副溶血弧菌TaqMan双重实时-聚合酶链反应检测方法的建立

王海波 王多春 阚飙 毕振强

引用本文: 王海波, 王多春, 阚飙, 毕振强. 副溶血弧菌TaqMan双重实时-聚合酶链反应检测方法的建立[J]. 疾病监测, 2009, 24(4): 283-286. DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2009.04.021 shu
Citation:  WANG Hai-bo, WANG Duo-chun, KAN Biao and BI Zhen-qiang. Establishment of <I>Vibrio parahaemolyticus</I> detection by duplex TaqMan real-time PCR  assay[J]. Disease Surveillance, 2009, 24(4): 283-286. DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2009.04.021 shu

副溶血弧菌TaqMan双重实时-聚合酶链反应检测方法的建立

摘要: 目的建立副溶血弧菌TaqMan实时-PCR和毒力基因TaqMan双重实时-PCR筛检的实验室检测方法。方法根据副溶血弧菌ItoxR/I基因的保守序列设计引物和TaqMan探针,建立检测副溶血弧菌的实时-PCR方法;根据副溶血弧菌耐热直接溶血素(thermostable direct hemolysin, Itdh/I)和耐热相关溶血素(thermostable related hemolysin, Itrh/I)基因的保守序列设计引物和探针,建立检测致病性副溶血弧菌毒力基因的双重TaqMan实时-PCR方法。对所建立的副溶血弧菌实时-PCR检测方法进行灵敏度和特异度评价。结果副溶血弧菌的检测下限为10sup2/sup拷贝/l,Itdh/I和Itrh/I双重实时PCR的检测下限为10sup2/sup拷贝/l。针对ItoxR/I基因建立的副溶血弧菌实时-PCR方法对11种其他弧菌和肠道细菌的染色体无扩增。结论建立的方法能够特异和敏感地检测副溶血弧菌,并能确定致病性副溶血弧菌的毒力基因,能作为副溶血弧菌的灵敏和快速检测方法。

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  • 收稿日期:  2009-02-23
  • 刊出日期:  2009-04-30
通信作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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