琼脂糖凝胶电泳与核酸印迹杂交法检测细菌毒力基因PCR产物的灵敏度比较研究

綦廷娜 刘志广 王涛 李培京 叶长芸

引用本文: 綦廷娜, 刘志广, 王涛, 李培京, 叶长芸. 琼脂糖凝胶电泳与核酸印迹杂交法检测细菌毒力基因PCR产物的灵敏度比较研究[J]. 疾病监测, 2011, 26(8): 651-653. DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2011.08.020 shu
Citation:  QI Ting-na, LIU Zhi-guang, WANG Tao, LI Pei-jing and YE Chang-yun. Comparison of sensitivities of agarose gel electrophoresis and nucleic acid blot hybridization in detecting bacterial virulence gene PCR product[J]. Disease Surveillance, 2011, 26(8): 651-653. DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2011.08.020 shu

琼脂糖凝胶电泳与核酸印迹杂交法检测细菌毒力基因PCR产物的灵敏度比较研究

    作者简介: 綦廷娜,女,贵州省习水县人,病原生物学硕士,主要从事病原生物学生物多样性研究工作; 刘志广,男,北京人,预防医学本科,主要从事结核病原学研究工作;綦廷娜,女,贵州省习水县人,病原生物学硕士,主要从事病原生物学生物多样性研究工作; 刘志广,男,北京人,预防医学本科,主要从事结核病原学研究工作;
    通信作者: 叶长芸, yechangyun@icdc.cn
  • 基金项目: 国家科技重大专项(No.2008ZX10004-001,2009ZX10004-101)

摘要: 目的 探讨核酸印迹杂交法在检测细菌毒力基因方面的应用价值。 方法 分别以10倍连续稀释的O157 ∶ H7肠出血性大肠埃希菌和血清2型猪链球菌染色体提取物为模板,与志贺毒素2基因(stx2)和荚膜多糖2J基因(cps2J)特异性引物进行聚合酶链式反应(PCR)。用1%琼脂糖凝胶电泳及核酸印迹杂交法检测PCR产物,比较两种方法的最低检测限。 结果 1%琼脂糖凝胶电泳对EDL933菌株stx2基因PCR产物的最低检测限为6.7102 cfu(56.87 pg)/PCR体系,对SC84菌株cps2J基因PCR产物的最低检测限为 4.3102 cfu(12.65 pg)/PCR体系;核酸印迹杂交法对EDL933菌株stx2基因PCR产物的最低检测限为6.710-1 cfu(56.87 fg)/PCR体系,对SC84菌株cps2J基因PCR产物的最低检测限为4.310-1 cfu(12.65 fg)/PCR体系。 结论 用核酸印迹杂交法检测肠出血性大肠埃希菌stx2基因和猪链球菌cps2J基因PCR产物的灵敏度均比普通琼脂糖凝胶电泳检测法高了1000倍。

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  • 通信作者:  叶长芸, yechangyun@icdc.cn
  • 收稿日期:  2011-01-09
  • 刊出日期:  2011-08-25
通信作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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