TaqMan MGB 探针实时荧光定量-聚合酶链反应检测人粒细胞无形体Msp2基因方法的建立

付秀萍 王景泉 贺金荣 张景山

付秀萍, 王景泉, 贺金荣, 张景山. TaqMan MGB 探针实时荧光定量-聚合酶链反应检测人粒细胞无形体Msp2基因方法的建立[J]. 疾病监测, 2012, 27(2): 141-144.
引用本文: 付秀萍, 王景泉, 贺金荣, 张景山. TaqMan MGB 探针实时荧光定量-聚合酶链反应检测人粒细胞无形体Msp2基因方法的建立[J]. 疾病监测, 2012, 27(2): 141-144.
FU Xiu-ping, WANG Jing-quan, HE Jin-rong, ZHANG Jing-shan. Establishment of real-time PCR assay to detect Anaplasma phagocytophilum Msp2 gene with TaqMan MGB probe[J]. Disease Surveillance, 2012, 27(2): 141-144.
Citation: FU Xiu-ping, WANG Jing-quan, HE Jin-rong, ZHANG Jing-shan. Establishment of real-time PCR assay to detect Anaplasma phagocytophilum Msp2 gene with TaqMan MGB probe[J]. Disease Surveillance, 2012, 27(2): 141-144.

TaqMan MGB 探针实时荧光定量-聚合酶链反应检测人粒细胞无形体Msp2基因方法的建立

基金项目: 

国家基础研究项目- 973 计划( No.2010CB530200)

Establishment of real-time PCR assay to detect Anaplasma phagocytophilum Msp2 gene with TaqMan MGB probe

  • 摘要: 目的 建立敏感、特异、实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative, FQ-PCR)方法, 用于人粒细胞无形体病的检测。 方法 根据无形体特异外膜蛋白 Msp2基因为靶基因设计引物以及TaqMan MGB探针, 建立FQ-PCR方法,并对湖北省随州和河北省张家口地区的蜱标本进行了检测。 结果 本研究建立的TaqMan MGB探针具有良好的特异性,建立的FQ-PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.99),灵敏性评估发现每个20 μl PCR反应管中只要有35个拷贝的目的基因即可被检测到,即最低检出浓度为2拷贝/μl,并且具有较好的重复性。共检测蜱标本426只,其中豪猪血蜱253只,共49组,阳性7份。 结论 本研究建立的FQ-PCR方法具有很高的特异性和敏感性, 可用于人粒细胞无形体感染的快速检测。进一步证实了豪猪血蜱可能是粒细胞无形体的媒介宿主。
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出版历程
  • 收稿日期:  2011-10-08
  • 刊出日期:  2012-02-20

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