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文章信息
- 王闻卿, 丁明, 苏靖华, 傅慧琴, 赵冰, 张勇琪, 黄红, 章红红, 朱林英, 朱渭萍, 傅益飞, 孙乔, 许学斌
- WANG Wen-qing, DING Ming, SU Jing-hua, FU Hui-qin, ZHAO Bing, ZHANG Yong-qi, HUANG Hong, ZHANG Hong-hong, ZHU Lin-ying, ZHU Wei-ping, FU Yi-fei, SUN Qiao, XU Xue-bin
- 上海市浦东新区腹泻病例中气单胞菌的流行和耐药特征研究
- Prevalence and antibiotic resistance of Aeromonasfrom diarrheal patients in Pudong New Area, Shanghai
- 疾病监测, 2016, 31(3): 225-228
- Disease Surveillance, 2016, 31(3): 225-228
- 10.3784/j.issn.1003-9961.2016.03.011
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文章历史
- 收稿日期: 2015-11-26
气单胞菌在自然界(尤其是淡、海水)广泛存在,是评价环境卫生学的重要指标菌[1]。已知的常见菌型有嗜水气单胞菌(嗜水)、维隆气单胞菌温和生物变种(温和)和豚鼠气单胞菌(豚鼠),可引发人体的肠道内感染(腹泻)或肠道外感染(伤口感染、败血症、蜂窝组织炎、腹膜炎)等,以不同年龄组的轻或中度腹泻最常见[1]。欧美等发达国家将气单胞菌列为潜在的健康危害风险因素[2]。近年有关产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)气单胞菌的报道再度引发对全球耐药菌防控问题的关注和讨论[1]。我国尚未将气单胞菌纳入国家肠道传染病的常规监测和传报体系,2014年,笔者利用上海市浦东新区开展的基于实验室诊断的腹泻病例多病原菌的监测项目平台,研究气单胞菌腹泻病例的流行和耐药特征,为科学防控本地区的食源性感染性腹泻提供循证依据。
1 材料与方法 1.1 样本来源将上海市浦东新区辖区内开设肠道门诊的11家医院作为监测点,对符合急性腹泻病例定义且自诉未服用抗生素的病例[3],在知情同意基础上采集粪便拭子置于运送管,当天送达浦东新区疾病预防控制中心的实验室检测。
1.2 病原菌气单胞菌、沙门菌、志贺菌、5种致泻性大肠埃希菌(EAEC、EPEC、ETEC、EIEC、STEC/EHEC)、小肠结肠炎耶尔森菌、弯曲菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、拟态弧菌、河弧菌、类志贺邻单胞菌。检测的材料方法见文献[3]。
1.3 药敏实验采用改良K-B法(纸片扩散法),测试气单胞菌对12种抗生素的耐药性,结果判定参照2010年版美国临床实验室标委会(CLSI)标准[4]。抗生素纸片:阿莫西林/克拉维酸(AMC)、头孢吡肟(FEP)、头孢噻肟(CTX)、头孢他啶(CAZ)、亚胺培南(IPM)、阿米卡星(AK)、庆大霉素(GN)、四环素(TE)、环丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LEV)、氯霉素(C)、复方新诺明(SXT)(Oxoid,英国)。
1.4 数据处理与分析使用Excel 2007软件进行数据处理,SPSS 16.0软件进行统计学分析,率的比较使用χ2检验和Fishers确切概率法,P <0.05判定为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 气单胞菌腹泻病例的流行特征经实验室对1846份腹泻样本进行多病原菌诊断,共甄别73例气单胞菌腹泻病例:单一型感染42例(57.6%),其中嗜水8例、温和26例、豚鼠8例;混合型感染31例(42.4%),总感染(阳性)率为4.0%。气单胞菌腹泻病例在四季皆有分布,以夏季峰值最高(9.0%)(P <0.05);男性和女性病例的阳性率差异无统计学意义(P>0.05);病例分布的年龄组最高依次为0~4(4.8%)、40~59(4.2%)、60~91(4.2%)和20~39岁(3.5%),见表 1。
流行特征 | 病例分布 (%) | 单一型气单胞菌病例 | 混合型气单胞菌病例 | ||||||||
合计(%) | 嗜水 | 温和 | 豚鼠 | 合计(%) | 嗜水 | 温和 | 豚鼠 | ||||
季节a (月) | 春(35) | 2.8(9/321) | 8(88.9) | 5 | 2 | 1 | 1(11.1) | 1 | 0 | 0 | |
夏(68) | 9.0(45/498) | 24(53.3) | 2 | 16 | 6 | 21(46.7) | 4 | 13 | 4 | ||
秋(911) | 2.6(16/615) | 7(43.8) | 1 | 5 | 1 | 9(56.2) | 4 | 5 | 0 | ||
冬(122) | 0.7(3/421) | 3(100.0) | 0 | 3 | 0 | 0(0) | 0 | 0 | 0 | ||
合计 | 73 | 42 | 8 | 26 | 8 | 31 | 9 | 18 | 4 | ||
性别b | 男 | 3.9(36/925) | 20(55.6) | 3 | 12 | 5 | 16(44.4) | 4 | 9 | 3 | |
女 | 4.0(37/921) | 22(59.5) | 5 | 14 | 3 | 15(40.5) | 5 | 9 | 1 | ||
合计 | 73 | 42 | 8 | 26 | 8 | 31 | 9 | 18 | 4 | ||
年龄组c (岁) | 0~ | 4.8(12/250) | 6(50.0) | 2 | 2 | 2 | 6(50.0) | 1 | 2 | 3 | |
5~ | 2.6(2/77) | 1(50.0) | 1 | 0 | 0 | 1(50.0) | 0 | 1 | 0 | ||
20~ | 3.5(23/653) | 14(60.9) | 0 | 11 | 3 | 9(39.1) | 3 | 6 | 0 | ||
40~ | 4.2(18/433) | 10(55.6) | 3 | 7 | 0 | 8(44.4) | 3 | 5 | 0 | ||
60~91 | 4.2(18/433) | 11(61.1) | 2 | 6 | 3 | 7(38.9) | 2 | 4 | 1 | ||
合计 | 73 | 42 | 8 | 26 | 8 | 31 | 9 | 18 | 4 | ||
注:a: χ2=49.4,P < 0.05; b: χ2=0.0,P>0.05; c: χ2=1.2,P>0.05。 |
73例气单胞菌腹泻病例包括42例单一型感染和31例混合型感染病例,温和气单胞菌病例(分别为26例和18例)与其他菌型病例阳性率差异有统计学意义(P <0.05)。混合感染病例的多病原谱分布以2种病原菌的混合病例最多(93.5%),最多的为4种病原菌的混合病例;在混合感染的病原菌中以5种致泻性大肠埃希菌的频率最高(74.2%),其次为弯曲菌和沙门菌,见表 2。
感染类型 | 嗜水(n=17) | 温和(n=44) | 豚鼠(n=12) |
单一型(n=42) | 8 | 26a | 8 |
混合型(n=31) | 9 | 18b | 4 |
混合感染的病原谱 | 3(嗜水+EAEC) | 6(温和+ETEC) | 2(豚鼠+EAEC) |
2(嗜水+ETEC) | 3(温和+EAEC) | 1(豚鼠+ETEC) | |
1(嗜水+EPEC) | 2(温和+EPEC) | 1(豚鼠+EPEC) | |
1(嗜水+沙门菌) | 2(温和+沙门菌) | ||
1(嗜水+空肠弯曲菌) | 2(温和+空肠弯曲菌) | ||
1(嗜水+结肠弯曲菌) | 1(温和+类志贺邻单胞菌) | ||
1(温和+ETEC+EPEC) | |||
1(温和+ETEC+EPEC+EAEC) |
73株气单胞菌腹泻株中有48株(65.8%)至少对1种抗生素产生耐药性,对AMC和TE的耐药率最高,分别为38.4%和34.2%,其他10种抗生素的耐药率均 < 10.0%。出现2种以上抗生素耐药的菌型以温和气单胞菌为主(P <0.05),有3株温和气单胞菌对3种及以上抗生素产生了多重耐药(MDR),其中1株耐6种抗生素(AMC+TE+SXT+CTX+CIP+LEV),见表 3。
耐药型 | 抗生素种类 | 总耐药率(%,n=73) | 嗜水(n=17) | 温和(n=44) | 豚鼠(n=12) |
R-1 | AMC | 23.3(17) | 8 | 5 | 4 |
TE | 19.2(14) | 1 | 11 | 2 | |
CTX | 2.7(2) | 0 | 1 | 1 | |
SXT | 1.4(1) | 1 | 0 | 0 | |
R-2 | TE+AMC | 8.2(6) | 1 | 3 | 2 |
AMC+IPM | 1.4(1) | 0 | 1 | 0 | |
C+SXT | 1.4(1) | 0 | 1 | 0 | |
CTX+TE | 1.4(1) | 1 | 0 | 0 | |
SXT+AMC | 1.4(1) | 0 | 1 | 0 | |
TE+SXT | 1.4(1) | 0 | 1 | 0 | |
R-3 | TE+SXT+AMC | 2.7(2) | 0 | 2 | 0 |
R-6 | CTX+CIP+LEV+TE+SXT+AMC | 1.4(1) | 0 | 1 | 0 |
合计 | 65.8(48) | 12 | 27a | 9 | |
注:a: χ2=12.5, P < 0.05。 |
随着分子测序技术在气单胞菌鉴定中的应用,近几年新发现的来自人源和环境源的气单胞菌新菌型数不断增多[5]。与腹泻相关的3种传统气单胞菌(型)病例在全球的分布仍存在较大的差异,这也是导致其未能获得普遍公认的肠道病原菌地位的原因之一。已公认的在儿童腹泻中占有相对重要地位的高发病地区,局限在南亚和东南亚的某些发展中国家[6, 7]。本次研究获得的上海浦东地区气单胞菌腹泻阳性率为4.0%,和国内北京(3.9%)、印度(4.7%)及西班牙(4.0%)的报道相近,说明其在多数国家和地区的发病基线总体较稳定[6, 8, 9]。
本次研究尚存在局限性,即未使用病例对照方法求证气单胞菌腹泻的归因,但发现了气单胞菌腹泻也呈现典型的季节性和低年龄组与中老年人群易感的特征,符合通常的食源性感染性疾病的流行规律;虽然与其他肠道病原菌混合感染比例较高,也符合其不同菌型的致病性差异和人群免疫力强弱导致的症状以轻度或中度腹泻为主的临床特征,因此目前已有多国学者认为可将气单胞菌纳入食源性感染性病原菌范畴[7, 10]。国内沿海地区的研究已有证据认为气单胞菌和腹泻存在正相关[11]。
本次的研究证实上海浦东地区的气单胞菌腹泻病例中以温和气单胞菌为优势的流行特征。不同于印度、西班牙等国的腹泻病例以豚鼠气单胞菌占优势(45.1%~75.9%)的特征[6, 9]。基于早期的气单胞菌食源性监测数据发现,浦东地区的食源性气单胞菌型分布也是以温和气单胞菌为优势,说明病例存在食源性暴露的潜在风险[12]。由此证明,美国环保总署(EPA)将气单胞菌列入水质污染指示菌名录,进一步提示其具有潜在的和食品相关的致病性。
细菌耐药性问题一直是全球关注的焦点,与人类健康息息相关。有研究显示,气单胞菌能产生头孢菌素酶、金属酶等[1]。自2003年法国首次报道产ESBLs的气单胞菌之后,世界各地陆续报道环境及临床分离的高耐药菌株,提示此类菌的耐药性问题日趋严重[13, 14, 15]。本次的人源气单胞菌耐药特征显示,65.8%的菌株至少对1种抗生素产生耐药性,与我国其他地区的报告一致[16]。耐药以青霉素酶抑制剂和四环素类药物最高,可能与水产品养殖业过程中的不合理使用抗生素添加剂促使菌株耐药性的升高,继而以垂直或水平方式在种群内传播的耐药机制有关[17]。本次确认1株对喹诺酮类(CIP)和三代头孢菌素类(CTX)等多重耐药的温和气单胞菌,其是否为ESBLs尚有待后续研究证实,但国外报道在养殖贻贝行业存在高产ESBLs菌株现象[18]。温和气单胞菌在浦东新区的人源和食源性气单胞菌中均属优势菌型,存在潜在的不断增加的多重耐药优势种群的风险,建议应加强食源性感染性疾病的风险评估,加强农业与食品安全流通领域的多源头协调监测,规范临床合理使用抗生素,降低多重耐药导致的疾病负担和暴发风险。
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