副溶血弧菌的gyrB基因环介导的恒温扩增技术检测方法的研究

引用本文: . DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961-2009.08.024 shu
Citation:  Study on loop-mediated isothermal amplification (LAMP) technique for detection of IVibrio parahaemolyticus/I based on theIgyrB/I gene[J]. Disease Surveillance, 2009, 24(8): 621-624. DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961-2009.08.024 shu

副溶血弧菌的gyrB基因环介导的恒温扩增技术检测方法的研究

摘要: 目的建立一种适合基层实验室应用和开展的快速检测副溶血弧菌的DNA环介导的恒温扩增法(LAMP)。方法针对副溶血弧菌的IgyrB/I 基因序列设计了4条引物(2条内引物、2条外引物),并对扩增反应条件进行了优化。结果整个检测过程仅需1.5 h,可通过肉眼目测或电泳检 测判断结果;对3株种系背景明确的副溶血弧菌不同实验对照株、23株副溶血弧菌地方分离株和32株其他肠道菌进行了检测,具有很高的特异性 ;该方法的最低检测限为24 cfu/ml,具有良好的敏感性;应用于61份贝类海产品的现场检测,阳性率为100%,与实时荧光定量PCR方法的检测 结果相符,阳性率高于传统的培养鉴定方法。结论本方法具有快速、灵敏、特异、简便、经济等特点,适合基层实验室、应急检测或现场监测 等使用,具有较高的推广价值。

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  • 收稿日期:  2009-05-08
  • 刊出日期:  2009-08-30
通信作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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