2013年3月我国报告全球首例人感染H7N9禽流感病例^[1]。截至2017年11月30日，我国内地27个省份累计报告人感染H7N9禽流感病例1 534例，死亡608例，病死率39.63%。2017年甘肃省报告H7N9病例5例，死亡2例。对城乡活禽中禽流感病毒的实时监测可以掌握当地禽流感病毒的感染情况，对人感染禽流感病毒的防控具有重要公共卫生意义^[2]。通过对酒泉市2014-2017年活禽外环境标本进行监测，分析甘肃省首例人感染H7N9病例状况，为今后禽流感防控提供依据。

按照我国《职业暴露人群血清学和环境高致病性禽流感监测方案（2011版）》进行采集。疫情异常时扩大监测范围，增加监测频次。

在禽外环境中检测出H7N9阳性标本后，对乡镇卫生院和二级以上医院就诊疑似患者进行病例主动搜索，特别是有接触活禽史的患者采集咽拭子标本进行流感病毒核酸检测。

病毒RNA核酸抽提试剂盒为江苏硕世生物科技有限公司提供，流感病毒及分型核酸检测试剂盒（实时荧光PCR）由江苏硕世生物科技有限公司和北京卓诚惠生生物科技有限公司提供，均在有效期内。主要检测设备为Agilent实时荧光PCR仪（MX3000P）。

标本处理按照《人感染H7N9禽流感防控技术方案（第3版）》 ^[3]进行。病毒RNA提取严格按照试剂盒说明书操作。核酸扩增及检测严格按照试剂说明书操作。每批次试验带有阳性外部质控品。

采用SPSS 19.0软件进行统计学分析，计数资料采用χ²检验，P < 0.05为差异有统计学意义。

2014-2016年酒泉市共检测标本340份，禽流感病毒阳性率为25.29%，均为H9N2亚型，禽流感阳性率逐年上升，2017年禽流感病毒阳性率19.31%，较2015-2016年有下降，首次在甘肃省检出H7N9禽流感病毒。4年中禽流感阳性率差异有统计学意义（χ²=18.831，P < 0.001）。H9N2禽流感病毒为优势亚型，占禽流感阳性检出总数的70.13%，其次为H7N9；H7N9仅在2017年3-5月检出，未检出H5等亚型，见表 1。

2017年1-10月共检测送检标本751份，禽流感病毒核酸阳性率为19.31%，玉门市禽流感病毒阳性率最高（42.76%），肃北、阿克塞县未检出，在肃州区、玉门市、瓜州县送检标本中均检出H7N9病毒，其他4个市（县）未检出，见表 2。

城乡活禽市场、家禽规模养殖场和家禽屠宰加工场所禽流感病毒核酸阳性率分别为34.22%、11.79%、10.23%，差异有统计学意义（χ²=79.892，P < 0.001）。城乡活禽市场高于家禽规模养殖场和家禽屠宰加工场所，见表 3。

不同来源标本禽流感检出率以清洗禽类的污水最高，达37.63%，宰杀或摆放禽肉案板次之，禽类饮水最低，差异有统计学意义（χ²=40.013，P=0.001），见表 4。

甘肃省酒泉市疾病预防控制中心（CDC）2009年作为国家流感监测网络实验室开始流感病毒的监测工作，2014年开始对辖区内各市（县、区）外环境禽流感标本进行检测，2017年3月31日酒泉市CDC在环境禽流感日常检测中从肃州区某活禽宰杀销售店采集的20份样品中检出6份H7N9核酸阳性标本，通过对酒泉市辖区内强化流感样病例和不明原因肺炎进行监测，4月3日检测出首例人感染H7N9病例（高某，82岁，居住地相邻于该活禽宰杀销售店，3月29日出现高热、咳嗽等症状，在某私人门诊治疗，发病前每天到该活鸡店门前活动）。4月3日至5月酒泉市各市（县、区）对所有活禽摊点进行环境标本采集检测，先后从瓜州县、玉门市活禽市场标本中检出H7N9病毒核酸阳性标本（表 2）；4月22日酒泉市瓜州县检出第2例人感染H7N9病例，5月4日在酒泉市玉门市检出第3例人感染H7N9病例。3例H7N9病例均有在活禽市场暴露史。同期甘肃省政府在其他地市也开展外环境强化监测，在邻近酒泉市肃州区的张掖市甘州区、山丹县、高台县外环境中检出H7N9流感病毒，并在甘州区和山丹县各确诊1例人感染H7N9病例。截至2017年12月31日，甘肃省共报告H7N9病例5例，死亡2例，男性3例，死亡2例，女性2例，分布在酒泉市肃州区、瓜州县、玉门市，张掖市甘州区、山丹县，见表 5。

外环境禽流感监测对人感染禽流感（H7N9、H5Nx）防控的预警效果显著。酒泉市按照甘肃省2014年下发的H7N9疫情防控工作要求，每月在外环境采集标本10~20份进行禽流感病毒核酸检测，2017年3月的日常检测中，从一家活鸡店采集标本中检出H7N9禽流感病毒并及时报告，酒泉市政府启动应急预案，在全市范围内关闭活禽市场及活禽交易活动；在发生H7N9流感疫情的地区主要交通路口设置关卡，严格杜绝跨地区的活禽交易运输；卫生及农牧部门强化禽类外环境应急监测采样，扩大监测范围和批次；卫生系统加强医务人员针对H7N9禽流感防控与救治的培训，各级医疗单位落实门诊发热病例预警分诊措施，强化流感样病例和不明原因肺炎的筛查。后期落实“一日一清洗、一周一大扫除、一月一休市”、活禽不过夜和集中屠宰、新鲜冰冻上市等措施，有效地减少了禽流感病毒扩散^[4]。由于以上各项措施的落实，甘肃省扩大监测后在有涉禽外环境H7N9病毒污染的地区中发现并确认了人感染H7N9病例，发现和早诊断的病例及时得到救治并痊愈，而发病到确诊时间长，未及时确诊、有基础疾病的2例病例死亡。

监测结果显示，甘肃省酒泉市2014-2017年每年均检出禽流感H9亚型，与新疆、广西和宁夏等地一致^[5-7]，监测场所中城乡活禽市场检出率最高，不同类型外环境均检出阳性标本，其中清洗禽类的污水检出率最高，与文献[8-12]报道一致。

在流感、禽流感流行季节强化不明原因肺炎病例病原体筛查，对人感染H7N9疫情防控具有重要现实意义。人感染H7N9流感病毒初期症状与普通季节性流感相似，临床医师不易鉴别，故实验室检测结果对患者及时确诊与早期使用抗病毒治疗具有重要指导意义，加强各市（州）CDC实验室能力建设，在具备条件的市级医院等开展流感病毒等核酸检测，对传染病早发现、早诊断、早治疗有重要作用。

甘肃省外环境中H7N9禽流感污染程度较我国长三角洲地区和珠三角洲地区低。2017年4月前甘肃省外环境禽流感监测中未检出H7N9，仅2017年4-5月从酒泉市、张掖市和临夏州共7个县（区）的活禽市场监测到H7N9禽流感病毒，2017年6-12月甘肃省外环境监测中未检出H7N9病毒核酸阳性标本。本研究有一定局限性，调查禽类来源的资料有限，特别是本地禽大多数通过多次批发，存在批发鸡与家庭养殖混合养殖现象，传染源是否为活禽跨地区运输或候鸟的迁徙，尚无明确证据。

作者贡献:

向国锋  ORCID：0000-0001-8290-4190

向国锋：论文的主要完成人，撰写、实验室检测等

于德山：课题规划，论文的修改

李国强、甘志强：流行病学调查

李玉凤：实验室检测

赵桂良：病例信息资料收集

聂振元：课题指导