 程俊文, 李玉凤
- XIANG Guo-feng, YU De-shan, CHENG Jun-wen, LI Yu-feng
- 2009-2015年甘肃省酒泉市流行性感冒病原学监测结果分析
- Etiological surveillance for influenza in Jiuquan, Gansu, 2009-2015
- 疾病监测, 2016, 31(10): 851-855
- Disease Surveillance, 2016, 31(10): 851-855
- 10.3784/j.issn.1003-9961.2016.10.012
-
文章历史
- 收稿日期：2016-04-29
2. 甘肃省疾病预防控制中心 甘肃 兰州 730030;
3. 酒泉市人民医院 甘肃 酒泉 735000
2. Gansu Provincial Center for Disease Control and Prevention, Lanzhou 730030, Gansu, China;
3. Jiuquan People's Hospital, Jiuquan 735000, Gansu, China
流行性感冒(流感)病毒是造成人类及动物流行性感冒的一种正黏液病毒科的RNA病毒，易造成急性上呼吸道感染，常在世界各地引起周期性大流行[1]。全球每年有25万～50万人死于该病毒[2]。为掌握酒泉市流感流行特征，对2009年8月至2016年3月酒泉市流感病毒监测资料进行整理分析。
1 材料与方法 1.1 样品来源流感样病例(influenza-like illness，ILI)样本均来自于酒泉市国家级流感监测哨点医院(甘肃省酒泉市人民医院)；监测数据来自国家流感监测信息系统。
ILI定义：发热(体温≥38 ℃)，伴有咳嗽、咽痛之一者。采样对象为发病3 d以内且没有服用过抗病毒药物的ILI [3]。
1.2 样本采集、保存及运送监测哨点医务人员负责采集ILI的鼻咽拭子样本，用无菌拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，咽拭子置于3 ml pH 7.4的无菌病毒采样液中保存，48 h内低温运送至流感网络实验室。
1.3 检测方法 1.3.1 核酸检测采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)进行流感病毒核酸检测，同时对甲型流感病毒核酸阳性标本进行亚型分型，反应体系和条件严格按照产品说明书操作。每批试验带有阳性外部质控品。RNA抽提和检测试剂盒采用德国QIGEN公司的Rneasy Mini Kit(Cat No 74104)和Real-time RT-PCR试剂盒(Cat No 204443)，使用的引物探针为中国疾病预防控制中心(CDC)病毒病预防控制所提供。2013年以来使用的江苏硕世生物科技有限公司生产的流感病毒核酸检测商品试剂盒，主要检测设备为Agilent实时荧光PCR仪(MX3000P)，SIGMA(3-18K)台式冷冻离心机。
1.3.2 病毒分离、鉴定将阳性标本鼻咽拭子于MDCK细胞上及时接种500 μl，对细胞病变进行观察。用1%的人血细胞进行血凝实验，用流感病毒标准抗血清将血凝滴度≥8的标本进行血凝抑制试验以鉴定毒株型别[3]，毒株及时送中国CDC病毒病预防控制所复核，流感病毒毒株分型鉴定试剂由该所提供。
1.4 数据统计从中国流感监测信息系统中将所有数据导出，采用Excel软件进行数据处理。SPSS 20.0软件用于χ2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。
2 结果 2.1 流感病毒核酸检测 2.1.1 不同年度流感病毒核酸检测2009-2015年共检测ILI 3332例，流感病毒核酸阳性样本718例，阳性率为21.54%。2009年阳性率最高为28.60%，2013年最低为18.23%。每个流感流行年度阳性率比较差异有统计学意义(χ2=25.51，P＝0.000)。流感病毒阳性病例中甲型H1N1、H3N2和乙型的构成比分别为38.58%、31.20%和30.22%。2009年以甲型H1N1为主，占年度流感病毒阳性数的93.71%，2010年和2014年以甲型H3N2为主，2011年以乙型为主，占92.31%。其他年度甲型H1N1、甲型H3N2和乙型并存。见表 1。
| 年份 | 检测数 | 阳性数 | 阳性率(%) | 甲型H1N1 | 甲型H3N2 | 乙型 |
| 2009 | 500 | 143 | 28.60 | 134(93.71) | 6(4.20) | 3(2.10) |
| 2010 | 316 | 81 | 25.63 | 17(20.99) | 56(69.14) | 8(9.88) |
| 2011 | 285 | 52 | 18.25 | 0(0.00) | 4(7.69) | 48(92.31) |
| 2012 | 366 | 79 | 21.58 | 27(34.18) | 33(41.77) | 19(24.05) |
| 2013 | 598 | 109 | 18.23 | 28(25.69) | 29(26.61) | 52(47.71) |
| 2014 | 602 | 117 | 19.44 | 0(0.00) | 82(70.09) | 35(29.91) |
| 2015 | 665 | 137 | 20.60 | 71(51.82) | 14(10.22) | 52(37.69) |
| 合计 | 3332 | 718 | 21.54 | 277(38.58) | 224(31.20) | 217(30.22) |
| 注：括号外数据为例数，括号内数据为构成比。 | ||||||
检测男性标本2040份，阳性427份，阳性率为20.83%，女性1292份，阳性291份，阳性率为22.52%，男女性别之间的阳性率差异无统计学意义(χ2=1.19，P＝0.276)。
2.1.3 年龄分布1～岁年龄组儿童采集的标本数最多1426份，流感病毒核酸阳性226份，阳性率15.85%，占总阳性数的31.48%。5～岁组流感病毒阳性率最高29.07%，其次是15～岁组23.96%， < 1岁儿童流感病毒阳性率最低6.90%，各年龄组流感病毒核酸阳性率差异有统计学意义(χ2=74.51，P＝0.000)。见表 2。
| 年龄(岁) | 检测数 | 阳性数 | 阳性率(%) | 甲型H1N1 | 甲型H3N2 | 乙型 |
| 0～ | 58 | 4 | 6.90 | 1(25.00) | 2(50.00) | 1(25.00) |
| 1～ | 1426 | 226 | 15.85 | 59(26.11) | 99(43.81) | 68(30.09) |
| 5～ | 1118 | 325 | 29.07 | 104(32.00) | 99(30.46) | 122(37.54) |
| 15～ | 359 | 86 | 23.96 | 69(80.23) | 7(8.14) | 10(11.63) |
| 25～ | 336 | 72 | 21.43 | 42(58.33) | 16(22.22) | 14(19.44) |
| 60～ | 35 | 5 | 14.29 | 2(40.00) | 1(20.00) | 2(40.00) |
| 合计 | 3332 | 718 | 21.54 | 277(38.58) | 224(31.20) | 217(30.22) |
| 注：括号外数据为例数，括号内数据为构成比。 | ||||||
流感病毒核酸阳性主要分布在10月至次年3月。2009年主要以甲型H1N1为主，9月开始出现，10 -11月达到高峰，2010年1月结束。2010年9-12月以甲型H3N2为优势株，2011年1 -3月以甲型H1N1为优势株。2012年有2个高峰期，第1个高峰期为1-4月，以乙型为主，占80.64%，第2个高峰期为10月至次年1月，3种亚型的病毒均存在。2013年12月至次年3月，3种亚型病毒均存在，乙型为优势株(45.63%)。2014年11月至次年1月，以甲型H3N2为主(96.43%)，2015年3月出现春季乙型流感的小高峰，2016年1-3月以甲型H1N1和乙型流感同时流行。见图 1、表 3。
|
| 图 1 2009-2015年酒泉市流感病毒各亚型交替流行情况 Figure 1 Influenza virus subtypes prevalence in Jiuquan, 2009-2015 |
| |
| 月份 | 检测数 | 阳性数 | 阳性率(%) | 甲型H1N1 | 甲型H3N2 | 乙型 |
| 1 | 493 | 146 | 29.61 | 61(41.78) | 58(39.73) | 27(18.49) |
| 2 | 353 | 104 | 29.46 | 42(40.38) | 10(9.62) | 52(50.00) |
| 3 | 384 | 133 | 34.64 | 22(16.54) | 9(6.77) | 102(76.69) |
| 4 | 141 | 18 | 12.77 | 0(0.00) | 8(44.44) | 10(55.56) |
| 5 | 122 | 4 | 3.28 | 1(25.00) | 0(0.00) | 3(75.00) |
| 6 | 115 | 2 | 1.74 | 0(0.00) | 0(0.00) | 2(100.00) |
| 7 | 85 | 0 | 0.00 | 0(0.00) | 0(0.00) | 0(0.00) |
| 8 | 95 | 1 | 1.05 | 0(0.00) | 1(100.00) | 0(0.00) |
| 9 | 284 | 36 | 12.68 | 33(91.67) | 3(8.33) | 0(0.00) |
| 10 | 381 | 93 | 24.41 | 71(76.34) | 9(9.68) | 13(13.98) |
| 11 | 446 | 65 | 14.57 | 19(29.23) | 43(66.15) | 3(4.62) |
| 12 | 433 | 116 | 26.79 | 28(24.14) | 83(71.55) | 5(4.31) |
| 合计 | 3332 | 718 | 21.54 | 277(38.58) | 224(31.20) | 217(30.22) |
| 注：括号外数据为例数，括号内数据为构成比。 | ||||||
酒泉市CDC流感网络实验室从2010年开始对流感病毒进行分离，用MDCK细胞分离流感病毒核酸阳性标本240份，分离到流感病毒105株，分离率为43.75%，其中甲型H1N1 69株，甲型H3N2 14株，乙型B/Victoria 10株和乙型B/Yamagata 12株。见表 4。
| 年份 | 检测数 | 病毒数 | 分离率(%) | 甲型H1N1 | H3N2 | 乙型 | |
| Victoria | Yamagata | ||||||
| 2009 | 12 | 8 | 66.67 | 8 | 0 | 0 | 0 |
| 2010 | 82 | 2 | 2.44 | 0 | 2 | 0 | 0 |
| 2011 | 2 | 2 | 100.00 | 0 | 0 | 2 | 0 |
| 2012 | 20 | 7 | 35.00 | 7 | 0 | 0 | 0 |
| 2013 | 70 | 33 | 47.14 | 21 | 1 | 0 | 11 |
| 2014 | 7 | 7 | 100.00 | 0 | 7 | 0 | 0 |
| 2015 | 47 | 46 | 97.87 | 33 | 4 | 8 | 1 |
| 合计 | 240 | 105 | 43.75 | 69 | 14 | 10 | 12 |
流感病毒是引起急性呼吸道传染病的病原体之一，具有高度传染性，可在人群中引起流行，对人类危害严重，在人类历史上曾发生多次大流行。流感的传染源主要是流感患者和隐性感染者，且其感染后免疫力维持时间不长，病毒易变异，重复感染给人群造成的健康控制成本较大。准确及时监测当地流感型别变异，对于流感的防控工作十分重要。PCR技术能快速、敏感地直接检测临床样本，是实验室确认病原体的首选方法。病毒的变异变迁等深入研究还需要通过分离培养。为掌握流感病毒的分子特性，及时发现新变异株与疫苗株的序列差别，要加强流感病毒的分离培养工作。
2009-2015年甘肃省酒泉市流感病毒核酸检测阳性率21.54%，5～岁年龄组儿童感染率最高，每年度均出现一个流行高峰，流感病毒在不同时间呈现型别优势且病毒型别有交替流行的规律，可能与感染流感后人体抗体维持时间短，流感病毒易发生变异等因素有关。与甘肃全省、张掖市和白银市的检出率一致[4-6]，高于陕西省西安市(12.55%)、青海省(8.27%)、北京市西城区和浙江省温州市等地[7-11]，低于上海市黄浦区同期的阳性率30.69%[12]。
酒泉市自2009年加入国家流感监测网络实验室以来，一直对流感监测工作比较重视，实验室检测能力不断提高，流感预防控制取得了一定成效，但哨点医院ILI报告质量，标本采集的连续性、均衡性，成年人标本的采集数量等有待于进一步提高。酒泉市CDC还需加强ILI暴发疫情的报告和监测，提高流感病毒分离培养及病原深入研究的能力，加强高危人群流感疫苗的预防接种，建立本市的流感监测体系，对酒泉市的流感/禽流感预防控制工作具有重要意义。
作者贡献:向国锋：论文的主要完成人，撰写、实验室检测工作等于德山：课题规划，论文修改程俊文：病例标本资料收集李玉凤：实验室检测
| [1] | Tumpey TM, Basler CF, Aguilar PV, et al. Characterization of the reconstructed 1918 Spanish influenza pandemic virus[J]. Science , 2005, 310 (5745) : 77–80. DOI:10.1126/science.1119392 |
| [2] | Stöhr K. Influenza-WHO cares[J]. Lancet Infect Dis , 2002, 2 (9) : 517. DOI:10.1016/S1473-3099(02)00366-3 |
| [3] | Chinese Center for Disease Control and Prevertion. National influenza surveillance solutions[S]. 2010. (in Chinese) 中国疾病预防控制中心.全国流感监测方案(2010年版)[S]. 2010. |
| [4] | Yu DS, Li HY, Zhang H, et al. Surveillance analysis of influenza from 2009-2012 in Gansu province of China[J]. Chinese Journal of Viral Diseases , 2014, 4 (2) : 132–136. (in Chinese) 于德山, 李红育, 张慧, 等. 甘肃省2009-2012年流感病毒流行特征分析[J]. 中国病毒病杂志 , 2014, 4 (2) : 132–136. |
| [5] | Lu LP, Li JD, Chen LH, et al. Zhangye city, Gansu, 2009-2010 sentinel hospital surveillance of influenza-like illness[J]. Chinese Primary Health Care , 2011, 25 (9) : 25–27. (in Chinese) 卢莉萍, 李吉栋, 陈黎华, 等. 张掖市2009-2010年哨点医院流感样病例监测结果分析[J]. 中国初级卫生保健 , 2011, 25 (9) : 25–27. |
| [6] | Zeng TX, He T, Wang B, et al. Sentinel surveillance for influenza like illness in Baiyin, Gansu, 2010-2013[J]. Disease Surveillance , 2015, 30 (4) : 273–276. (in Chinese) 曾同霞, 何涛, 王犇, 等. 2010-2013年甘肃省白银市流感样病例监测哨点医院数据分析[J]. 疾病监测 , 2015, 30 (4) : 273–276. |
| [7] | Rao HX, Shi Y. Surveillance analysis of influenza-like illness during 2010-2012 in Qinghai province[J]. Journal of Medical Pest Control , 2014, 30 (9) : 945–947. (in Chinese) 饶华祥, 石燕. 青海省2010-2012年流感样病例监测分析[J]. 医学动物防制 , 2014, 30 (9) : 945–947. |
| [8] | Chen D, Sun BC, Yu CC, et al. Analysis of influenza monitoring results in Wenzhou from 2009 to 2014[J]. Chinese Journal of Health Laboratory Technology , 2016, 26 (4) : 565–567. (in Chinese) 陈栋, 孙宝昌, 虞成超, 等. 温州市2009-2014年流感监测结果分析[J]. 中国卫生检验杂志 , 2016, 26 (4) : 565–567. |
| [9] | Li Y, Wu R, Huang YJ, et al. Analysis of influenza virus surveillance results in Xi'an from 2010 to 2014[J]. Chinese Journal of Health Laboratory Technology , 2016, 26 (5) : 736–739. (in Chinese) 李焱, 吴瑞, 黄银娟, 等. 西安市2010-2014年流感监测结果分析[J]. 中国卫生检验杂志 , 2016, 26 (5) : 736–739. |
| [10] | Sun XY, Chu YH, Ren J, et al. Influenza surveillance in Xi'cheng district, Beijing (2010-2014)[J]. Journal of Public Health and Preventive Medicine , 2015, 26 (2) : 16–19. (in Chinese) 孙小宇, 初艳慧, 任剑, 等. 北京市西城区2010-2014年流感监测结果分析[J]. 公共卫生与预防医学 , 2015, 26 (2) : 16–19. |
| [11] | Li Y, Han GY, Liu YF, et al. Analysis of the results of influenza virus surveillance in Hebei province from 2009 to 2015[J]. Journal of Pathogen Biology , 2015, 10 (8) : 734–737. (in Chinese) 李岩, 韩光跃, 刘艳芳, 等. 2009-2015年河北省流感病原学监测结果分析[J]. 中国病原生物学杂志 , 2015, 10 (8) : 734–737. |
| [12] | Wang Y, Song LL, Shen FJ, et al. Analysis of influenza surveillance from 2009 to 2014 in Huangpu district Shanghai city[J]. Modern Preventive Medicine , 2015, 42 (24) : 4494–4496. (in Chinese) 王宇, 宋黎黎, 沈福杰, 等. 2009-2014年上海市黄浦区流感监测分析[J]. 现代预防医学 , 2015, 42 (24) : 4494–4496. |