基于腹泻多病原监测研究副溶血性弧菌的感染状况和疾病负担

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徐秋芳, 施怡茹, 卢晓芸, 马英, 姚正原, 张相猛, 高红梅, 黎桂福, 陈洪友, 许学斌

XU Qiu-fang, SHI Yi-ru, LU Xiao-yun, MA Ying, YAO Zheng-yuan, ZHANG Xiang-meng, GAO Hong-mei, LI Gui-fu, CHEN Hong-you, XU Xue-bin

基于腹泻多病原监测研究副溶血性弧菌的感染状况和疾病负担

Study on infection status of Vibrio parahaemolyticus and related disease burden based on multi-pathogen surveillance for diarrhea

疾病监测, 2017, 32(10/11): 814-817

Disease Surveillance, 2017, 32(10/11): 814-817

10.3784/j.issn.1003-9961.2017.10/11.008

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收稿日期：2017-05-09

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徐秋芳, 施怡茹, 卢晓芸, 马英, 姚正原, 张相猛, 高红梅, 黎桂福, 陈洪友, 许学斌. 基于腹泻多病原监测研究副溶血性弧菌的感染状况和疾病负担[J]. 疾病监测, 2017, 32(10/11): 814-817. 复制到剪切板

XU Qiu-fang, SHI Yi-ru, LU Xiao-yun, MA Ying, YAO Zheng-yuan, ZHANG Xiang-meng, GAO Hong-mei, LI Gui-fu, CHEN Hong-you, XU Xue-bin. Study on infection status of Vibrio parahaemolyticus and related disease burden based on multi-pathogen surveillance for diarrhea[J]. Disease Surveillance, 2017, 32(10/11): 814-817. 复制到剪切板

基于腹泻多病原监测研究副溶血性弧菌的感染状况和疾病负担

徐秋芳¹, 施怡茹¹, 卢晓芸¹, 马英¹, 姚正原¹, 张相猛¹, 高红梅¹, 黎桂福¹, 陈洪友², 许学斌²

1. 上海市青浦区疾病预防控制中心, 上海 201700;
2. 上海市疾病预防控制中心, 上海 200336

收稿日期：2017-05-09

基金项目：青浦区卫计委项目（No.W2015-18）；青浦区优秀人才培养计划附带课题

作者简介：徐秋芳, 女, 江西省靖安县人, 硕士, 主管技师, 主要从事病原生物检测工作.

通信作者：徐秋芳, Tel:021-33860583, Email:39850233@qq.com.

摘要：目的了解上海市青浦区副溶血性弧菌腹泻病感染状况和疾病负担。方法 2015年1月至2016年12月，选择上海市青浦区某三级医院所有初诊疑似细菌性腹泻病例为研究对象，采集粪便标本进行肠道多病原分离，对实验室诊断为副溶血性弧菌的食源性腹泻病例通过入户调查方式了解其医疗费用。结果 6 129例腹泻患者中，确诊为细菌性腹泻患者1 092例（17.82%，1 092/6 129），其中646例检出副溶血性弧菌，分离率为10.54%，578例为单一感染（9.43%），68例为混合感染（1.10%）；95.50%的副溶血性弧菌菌株携有直接溶血素基因（tdh）；流行峰值7-8月，病例以40~60岁年龄组和农民较常见；混合感染以感染副溶血性弧菌和沙门菌最常见，与单一感染相比，发热率差异有统计学意义（χ²=8.003，P < 0.05）。副溶血性弧菌阳性病例直接医疗费用为（338.75±191.45）元，直接非医疗费用（59.83±74.94）元；农村患者的直接医疗费用和间接非医疗费用均高于城市（P < 0.05）；治疗中抗生素使用比率较高，且使用抗生素的直接医疗费用高于不使用抗生素组（t=2.531，P < 0.05）。结论副溶血性弧菌腹泻病例症状较轻，发病率较高，存在一定混合感染；农民的疾病负担较重。应强化重点人群卫生知识宣传，提倡就近治疗和优化诊疗方式，以降低经济负担。

关键词：副溶血性弧菌腹泻感染状况疾病负担

Study on infection status of Vibrio parahaemolyticus and related disease burden based on multi-pathogen surveillance for diarrhea

XU Qiu-fang¹, SHI Yi-ru¹, LU Xiao-yun¹, MA Ying¹, YAO Zheng-yuan¹, ZHANG Xiang-meng¹, GAO Hong-mei¹, LI Gui-fu¹, CHEN Hong-you², XU Xue-bin²

1. Qingpu District Center for Disease Control and Prevention, Shanghai 201700, China;
2. Shanghai Municipal Center for Disease Control and Prevention, Shanghai 200336, China

This study were supported by the fund for Scientific Research Program of Qingpu District Health and Family Planning Commission (No.W2015-18) and the fund for Talent Cultivation Plan Attached Project

Corresponding author: XU Qiu-fang, Email:39850233@qq.com.

Abstract: Objective To understand the infection status of Vibrio parahaemolyticus and related disease burden in Qingpu district of Shanghai. Methods From January 2015 to December 2016, all the cases of suspected bacterial diarrhea at the first visit in a class Ⅲ hospital of Qingpu were selected as study subjects and their stool samples were collected for intestinal multiple-pathogen separation. For the patients diagnosed with foodborne diarrhea caused by V. parahaemolyticus, household surveys were made to understand their medical costs. Results Among the 6 129 cases of diarrhea, 1 092 (17.82%) were diagnosed with bacterial diarrhea, and V. parahaemolyticus was detected from 646 cases (10.54%). Of these 646 cases, 578 were single infections (9.43%) and 68 were mixed infections (1.10%). Thermostable direct hemolysin gene (tdh) was found to be carried by 95.5% of the V. parahaemolyticus strains. The peak of the diarrhea was from July to August, and the cases mainly occurred in those aged 40-60 years and farmers. Mixed infection was commonly caused by V. parahaemolyticus and salmonella, and its fever rate showed statistical significance compared with single infection (χ²=8.003, P < 0.05). The direct medical expenditure of V. parahaemolyticus infection cases was (338.75 ±191.45) yuan (RMB), the direct non-medical expenditure was (59.83 ±74.94) yuan (RMB). Both the direct and indirect expenditures were higher in rural area than in urban area (P < 0.05). Antibiotics were widely used in the treatment, and the medical expenditure in group using antibiotics was higher than that in group using no antibiotics (t=2.531, P < 0.05). Conclusion The research showed that V. parahaemolyticus diarrhea has mild symptom but high incidence, and there were some cases of mixed infection. Compared with urban citizens, farmers suffered heavier disease burden. It is therefore suggested to enhance healthcare education, and promote nearby and optimized medical treatment to reduce the medical expenditures.

Key words: Vibrio parahaemolyticus Diarrhea Infection status Disease burden

2016年，我国报告感染性腹泻发病人数为101.86万，发病率为74/10万^[1]。与食源性相关的细菌性感染性腹泻仍是全球性公共卫生需要关注的重要问题之一，而其中的副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus，VP)具有长期在沿海地区引发季节性流行的特征，多数病例有食源性暴露史，为上海市首位腹泻病原菌^[2-3]。为精确掌握VP在腹泻病原谱中的构成、感染状况和患病人群的疾病负担，笔者基于区域性腹泻多病原主动监测的横断面数据开展VP病例的疾病负担研究，为沿海地区的腹泻病防控策略提供参考数据。

1 材料与方法 1.1 病例定义

2015年1月至2016年12月，上海市青浦区某三级医院初诊且符合疑似细菌性腹泻(病例定义：以腹泻症状为主，腹泻次数>3次/d，粪便性状异常：水样便、稀便、黏液便或脓血便等)病例为研究对象。

1.2 培养基和试剂

磺胺增菌液(SBG)、沙门菌显色平板、XLD平板、弧菌显色平板、麦康凯平板、弯曲菌平板(CCD)和肠道生化鉴定试剂购自上海科玛嘉微生物技术有限公司；5种致泻性大肠埃希菌核酸检测试剂盒购自上海之江生物科技股份有限公司。

1.3 方法 1.3.1 腹泻多病原检测方法

收集入选病例的病史信息后采集病例粪便或肛拭标本，按照《上海市腹泻病监测实施方案(2014年试行版)》实验室检验部分进行霍乱弧菌、副溶血性弧菌、沙门菌、志贺菌、5种致泻性大肠埃希菌(EPEC、STEC/EHEC、EIEC、ETEC、EAEC)、弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌等7类肠道病原菌进行常规分离、初筛和鉴定，所有分离株均由上海市公共卫生肠道病原菌参比实验室复核鉴定。

1.3.2 VP毒素检测和就诊病例调查

VP直接溶血素基因(tdh)和间接溶血素基因(trh)检测引物按照文献[4]合成。tdh和trh基因阳性参考菌株来自上海市疾病预防控制中心(CDC)菌毒种室。采用统一问卷调查表，由经过统一培训的调查员对2015年所有的食源性VP病例(115例)进行入户调查，询问病例的直接医疗费用和直接非医疗费用。2015年青浦区城市和农村平均经济收入来自《青浦区统计年鉴2016》。

1.4 统计学分析

数据录入采用EpiData 3.01软件，统计分析应用SPSS 19.0软件。不同人群疾病负担资料符合正态分布，用均值±标准差(x±s)表示；对不同人群的VP检出率和毒力基因携带情况组间比较采用χ²检验；直接医疗费用和直接非医疗费用间的比较采用t检验。P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果 2.1 总体情况

2015年和2016年共收到某三级医院腹泻病采样标本6 129份，检出阳性病例数为1 092例，阳性率为17.82%，2015年和2016年阳性率分别15.56%和19.99%，其差异有统计学意义(χ²=20.632，P < 0.05)；646例分离出VP，分离率达10.54%，其中578例9.43%(578/6 129)为单一感染病例，68例1.10%(68/6 129)为混合感染病例，以VP和沙门菌混合感染最为常见，占76.47%(52/68)，其次是VP和致泻性大肠埃希菌，占19.12%(13/68)，见表 1。全年中四个季度间VP检出率差异有统计学意义(χ²=43.181，P < 0.05)，冬春季VP检出率低，夏秋季检出率高，5-10月为检出高峰期，见图 1。

表 1 2015-2016年上海市青浦区副溶血性弧菌腹泻病例的时间分布 Table 1 Time distribution of V. parahaemolyticus caused diarrhea cases in Qingpu, 2015-2016

季度	腹泻患者数	副溶血性弧菌		χ²值	P值
季度	腹泻患者数	阳性数	检出率 (%)	χ²值	P值
第一季度	456	7	1.54	43.181	< 0.05
第二季度	1 379	142	10.30
第三季度	3 302	354	10.72
第四季度	992	55	5.54

表选项

图 1 2015年和2016年1-12月上海市青浦区腹泻病例中副溶血性弧菌检出情况 Figure 1 Monthly detection rate of V. parahaemolyticus in diarrhea cases in Qingpu, 2015-2016

图选项

2.2 VP腹泻病例的流行病学特征

646例VP病例中，男女性别比为0.87 : 1；男性腹泻病例VP检出率为10.24%(301/2 939)，女性检出率为10.82% (345/3 190)，其差异无统计学意义(χ²=0.543，P>0.05)；阳性病例集中在40~60岁年龄组(13.30%，213/1 602)，其次是20~40岁年龄组(10.10%，331/3 277)；发病人群以工人居多，(59.00%，385/646)，但是农民检出率最高19.47%(44/226)；腹泻病例在就诊前服用抗生素人群的VP检出率(6.96%)，低于未服用抗生素人群(10.75%)，差异均有统计学意义(χ²=4.979，P < 0.05)。VP阳性病例中，本区常住、本区外来和流动人口VP检出率基本持平，分别为10.50%、11.03%和5.88%，其差异无统计学意义(χ²=1.412，P>0.05)。

2.3 VP腹泻患者的临床特征

92.41%(597/646)的病例首发症状为腹泻，96.59%(624/646)的病例为水样便，只有2例病例出现脓血便；腹泻频次1~20次/d，中位数为6次；8.00%的病例伴随腹痛症状，7.60%的病例有发热情况，平均体温为38.3 ℃。混合感染VP组发热率较单一感染组高，分别为16.10%和6.60%，差异有统计学意义(χ²=8.003，P < 0.05)。646例检出VP的腹泻病例，89.78%的病例治疗中使用抗生素，其中69.34%的病例采用输液治疗，24.14%的病例采用口服用药治疗，5.42%的病例采用输液和口服联合用药。

2.4 VP毒力基因携带情况

对2015年VP菌株(286株)进行毒力基因tdh和trh检测，见表 2。毒力基因携带情况各组间差异有统计学意义(P < 0.05)；通过比较各临床症状与毒力基因携带的关系，腹泻频率tdh⁺组(6次)高于tdh^-组(4次)，差异有统计学意义(t=-2.576，P < 0.05)。其余临床症状(发热、腹泻、粪便性状等)未发现明显差异。

表 2 286株副溶血性弧菌毒力基因携带情况 Table 2 Carriages of tdh and trh genes of 286 V. parahaemolyticus strains

分组	菌株数	构成比(%)	χ²值	P值
tdh+trh-	273	95.45	23.367	< 0.05
tdh-trh+	2	0.70
tdh+trh+	2	0.70
tdh-trh-	9	3.15

表选项

2.5 VP腹泻病例的疾病负担

对115例食源性副溶血性弧菌腹泻病例进行上门调查，采用《副溶血性弧菌病例对照调查表》，医疗费用主要包括直接医疗费用(含门诊诊疗费、检查费和医药费)，直接非医疗费用(含交通费和食宿费)，直接医疗费用为(338.75±191.45)元，直接非医疗费用为(59.83±74.94)元。医疗费用与性别和年龄组无明显差别，直接医疗费用农村高于城市，使用抗生素组高于不使用抗生素组，直接非医疗费用农村高于城市，农民高于其他组，其差异均有统计学意义，见表 3。

表 3 115例副溶血性弧菌腹泻病例的医疗费用情况 Table 3 Medical expenditures of 115 V. parahaemolyticus caused diarrhea cases

分组	例数	构成比 (%)	直接医疗费用 (元，x±s)	t值	P值	直接非医疗费用 (元，x±s)	t值	P值
户口性质				2.694	< 0.05		3.990	< 0.05
农村	74	64.34	373.61±221.45			71.91±81.10
城市	41	35.66	275.83±93.02			18.89±16.91
性别				0.869	>0.05		0.780	>0.05
男	40	34.78	317.49±109.76			52.35±55.89
女	75	65.22	350.09±223.02			63.81±83.42
使用抗生素				2.531	< 0.05		1.858	>0.05
是	93	80.87	360.23±201.19			66.08±81.21
否	22	19.13	247.96±104.67			33.41±26.25
年龄组(岁)				0.859	>0.05		0.958	>0.05
< 20	8	6.96	439.06±380.87			29.38±35.29
20~	41	35.65	320.11±139.45			71.46±74.15
40~	46	40.00	338.08±140.53			60.24±83.22
60~	20	17.39	338.39±271.59			47.20±66.59
职业				0.284	>0.05		3.814	< 0.05
工人	52	45.21	334.50±203.59			32.63±35.07
农民	5	4.34	402.00±168.29			116.80±134.27
学生	9	7.83	363.94±203.10			56.67±59.79
干部职员	9	7.83	306.79±46.83			113.33±96.17
离退人员	19	16.52	360.16±266.44			67.05±109.42
其他	21	18.27	317.76±116.62			85.48±67.82
合计	115	100.00	338.75±191.45			59.83±74.94

表选项

3 讨论

本研究选取青浦区某三级医院就诊的所有腹泻病例进行多病原监测，VP分离率达10.54%，占所有致病菌的62.78%，VP是青浦区成年人急性胃肠炎的首要细菌性病原。

毒力基因主要由VP临床分离株携带^[5-6]，环境分离株中携带少^[7]，tdh⁺株的腹泻频率较高。VP腹泻高发年龄主要集中在20~60岁年龄组，推测与青壮年饮食较丰富和平时较少使用抗生素有关，青浦区以工业为主，VP腹泻病例以工人居多，但农民的发病率最高，推测与农村卫生条件、经济收入和卫生意识较差有关，应加强卫生宣教工作。研究发现就诊前未服用抗生素病例检出率较高，提示在使用抗生素前采样有利于查明致病因素。

不同病原的混合感染可发生协同作用，引起腹泻病情的恶化^[8]。研究发现混合感染的发热率较单一感染高，提示发热存在混合感染的可能，且以VP和沙门菌的混合感染常见。

目前，国内关于单病种食源性疾病的负担研究较少，且主要侧重于食源性疾病的流行病学负担^[9-11]，本研究发现，VP腹泻病的主要疾病负担为直接医疗经济负担，农村直接医疗费用占农民人均年收入的1.15%(273.61/23 773)，城市直接医疗费用占城市人均年收入的0.68%(275.83/40 734元)^[12]，该疾病负担对农村居民更重，可能与城市参保比例和比重均较农村高，而农村医保在三级医院报销比重较低等有关。青浦区大部分腹泻病例选择某三级医院就诊，对于居住较远的居民，交通费用比重上升，造成间接医疗费用高于城市。因此对于农村居住地的居民，建议积极探索腹泻病等常见疾病的就近治疗，强化分级诊疗，能有效降低农村疾病负担。副溶血性弧菌性腹泻病大多数病例使用抗生素且以输液形式为主，也是造成直接医疗费用较高的原因，临床处理方式有待优化。

作者贡献:

徐秋芳 ORCID: 0000-0002-4294-6916

徐秋芳：负责论文撰写和数据分析

施怡茹、卢晓芸：负责实验室检测和数据分析

马英、姚正原：负责病例资料收集和数据录入

张相猛：负责数据录入

高红梅、黎桂福：负责协调工作

陈洪友：负责数据的质量控制工作

许学斌：负责论文撰写指导

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