疾病监测  2015, Vol. 30 Issue (9): 776-779

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张建群, 罗学辉, 黄绍军
ZHANG Jian-qun, LUO Xue-hui, HUANG Shao-jun
浙江省余姚市腹泻儿童沙门菌感染流行病学特征和耐药分析
Epidemiological characteristics and drug resistance of Salmonella infection in children with diarrhea in Yuyao, Zhejiang
疾病监测, 2015, 30(9): 776-779
Disease Surveillance, 2015, 30(9): 776-779
10.3784/j.issn.1003-9961.2015.09.018

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收稿日期:2015-03-04
浙江省余姚市腹泻儿童沙门菌感染流行病学特征和耐药分析
张建群, 罗学辉 , 黄绍军    
余姚市疾病预防控制中心, 浙江 余姚 315400
摘要目的 了解浙江省余姚市引起儿童感染性腹泻的沙门菌流行病学特征和耐药情况,为沙门菌引起的儿童感染性腹泻的临床用药以及肠道传染病防控提供依据。 方法 采集余姚市食源性疾病监测哨点医院感染性腹泻患儿粪便标本,进行沙门菌分离、生化鉴定及血清学分型,同时采用K-B法进行药敏试验。 结果 223份腹泻患儿粪便中检出沙门菌26株,检出率为11.65%。分为13种血清型,优势菌为鼠伤寒沙门菌(42.31%),其次是德尔卑沙门菌和斯坦利沙门菌(7.69%)。26株沙门菌株中男、女检出比为1:1.17,0~1岁占50%,1~2岁占38.40%,发病高峰5-10月。对头孢类、喹诺酮类、β-内酰胺类、氨基糖苷类敏感率较高。对青霉素、氨苄西林、复方新诺明、哌拉西林耐药率 分别为26.92%、26.92%、19.23%、15.39%。检测发现有9株耐药菌,多重耐药菌7 株,其中1株鼠伤寒沙门菌耐13 种抗生素。 结论 余姚市腹泻患儿沙门菌感染以0~2岁为主,女童较多见,发病高峰5-10月。儿童沙门菌感染的优势血清型为鼠伤寒沙门菌。多重耐药的检出可以指导临床合理选择及使用抗生素。
关键词儿童    沙门菌    血清分型    耐药性    
Epidemiological characteristics and drug resistance of Salmonella infection in children with diarrhea in Yuyao, Zhejiang
ZHANG Jian-qun, LUO Xue-hui , HUANG Shao-jun    
Yuyao County Center for Disease Control and Prevention, Yuyao 315400, Zhejiang, China
Abstract:Objective To understand the epidemiological characteristics and drug resistance of Salmonella caused infectious diarrhea in children in Yuyao, Zhejiang province, and provide evidence for the clinical medication of Salmonella caused infectious diarrhea in children and the prevention and control of intestinal infectious diseases. Methods Stool samples were collected from children with diarrhea in foodborne disease sentinel hospital in Yuyao. The biochemical identification and serological typing of the isolates were conducted, and the drug susceptibility test was performed with K-B methods. Results A total of 26 Salmonella strains of were detected from 223 stool samples (11.65%), which belonged to 13 serotypes, Salmonella typhimurium was predominant (42.31%), followed by Salmonella derby and Salmonella stanley (7.69%). More Salmonella typhimurium strains were detected in females, the male to female ratio was 1:1.17. The infections in age groups 0-1 year and 1-2 years accounted for 50% and 38.40%, respectively. The incidence peak was during May-October. The sensitive rates to cephalosporins, quinolones, beta lactams, aminoglycosides were high. The resistant rates to penicillin, ampicillin, cotrimoxazole, piperacillin were 26.92%, 26.92%, 19.23%, 15.39% respectively. It was found that 9 strains were drug resistant, 7 strains were multi drug resistant, in which 1 Salmonella typhimurium strain was resistant to 13 antibiotics. Conclusion Salmonella infection mainly affect age group 0-2 years and more females were infected in Yuyao. The incidence peak usually occurs during May-October. Salmonella typhimurium is the predominant pathogen. Multi drug resistance detection can guide the rational use of antibiotics.
Key words: Children    Salmonella    Serotype    Antibiotic resistance    

感染性腹泻是儿科常见病,其中沙门菌属细菌是引起感染性腹泻的重要病原体。近年来,由于抗菌药物的广泛应用,引起沙门菌的变异,耐药情况日趋严重[1]。为了解浙江省余姚市感染性腹泻儿童中沙门菌的流行病学特征和耐药情况,对2014年5-12月期间收集的233份感染性腹泻儿童粪便样本进行了沙门菌检测与分析,现报告如下。

1 材料与方法 1.1 标本来源

2014年5-12月余姚市食源性疾病监测哨点医院临床诊断为感染性腹泻的18岁以下患者的粪便或肛拭标本,保存于Cary-Blair运送培养基送检。

1.2 培养基、试剂及仪器

SBG增菌液、SS分离培养基、三糖铁琼脂、M-H琼脂为青岛海博生物技术有限公司产品。科玛嘉沙门菌显色培养基为郑州博赛生物技术有限公司产品。沙门菌诊断血清由宁波天润生物药业有限公司和丹麦生产。20种抗生素药敏纸片为英国OXOID公司产品。ID32E和ATB细菌鉴定仪由法国生物梅里埃公司生产。

1.3 方法 1.3.1 增菌及分离样品

直接分离SS平板和科玛嘉沙门菌显色培养基,36 ℃培养24 h;同时将样品置于SBG增菌液增菌,36 ℃培养18 h后再用上述平板分离。

1.3.2 鉴定

从SS平板和科玛嘉沙门菌显色平板挑取可疑菌落接种于三糖铁琼脂,36 ℃培养24 h,结果为K/A,产气±,H2S±的菌株以ATB细菌鉴定仪用ID32E生化条做系统生化鉴定,符合沙门菌生化的菌株再用血清学试验确定沙门菌血清型,以宁波天润沙门菌诊断血清做初筛,用丹麦沙门菌诊断血清做符合。

1.3.3 药敏试验

按纸片法抗菌药物敏感试验标准(WS/T 125-1999)进行,以标准菌株大肠埃希菌ATCC 25922作为质控菌株,选用7类共20种抗生素。

1.3.4 统计学分析

使用SPSS 15.0软件分析,χ2检验研究组间差异,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果 2.1 沙门菌检出情况

223份18岁以下感染性腹泻儿童粪便标本共检出沙门菌26株,检出率11.65%。根据检出情况分为4个年龄组进行分析比较,见表1。4个年龄组检出率差异有统计学意义(χ2=8.50,P=0.037),但是前3个年龄组的检出率差异无统计学意义(χ2=3.46,P=0.177)。

表1 不同年龄组儿童沙门菌检出情况 Table 1 Detection of Salmonella in children in different age groups
年龄样品数检出数检出率(%)
0~661319.70
1~1031010.00
2~24312.50
3~183000.00
合计2232611.65
2.2 26 例沙门菌腹泻患儿流行特征

阳性分离样品患儿的发病年龄段为0~3 岁,发病年龄最小5月 [LL]龄,最大33 月龄。男、女患儿比为1[DK(]∶[DK)]1.17(12/14),其中,<1 岁的婴儿组13 例(占50%),1~2 岁的幼儿组10 例(占38.4%),总计<2 岁的婴幼儿组共23 例(占88.4%),见表1。多发于5-10月,6月、8月、10 月为发病高峰。

2.3 血清群及型分布

26株沙门菌分为5个血清群,13个血清型,以B群居多,占69.23%。优势血清型主要包括鼠伤寒沙门菌血清11株(42.31%),德尔卑沙门菌和斯坦利沙门菌,各2株(7.69%)。其他血清型比较分散,见表2

表2 26株沙门菌血清分型情况 Table 2 Serotypes of 26 strains of Salmonella
血清群血清型菌株数构成比
(%)
沙门菌B群(O4)鼠伤寒S. typhimurium1142.31
沙门菌B群(O4)德尔卑S.derby27.69
沙门菌B群(O4)斯坦利S.stanley27.69
沙门菌C1群(O7)维尔肖S.uirchow13.85
沙门菌B群(O4)乙型副伤寒S.paratyphi B13.85
沙门菌D群(O9)肠炎S.entertidis13.85
沙门菌C2群(O8)纽波特S. newport13.85
沙门E1群(O10)吉韦S. give13.85
沙门E1群(O10)伦敦S. london13.85
沙门B群(O4)布达佩斯S. budapest13.85
沙门B群(O4)卢博莫S. loubomo13.85
沙门其他群(O22)浦那S. poona13.85
沙门菌D群(O9)巴拿马S.panama13.85
沙门C群(O20)未分型13.85
  合计26100.00
2.4 药敏试验及耐药情况

26株沙门菌对7类共20种抗生素的药敏试验发现,对头孢类、喹诺酮类、氨基糖苷类、β-内酰胺类、碳青霉烯类敏感率较高,对青霉素类和叶酸代谢抑制剂类耐药率较高。其中对亚胺培南敏感率为100%,见表3

26株沙门菌中耐药株9株,占34.62%,其中单耐药2 株(7.69%),多重耐药7株(26.92%)。耐2~4种药物5株,占多重耐药的66.67%;耐10 种以上药物2株,占多重耐药的27.78%。2 株单耐药菌株仅对复方新诺明耐药,多重耐药菌株中1株耐13种药物的为鼠伤寒沙门菌,另1株耐16种药物的为未分型。多重耐药主要集中在青霉素、氨苄西林、哌拉西林、复方新诺明等抗生素药物。

表3 26株沙门菌对20种抗生素药物敏感试验结果 Table 3 Results of drug susceptibility test of 26 Salmonella strains to 20 antibiotics
抗生素耐药 中度敏感 敏感
株数耐药率
(%)
株数中敏率
(%)
株数敏感率
(%)
青霉素
 青霉素726.9200.001973.08
 氨苄西林726.9200.001973.08
 哌拉西林415.3927.692076.92
头孢类
 头孢唑林27.6900.002492.31
 头孢西丁13.8527.692388.46
 头孢他定13.8500.002596.15
 头孢呋辛27.691142.311350.00
 头孢哌酮27.6900.002492.31
 头孢噻肟27.6900.002492.31
 头孢曲松27.6900.002492.31
氨基糖苷类
 庆大霉素13.8413.842492.31
 丁胺卡那27.6900.002492.31
 妥布霉素415.3900.002284.61
 奈替米星13.8500.002596.15
喹诺酮类
 诺氟沙星27.6900.002492.31
 氧氟沙星27.6900.002492.31
 环丙沙星27.6900.002492.31
叶酸代谢抑制剂
 复方新诺明519.2300.002180.77
β-内酰胺类
 阿莫西林棒酸00.00311.542388.46
碳青霉烯类
 亚胺培南00.0000.0026100.00
3 讨论

2014年余姚市共检测223份感染性腹泻儿童的粪便标本,检出沙门菌26株,检出率为11.65%,高于中山市区的检出率[2],略低于2010年上海的检出率[3]。余姚市2014年儿童沙门菌感染存在多态性,检出并明确了13种血清型,比该市2007-2009年成人沙门菌的血清型更多,更分散[4]。未检出伤寒沙门菌,检出了1株副伤寒沙门菌。检出的13种血清型中有7种是我国常见的感染血清型[5],有5种血清型在我国较为少见(布达佩斯沙门菌、浦那沙门菌、维尔肖沙门菌、巴拿马沙门菌、吉韦沙门菌),还有卢博莫沙门菌是我国沙门菌的新菌型[5]。根据血清学分型,优势血清型为鼠伤寒沙门菌11株(42.31%),德尔卑沙门菌和斯坦利沙门菌各2株(7.69%),显示本地区引起婴幼儿感染的沙门菌以鼠伤寒沙门菌为主,其次为德尔卑沙门菌和斯坦利沙门菌,与中山和上海地区有一定的差异[2, 3]。同时,2014年儿童沙门菌较高的检出率,血清型别的多态性,是否与2013年10月特大洪灾有关,有待进一步研究。

全球每年约有1600万例沙门菌感染病例,其中1/3以上的沙门菌感染病例发生在10岁以下儿童,而1岁以内儿童的感染概率比普通人群高10倍以上[6]。本次研究的所有菌株均分离自3 岁及以下婴幼儿,其中<1 岁组占50%,明显高于其他年龄组;2 岁以下婴幼儿占感染总人数的88.40%,与谭丽丽[7]报道相符。可能与婴幼儿肠道免疫功能尚未发育成熟、抵抗力差有关。男、女患儿比为1∶1.17(12/14),女童略多于男童。多发于5-10月,6月、8月、10 月为发病高峰。

药敏试验发现,26株沙门菌对青霉素、氨苄西林耐药率最高,均为26.92%,对复方新诺明、哌拉西林耐药率次之,分别为19.23%和15.39%。低于余姚市2007-2009年成人沙门菌耐药率[4],可能与婴幼儿使用抗生素较少有关。对头孢他定、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢曲松4种三代头孢抗菌药的敏感率很高,而且三代头孢抗菌活性强,不良反应较小,沙门菌感染可作为首选药物[8],但是三代头孢类药物的不规范和广泛应用,会引起产超广谱β内酰胺酶、Ampc酶等一系列多重耐药菌的产生,故应慎重选择,同时注意监测耐药菌株的出现[9]。对头孢呋辛、阿莫西林棒酸的中敏率分别为42.31%和11.54%,表明它们存在向耐药发展的潜在趋势。

在欧洲,40%的沙门菌分离株至少对1 种抗生素耐药,18%的分离株为多重耐药(muiti drug resistance,MDR)表型[10]。本研究显示,34.62%的沙门菌至少对1 种抗生素耐药,26.92%的分离株为多重耐药。沙门菌的耐药性主要由质粒介导,其多重耐药性的获得主要与质粒基因和染色体基因突变有关。多重耐药的水平转移通常是由质粒、转座子或整合子内的基因盒介导。多种耐药机制协同作用导致了高耐药和多重耐药鼠伤寒沙门菌(如DT104)的出现。具有多重耐药性的鼠伤寒沙门菌DT104 在全球范围内传播,导致了多重耐药的发生率近年来显著增长[11]。本次研究发现的1株耐13种抗生素的鼠伤寒沙门菌,它只对庆大霉素、奈替米星、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、阿莫西林棒酸、亚胺培南这7种药物敏感,提示余姚市沙门菌的多重耐药日趋严重。本次耐药性的研究对余姚市医疗机构治疗儿童沙门菌感染时选择敏感药物,避免抗菌药物的滥用和肠道传染病的防治提供了科学依据。建议做到腹泻患儿逢泻必检,依据病原学检测指导用药,以提高儿科患者临床治疗效果。今后需积极开展沙门菌耐药机制研究和流行病学调查,持续监测儿童沙门菌的耐药性变化。

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