联合分子检测法对腹泻患者粪便中致泻性大肠埃希菌的调查

刘晓琳 王慧 郭凯 曲剑英 王丽娟 于维森

刘晓琳, 王慧, 郭凯, 曲剑英, 王丽娟, 于维森. 联合分子检测法对腹泻患者粪便中致泻性大肠埃希菌的调查[J]. 疾病监测, 2020, 35(12): 1110-1114. doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.12.011
引用本文: 刘晓琳, 王慧, 郭凯, 曲剑英, 王丽娟, 于维森. 联合分子检测法对腹泻患者粪便中致泻性大肠埃希菌的调查[J]. 疾病监测, 2020, 35(12): 1110-1114. doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.12.011
Liu Xiaolin, Wang Hui, Guo Kai, Qu Jianying, Wang Lijuan, Yu Weisen. Detection of diarrheagenic Escherichia coli from diarrhea cases’ stool samples with combined molecular detection method[J]. Disease Surveillance, 2020, 35(12): 1110-1114. doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.12.011
Citation: Liu Xiaolin, Wang Hui, Guo Kai, Qu Jianying, Wang Lijuan, Yu Weisen. Detection of diarrheagenic Escherichia coli from diarrhea cases’ stool samples with combined molecular detection method[J]. Disease Surveillance, 2020, 35(12): 1110-1114. doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.12.011

联合分子检测法对腹泻患者粪便中致泻性大肠埃希菌的调查

doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2020.12.011
基金项目: 青岛市民生科技计划项目(No. 18-6-1-67-nsh)
详细信息
    作者简介:

    刘晓琳,女,山东省威海市人,副主任技师,主要从事微生物检验工作,Email:chxlxl@sina.com

    通讯作者:

    于维森,Tel:0532–8562356,Email:yuweisen@126.com

  • 中图分类号: R211;R378.2+1

Detection of diarrheagenic Escherichia coli from diarrhea cases’ stool samples with combined molecular detection method

Funds: This study was supported by the fund of Livelihood and Science and Technology Planning Project of Qingdao (No. 18-6-1-67-nsh)
More Information
  • 摘要:   目的  采用胃肠道感染测试条(FA GI)联合实时聚合酶链式反应(PCR)直接检测法,回顾性调查山东省青岛市腹泻患者致泻性大肠埃希菌(DEC)的感染情况及菌株基因型,并与传统方法进行比较,探讨不同检测方法在腹泻监测中的应用。  方法  对2018年青岛市2家哨点医院采集的263份腹泻粪便标本,采用传统培养法分离大肠埃希菌并送至青岛市疾病预防控制中心,利用多重PCR方法鉴定DEC;同时采用FA GI联合实时PCR的方法直接检测粪便中的DEC。 将每5份粪便样标本混合为1份混合样品,用FA GI进行检测,再用实时PCR方法检测阳性混合样品中的单个样品。  结果  263份标本中,采用传统分离培养联合多重PCR法检测,15份样品阳性,阳性率为5.7%。 其中,肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)、肠致病性大肠埃希菌(EPEC)、肠集聚性大肠埃希菌(EAEC)、肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)阳性的标本分别为7、4、3、1份。 采用FA GI联合实时PCR直接检测法检测,阳性样品35 份,阳性率为13.3%。 其中ETEC、EAEC、EPEC、EIEC阳性的标本分别为12、12、9、2份。 2种方法均未检到产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)阳性的标本。 2种方法毒力基因检测结果一致。 EAEC、ETEC、EPEC携带的主要毒力基因分别为picestIbeae  结论  FA GI联合实时PCR直接检测法显著提高了粪便中DEC的检出率,敏感性和特异性高,省时省力,可以辅助DEC常规监测,准确地反映DEC的流行和分布情况,为DEC的防控提供有力的实验室依据。
  • 表  1  采用2种检测方法对263份粪便标本中致泻性大肠埃希菌的检测结果

    Table  1.   Detection results of DEC in 263 stool samples by two detection methods

    致泻性大肠埃希菌型别阳性毒力基因FA GI联合实时PCR直接检测法分离培养联合多重PCR法
    阳性数(份)阳性率(%)95%CI阳性数(份)阳性率(%)95%CI
    EAEC12 4.62.6~7.8 31.10.3~3.3
    pic8 2
    aggR3 0
    pic+aggR1 1
    ETEC12 4.62.6~7.8 72.71.3~5.4
    estIb9 5
    elt2 1
    elt+estIa1 0
    elt+estIb0 1
    EPEC9 3.41.8~6.4 41.50.6~3.8
    eae9 4
    EIECipaH2 0.80.2~2.7 10.40.1~2.1
        合计3513.39.7~18.0155.73.5~9.2
      注:EAEC. 肠集聚性大肠埃希菌;ETEC. 肠产毒性大肠埃希菌;EPEC. 肠致病性大肠埃希菌;EIEC. 肠侵袭性大肠埃希菌
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    表  2  两种检测方法的敏感性和特异性

    Table  2.   Sensitivity and specificity comparison of two detection methods

    致泻性大肠埃希菌型别FA GI联合实时 PCR直接检测法分离培养联合多重PCR法样品数(份)差异性
    分析
    FA GI联合实时PCR直接检测法分离培养联合多重PCR法
    +敏感性及其95%CI(%)特异性及其95%CI(%)敏感性及其95%CI(%)特异性及其95%CI(%)
    EAEC++ 110100.0(51.0~100.0)100.0(98.5~100.0)25.0(4.6~78.0)100.0(98.5~100.0)
    + 330
    + 0
    259
    ETEC++ 55085.7(60.1~97.5)100.0(98.5~100.0)50.0(26.8~76.0)100.0(98.5~100.0)
    + 770
    + 220
    249
    EPEC++ 22081.8(52.3~96.8)100.0(98.5~100.0)36.4(15.2~68.4)100.0(98.5~100.0)
    + 770
    + 220
    252
    EIEC++ 110100.0(34.2~100.0)100.0(98.6~100.0)50.0(9.5~97.3)100.0(98.6~100.0)
    + 110
    + 0
    261
      注:+. 阳性;−. 阴性;EAEC. 肠集聚性大肠埃希菌;ETEC. 肠产毒性大肠埃希菌;EPEC. 肠致病性大肠埃希菌;EIEC. 肠侵袭性大肠埃希菌
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出版历程
  • 收稿日期:  2020-09-29
  • 网络出版日期:  2020-12-18
  • 刊出日期:  2020-12-30

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