一例婴儿B型肉毒中毒的实验室诊断

张爱佳 孙启杰 黄英 高鹏亚 刘志楠 彭筱婧 刘洋 徐雪芳 卓秀伟 张炜华 吴长德 卢选成

引用本文: 张爱佳, 孙启杰, 黄英, 高鹏亚, 刘志楠, 彭筱婧, 刘洋, 徐雪芳, 卓秀伟, 张炜华, 吴长德, 卢选成. 一例婴儿B型肉毒中毒的实验室诊断[J]. 疾病监测. DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.06.021 shu
Citation:  Aijia Zhang, Qijie Sun, Ying Huang, Pengya Gao, Zhinan Liu, Xiaojing Peng, Yang Liu, Xuefang Xu, Xiuwei Zhuo, Weihua Zhang, Changde Wu and Xuancheng Lu. Laboratory identification of an infant botulism B case[J]. Disease Surveillance. DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.06.021 shu

一例婴儿B型肉毒中毒的实验室诊断

    作者简介: 张爱佳,女,北京市人,本科在读,参与北京市启明星项目,从事微生物学、食品卫生学研究,Email:2035655298@qq.com;孙启杰,男,北京市人,本科在读,参与北京市启明星项目,从事微生物学、食品质量管理工作,Email:2627227710@qq.com;
    通信作者: 徐雪芳, xuxuefang@icdc.cn 卓秀伟, zhuoxiuwei@126.com
  • 基金项目: 国家重点研发计划(No.2018YFC1603800),启明星基金项目(No.201911417SJ127)

摘要: 目的对2019年2月来自北京儿童医院1例疑似肉毒中毒的婴儿粪便样品进行实验室诊断,判定是否为肉毒毒素中毒。方法按照GB 4789.12 — 2016稀释处理样品,利用动物实验鉴定肉毒毒素、接种增菌培养基观察变化、采用卵黄培养基进行分离纯化,扩增测序16S rRNA基因并进行序列比对,采用荧光定量PCR方法进行毒素基因分型。结果粪便样本稀释后对小鼠进行腹腔注射,小鼠出现呼吸急促、腹式呼吸,并在4~6 h内死亡,呈现肉毒中毒典型症状。 在卵黄培养基平板上分离到典型肉毒梭菌,镜检观察到芽孢形态,测得的16S rRNA基因序列与GenBank中公开的肉毒梭菌16S rRNA基因序列进行比对,相似率>99%,荧光定量PCR检测显示B型毒素基因阳性,判定该婴儿为B型肉毒中毒。结论此次实验按照国家标准和本实验室建立的荧光定量PCR方法进行鉴定,检测结果和诊断方案为我国婴儿B型肉毒中毒诊断提供参考,也为分析肉毒中毒地域性提供证据,为临床鉴定婴儿B型肉毒中毒提供参考案例。

English

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  • 图 1  样品革兰染色结果

    Figure 1.  Results of gram staining of samples

    图 2  荧光定量PCR检测结果

    Figure 2.  Results of fluorescence quantitative PCR

    表 1  腹腔注射昆明小鼠毒素确证试验结果

    Table 1.  Confirmation of mouse toxin intraperitoneal injection

    组别处理方式小鼠死亡情况小鼠死亡时间区间
    1样品+煮沸存活
    2样品死亡4~6 h
    3样品+混合型血清存活
    4阳性对照+煮沸存活
    5阳性对照死亡4~5 h
    6阳性对照+混合型血清存活
    7阴性对照存活
    8阴性对照+煮沸存活
    9阴性对照+混合血清存活
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通信作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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