C群脑膜炎奈瑟菌部分蛋白表型特征分析
胡源, 卲祝军, 闫笑梅, 李波清, 赵飞, 肖迪, 任军, 郑明寰, 樊春祥, 何利华, 徐丽, 顾一心, 姜海, 郭凤华, 李马超, 陆美娟, 陈霞, 邹清华, 孟凡亮, 张建中
2006,21(8) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2006.8.428
目的以蛋白质组学研究为基础,分析2003~2005年间我国流脑暴发流行期间C群脑膜炎奈瑟菌菌株分布特征。方法利用双向电泳技术获得66株2003~2005年流脑流行期内分离的C群脑膜炎奈瑟菌菌株及2株参考菌株的2-DE电泳图谱,并结合质谱分析的结果进行部分外膜蛋白和sucD蛋白表型分析。结果根据外膜蛋白和sucD蛋白将实验菌株共分为9型,其中安徽菌株分型结果显示出了高度的一致性,而其他地区菌株分型分布则显示出高度的多态性。结论安徽已经有优势菌型形成,但优势菌型还没在全国范围内出现,此类菌型分布和变迁的检测可能对认识流脑的流行规律和有效进行流脑疾病控制具有重要意义。
关键词: 脑膜炎奈瑟菌, 外膜蛋白, sucD蛋白, 2-DE
广西壮族自治区监测网点急性脑炎、脑膜炎流行病学监测研究
杨进业, 董柏青, 林玫, 谭毅, 李健龙, 吴兴华, 权怡, 谢艺红, 闭福银, 邓星超, 黎祖秋, 谢一金, 李艺星, 尹遵栋, 邵祝军, 王环宇
2010,25(3) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2010.03.009
目的 了解广西壮族自治区(广西)监测网点急性脑炎、脑膜炎发病强度、临床和流行病学特征,为相关疾病预防控制提供依据。 方法 通过在广西贵港市建立涵盖市辖区、桂平市和平南县的急性脑炎、脑膜炎流行病学监测网络,按照筛检标准评估疑似病例,进行流行病学调查和采样,对标本开展致病菌培养、RT-PCR检测和10种病毒IgM ELISA检测,采用项目专用数据库进行数据录入并应用SPSS 16.0软件进行分析。 结果 2007年5月至2008年10月,共评估疑似病例883例,病死41例,病死率为4.64%,疑似病例发病率为11.73/10万,临床诊断和实验室确诊年发病率分别为8.46/10万和4.28/10万,其中细菌引起的分别为1.16/10万和0.48/10万,病毒引起的分别为7.31/10万和3.80/10万,病毒引起的发病明显高于细菌。地区分布以桂平市发病率最高(实验室确诊发病率为5.18/10万);病毒性脑炎以夏季为高发,与流行性乙型脑炎(乙脑)高发有关;男女性发病率间基本无差异;年龄发病率以0~4岁组最高(28.44/10万);血培养、CSF培养和RT-PCR的病原检出阳性率分别为6.93%、3.39%和6.58%,血清标本10种病毒ELISA IgM抗体阳性率为38.41%,其中乙脑为10.94%、其他病毒为27.47%。 结论 广西急性脑炎、脑膜炎处于较高发病状态,多为病毒引起。应加强适龄儿童尤其是散居儿童的疫苗注射以及疾病监测。
关键词: 急性脑炎、脑膜炎, 流行病学, 监测
中国脑膜炎奈瑟菌penA基因及PBP2蛋白多态性研究
李马超, 郑玉红, 徐丽, 任红宇, 高源, 朱兵清, 田国忠, 邵祝军
2010,25(2) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2010.02.014
目的 掌握中国脑膜炎奈瑟菌对青霉素类抗生素敏感性的变化情况,探讨脑膜炎奈瑟菌菌株对青霉素敏感性降低的机制、敏感性变化与penA基因及PBP2蛋白多态性之间的关系。 方法 采用MIC肉汤稀释法和E-test药敏纸条法检测脑膜炎奈瑟菌菌株对青霉素的敏感性,并对penA基因进行扩增、测序,分析penA以及PBP2蛋白与菌株的青霉素敏感性变化的关系。 结果 通过肉汤稀释法和E-test法检测出4株对青霉素中介敏感菌株,未发现对青霉素耐药菌株;菌株的药物敏感性变化情况与penA及PBP2蛋白的多态性无明显关系,所检测菌株的PBP2高度保守。 结论 应该继续对流脑菌的青霉素敏感性变化情况开展基因水平监测,及时发现高耐药性菌株,防止耐药菌株克隆在人群间扩散。
关键词: 脑膜炎奈瑟菌, 敏感性, penA测序
2009年中国流行性脑脊髓膜炎监测结果分析
李军宏, 李艺星, 邵祝军, 周海建, 宁桂军, 尹遵栋, 罗会明, 梁晓峰
2010,25(10) .
目的 分析中国2009年流行性脑脊髓膜炎(流脑)发病情况及国家级监测点所在省流行病学监测和实验室监测结果,评价流脑流行现状及特征,为加强预防控制流脑暴发流行提供参考资料。 方法 利用国家级监测点所在省上报资料、法定传染病报告系统资料、流脑单病/专病监测信息报告管理系统资料、中国疾病预防控制中心(CDC)传染病预防控制所国家流脑实验室检测资料对2009年流脑监测结果进行分析。 结果 2009年全国流脑报告发病率0.05/10万, 国家级监测点中以安徽省发病数较多(76例);15岁儿童平均发病率为 0.23/10万,儿童、学生报告病例数分别占监测省报告病例总数的42.14%和30.07%。监测省报告病例中检出A群脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)占23.16%,B群占4.21%, C群Nm占65.26%;健康人群中检出A群Nm占10.87%,B群Nm占28.26%,C群Nm占22.83%;健康人群A群Nm抗体阳性率平均为75.51%,C群为65.71%。 结论 中国流脑C群Nm检出比例逐年增多,病例最多的安徽省已成为C群流脑病例为主;健康人群带菌以B群Nm为主,C群Nm抗体阳性率明显低于A群。应针对薄弱环节,继续加强流脑监测,防止流脑暴发、流行。
关键词: 流行性脑脊髓膜炎, 流行病学监测, 病原学监测
2009-2010年中国流行性脑脊髓膜炎流行病学特征分析
王萌, 李艺星, 李军宏, 尹遵栋, 宁桂军, 邵祝军, 徐丽, 高源, 李马超
2012,27(6) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2012.6.006
目的 分析中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)流行性脑脊髓膜炎(流脑)流行病学特征,为流脑预防控制提供参考依据。 方法 运用描述流行病学方法分析2009-2010年(2009年10月1日至2010年9月30日)全国法定传染病报告系统流脑疫情。 结果 2009-2010年与2008-2009年相比,发病率降低50.98%。病例相对集中于5个省,其发病数占全国病例总数的45.10%;0~14岁病例占病例总数的62.61%,其中<2岁婴幼儿发病率最高。 结论 在近年来全国流脑报告发病水平持续下降的形势下,在监测点应持续开展急性脑炎脑膜炎症候群监测;应加强<2岁儿童的流脑基础免疫工作;不推荐磺胺类和喹诺酮类药物作为流脑的预防性药物。
关键词: 流行性脑脊髓膜炎, 流行病学特征, 药物敏感试验
中国脑膜炎奈瑟菌nadA基因多态性分析
孙晓芳, 杨郝亮, 周海健, 朱兵清, 徐丽, 高源, 邵祝军
2012,27(11) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2012.11.003
目的 了解我国脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)主要黏附蛋白(Neisseria adhesion A,NadA)编码基因nadA的多态性特征,以期研究我国主要流行Nm菌株NadA蛋白的流行病学意义及NadA蛋白作为脑膜炎球菌蛋白疫苗候选蛋白研发的可行性。 方法 选取我国26个省(市、自治区)1963-2012年间不同血清群代表性Nm菌株230株,采用多位点序列分型(muliti-locus sequence typing,MLST)、PCR、斑点杂交、基因测序等方法,检测Nm菌株基因型特征、nadA基因分布的多态性及其基因序列特征,利用BioEdit、Mega 4.0等软件对nadA基因序列进行比对分析。 结果 我国230株不同血清群的Nm菌株中,nadA+菌株55株,仅存在于ST-5 complex(序列群)的A群和ST-11 complex 的W135群Nm菌株中,B、C及其他血清群Nm菌株nadA-。nadA+菌株基因型以variant 3(V3)型为主(54/55),包括5种亚型(NadA V3.1~3.5),同源性高达99%以上。 结论 我国Nm菌株中,仅ST-5 complex的A群和ST-11 complex的W135群菌株存在NadA黏附蛋白,型别以variant 3型为主。B群菌株不含有NadA蛋白,variant 3型NadA蛋白不适合作为我国B群Nm(B meningococci,MenB)蛋白疫苗的候选蛋白。
关键词: 脑膜炎奈瑟菌, nadA, 黏附蛋白, 疫苗
利用脉冲场凝胶电泳筛选质粒方法的建立和应用
关红, 秦天, 周海建, 任红宇, 段永翔, 许欣, 邵祝军
2013,28(1) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2013.1.018
目的 改良及优化常规脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)方法,建立基于PFGE技术筛选细菌质粒方法,并用于军团菌质粒的筛选。 方法 使用含有质粒的杜莫氏军团菌及其质粒消除株对常规PFGE方法进行条件优化,调整细菌菌悬液浓度,蛋白酶K用量及作用时间,胶块清洗时间和次数,胶块不经过酶切直接进行PFGE,染色成像后选择能形成条带清晰脱尾较少的最优条件。 结果 去除常规PFGE方法中酶切步骤并优化裂解和清洗条件能使细菌DNA完整保留在胶块中,经过PFGE后,质粒DNA和染色体DNA在琼脂糖凝胶上能被很好的区分。 结论 该方法较常规方法更为快速可靠,可用于细菌质粒图谱的快速筛选。
关键词: 质粒, 脉冲场凝胶电泳, 军团菌
细菌分离培养与实时荧光定量-聚合酶链反应用于健康人群脑膜炎奈瑟菌携带率研究
王颖童, 孙印旗, 贾肇一, 何宝花, 姜霞, 朱兵清, 邵祝军
2013,28(6) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2013.6.007
目的 了解河北省部分地区健康人群脑膜炎奈瑟菌(Nm)带菌状况,评价实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction,FQ-PCR)作为菌株分离培养法的补充在健康人群带菌调查中的应用价值。 方法 按年龄分层整群随机抽取577人采集咽拭子,采用Nm分离培养和FQ-PCR法同时检测,并使用血清学和分子生物学方法分群。 结果 分离到18株Nm菌株,总阳性率3.12%,其中不可分群最多(9株),其次为B群(3株)、W135群(3株)、X群(2株)、C群(1株)。FQ-PCR检测阳性样本46份,总阳性率7.97%,其中B群最多(13份),其次为W135群(12份)、不可分群(11份)、X群(7份)、C群(3份)。 结论 细菌培养和FQ-PCR均提示这些地区健康人群携带Nm血清群多样化。FQ-PCR检测方法在发现病原体及分群方面比传统菌株分离培养方法都有显著提升,可作为传统方法的有力补充。
关键词: 脑膜炎奈瑟菌, 携带率调查, 细菌培养, 实时荧光定量-聚合酶链反应
传染性非典型肺炎临床诊断病例血清标本不同非典型肺炎病原体抗体检测
邵祝军, 任红宇, 朱兵清, 李马超, 徐建国
2005,20(9) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2005.9.457
目的研究传染性非典型肺炎(SARS)临床诊断病例血清标本中常见的不同非典型肺炎病原体感染抗体分布情况。方法选取2003年SARS流行期间90份SARS临床确诊病例血清标本和40份健康志愿者血清标本进行血清抗体检测。结果90份临床诊断的传染性非典型肺炎(SARS)病例急性期血清标本中,21.1%(19/90)标本SARS抗体阳性,79.9%(71/90)标本SARS抗体阴性。肺炎支原体、呼吸道合胞病毒、腺病毒、军团菌、肺炎衣原体等抗体检测呈现不同的分布。结论2003年SARS流行期间,SARS抗体阴性的传染性非典型肺炎临床确诊病例可能存在或合并其它病原体感染。
关键词: 传染性非典型肺炎, 临床诊断病例, 抗体检测
鉴别29E群、X群和Z群脑膜炎奈瑟菌聚合酶链反应方法的建立及应用
徐丽, 朱兵清, 高源, 任红宇, 邵祝军
2009,24(4) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2009.04.020
目的建立鉴别29E群、X群和Z群脑膜炎奈瑟菌的聚合酶链反应(PCR)方法。方法针对脑膜炎奈瑟菌IctrA/I基因变异区序列,设计合成PCR引物,分别用于扩增29E群、X群和Z群等3个血清群脑膜炎奈瑟菌。并将该方法应用于41份疑似脑膜炎奈瑟菌菌株标本的检测。结果3对引物分别能够特异性PCR扩增29E群、X群和Z群脑膜炎奈瑟菌菌株的IctrA/I基因,扩增片段大小分别为667 bp、525 bp和667 bp,3个血清群之间以及与其他血清群脑膜炎奈瑟菌之间未出现交叉PCR扩增。41份疑似脑膜炎奈瑟菌菌株标本中,29E群和X群PCR阳性的标本分别有7份和2份,未检测出Z群菌株。结论本研究建立的PCR方法能准确、特异地鉴定29E群、X群和Z群脑膜炎奈瑟菌菌株。
关键词: 脑膜炎奈瑟菌, 聚合酶链反应, 变异区
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