中国部分食品来源单增李斯特菌中致病相关基因的分布研究
贺春月, 王艳, 王天姝, 叶正兴, 代航, 许柯, 俞骅, 汪永禄, 张兰荣, 王连秀, 曾莹春, 许学斌, 王红, 陈伟伟, 冉陆, 姚颖波, 王和, 叶长芸
2013,28(5) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2013.5.014
目的 了解中国食品来源部分单增李斯特菌(Listeria monocytogences, LM)中致病相关基因的分布情况。 方法 383株LM分离自2002-2011年中国14省(市)的生肉、熟食、蔬菜、冷饮、水产等食品。采用PCR(polymerase chain reaction)和DNA打点杂交方法在单增李斯特菌中进行了55个致病相关基因的检测。 结果 50个致病相关基因检出率均为100%,inlF、fbpA和mprF基因检出率为99.73%,aut基因检出率为99.22%(380/383),vip基因检出率为98.17%(376/383)。 结论 383株食品来源单增李斯特菌中,大部分致病相关基因均存在,部分毒力基因的缺失存在多样性。
关键词: 单增李斯特菌, 致病相关基因, 聚合酶链反应, DNA打点杂交
中国部分食品分离单增李斯特菌的抗菌药物敏感性及耐药基因检测
王天姝, 王艳, 贺春月, 叶正兴, 王毅, 许柯, 俞骅, 汪永禄, 张兰荣, 曾莹春, 许学斌, 王红, 陈伟伟, 王和, 叶长芸
2013,28(3) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2013.3.016
目的 了解我国部分食品中分离单增李斯特菌的抗菌药物敏感性和耐药性,探讨单增李斯特菌耐药基因的携带与耐药表型的关系。 方法 采用微量肉汤稀释法对2005-2011年从我国7个省市/地区食品分离的203株单增李斯特菌进行庆大霉素、氨苄西林、头孢噻吩、青霉素、四环素、强力霉素、亚胺培南、红霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、利福平、万古霉素、氯霉素、氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明、诺氟沙星、头孢呋肟、多粘菌素B、呋喃妥因、氯林可霉素共20种抗菌药物药敏试验,采用PCR方法对实验菌株进行9种耐药基因及接合型转座子Tn916检测,并对阳性基因产物进行序列测定分析。 结果 食源性单增李斯特菌对多粘菌素B、呋喃妥因、头孢呋肟、氯林可霉素、四环素、强力霉素、环丙沙星、诺氟沙星和氯霉素的耐药率分别为98.52%、55.66%、50.25%、12.81%、2.46%、1.97%、0.99%、0.99%和0.49%。203株单增李斯特菌中,5株对四环素耐药的菌株均检测出tetM基因,其中3株菌的tetM基因位于接合型转座子Tn916上。 结论 食品中分离的单增李斯特菌存在不同程度的耐药情况,并有83株多重耐药株存在,具有引起食源性单增李斯特菌感染的风险存在,应加强对抗生素使用的管理以保证食品安全及公众健康。
关键词: 单增李斯特菌, 微量肉汤稀释法, 接合型转座子Tn916
2011年北京市通州区分离单增李斯特菌的生物学及分子流行病学特征
张兰荣, 王艳, 张扬, 高翔, 甄博珺, 张冲, 邹林, 刘晓峰, 金东, 李伟, 王天姝, 余波, 贺春月, 叶长芸
2012,27(7) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2012.7.018
目的 了解2007-2011年北京市通州地区食品及患者分离的单增李斯特菌的生物学和流行病学特征,为李斯特菌病的预防控制提供参考依据。 方法 对分离的单增李斯特菌进行6个毒力因子(prfA、actA、iap、hly、plcB、inlA)的检测、血清分型和脉冲场凝胶电泳分型。 结果 57株单增李斯特菌的6个毒力因子均为阳性,分为5种血清型,主要血清型为1/2a和1/2c型,PFGE分型分为19种带型,主要带型为GX6A16.CN0004。 结论 通州地区分离的单增李斯特菌全部携带6个主要毒力因子,分子型别呈现多态性。
关键词: 单增李斯特菌, 毒力因子, 血清型
37株枸橼酸杆菌的耐药性及PFGE分型分析
白莉, 汪永禄, 金东, 白雪梅, 周海健, 刘燕, 陶勇, 石志峰, 叶长芸, 徐建国
2009,24(5) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2009.05.004
目的了解食品及患者来源的37株枸橼酸杆菌的耐药性、毒力基因携带及PFGE的分型情况。方法运用K-B法选择15种抗生素进行药敏试验;以PCR方法检测志贺样毒素(Istx1/I和Istx2/I)、紧密素基因(Ieae/I)及溶血素(Ihly/I)4种毒力基因;用脉冲场凝胶电泳(pulse field gel electrophoresis,PFGE)方法进行同源性分析。结果37株枸橼酸杆菌中,25株为杨氏枸橼酸杆菌,11株为弗劳地枸橼酸杆菌,1株为布雷克氏枸橼酸杆菌。分离菌株对大多数抗生素敏感,但对头孢噻吩100%耐药。其毒力基因检测均为阴性。PFGE结果发现不同菌株带型差异较大。其中5株食品来源,1株为人来源的杨氏枸橼酸杆菌同为MAS007型,具有流行病学相关性。 结论该地区枸橼酸杆菌主要以杨氏枸橼酸杆菌为主;部分菌株具有多重耐药,应加强菌株的耐药性监测;脉冲场凝胶电泳对枸橼酸杆菌有较好的分型能力,有助于分析追踪疫情和来源;患者可能存在食源性感染,应引起疾控部门的重视。
关键词: 枸橼酸杆菌, 耐药性, 脉冲场凝胶电泳
单增李斯特菌1/2c血清型菌株生物膜形成能力的研究
李东迅, 王艳, 马爱静, 王毅, 刘凯, 刘东鑫, 王和, 叶长芸
2015,30(6) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2015.06.011
目的 比较在不同压力条件下,单增李斯特菌1/2c血清型与其他血清型菌株生物膜形成能力,以了解单增李斯特菌1/2c血清型菌株的环境适应能力。方法 采用96孔培养板结晶紫染色法,检测不同温度、不同培养基、不同pH值条件下,单增李斯特菌1/2c血清型与其他血清型菌株的生物膜形成能力。结果 在25 ℃、TSB、10%TSB和pH 7~8条件下,1/2c血清型菌株生物膜形成能力强于其他血清型菌株(P0.05)。结论 在室温、富营养/低营养条件、中性略偏碱性环境中单增李斯特菌1/2c血清型菌株的生物膜形成能力强于其他血清型菌株,提示可能是食源性单增李斯特菌1/2 c血清型菌株分离率较高的原因之一,为该菌的预防控制措施提供了参考依据。
关键词: 单增李斯特菌, 血清型, 生物膜
单增李斯特菌1/2c血清型菌株生物膜相关基因分析及耐药性研究
李东迅, 王艳, 马爱静, 王毅, 刘凯, 刘东鑫, 王和, 叶长芸
2016,31(5) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2016.05.009
目的 了解单增李斯特菌1/2c血清型菌株与其他血清型菌株的生物膜相关基因和抗生素耐药性是否有差异。方法 采用聚合酶链反应技术对19个生物膜相关基因全长扩增测序分析,并与参考菌株EGD-e序列进行比对确定基因变异情况;根据K-B纸片法对选取的实验菌株进行药敏实验。结果 氨基酸序列比对发现1/2c血清型菌株的flaA基因编码的氨基酸在141位点发生突变,其他血清型菌株则没有,1/2c血清型菌株在prfA基因编码的89氨基酸位点、luxS基因编码的112和140氨基酸位点都不发生突变,其他血清型菌株则发生突变。78.43%的1/2c血清型菌株对头孢西丁中度敏感,对氨苄西林、米诺环素、利福平和呋喃妥因有不同程度的耐药。结论 不同血清型单增李斯特菌的flaA、luxS、prfA 3个基因编码的氨基酸在某些位点突变有一定的规律性;1/2c血清型单增李斯特菌对某些抗生素呈现不同程度的耐药。
关键词: 单增李斯特菌, 血清型, 生物膜相关基因, 点突变, 耐药性
脉冲场凝胶电泳技术对一起痢疾暴发的分型研究
李振军, 秦彩明, 王丽丽, 叶长芸, 崔志刚, 金东, 徐建国
2005,20(9) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2005.9.460
目的运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对痢疾暴发进行分析。方法对辽宁省某市暴发痢疾进行血清学鉴定后,进行PFGE分析,观察引起暴发的菌型是否为同一个分子分型。结果7株暴发菌株的PFGE型别相同。结论此次痢疾的暴发流行为同一菌株引起,PFGE可以作为暴发流行中对细菌进行鉴定的分析技术。
关键词: 痢疾, 脉冲场凝胶电泳(PFGE), 鉴定
鉴定五类致泻性大肠埃希菌和志贺菌的多重PCR方法
赵爱兰, 熊衍文, 白雪梅, 张少敏, 王艳, 孙晖, 叶长芸
2011,26(1) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2011.01.020
目的 建立一种快速鉴定和鉴别五类致泻性大肠埃希菌和志贺菌的多重PCR方法。 方法 利用五类致泻性大肠埃希菌和志贺菌的毒力基因stx1、stx2、eaeA、lt、stIb、aggR、ipaH及16S rRNA基因rrs,建立8重PCR反应体系,并对PCR引物、反应体系和循环条件进行优化。 结果 8对PCR引物均能特异地扩增相应的基因。对本实验室87株大肠埃希菌及志贺菌的检测结果与先前应用单重PCR的鉴定结果完全一致。 结论 采用内对照基因和毒力基因建立的多重PCR方法既能在一个反应体系中鉴定和区分五类致泻性大肠埃希菌和志贺菌,又能评价PCR体系的反应效率,为五类致泻性大肠埃希菌的快速鉴定和鉴别提供了一种有效检测手段。
关键词: 致泻性大肠埃希菌, 多重PCR方法, 内参照基因
安徽省马鞍山市分离的枸橼酸杆菌的分子分型
刘丽云, 汪永禄, 金东, LAN Rui Ting, 原方芳, 叶长芸, 徐建国
2016,31(12) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2016.12.006
目的 了解中国安徽省马鞍山市分离到的枸橼酸杆菌的分子流行病学特征。方法 2007-2011年从安徽省马鞍山市的腹泻患者粪便、食品和食品加工者肛拭分离到62株枸橼酸杆菌,包括13株弗氏枸橼酸杆菌、41株杨氏枸橼酸杆菌和8株布氏枸橼酸杆菌。所有菌株用Xba Ⅰ酶切进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型和扩增7个管家基因的多位点序列分型(MLST)分析。结果 PFGE将62株枸橼酸杆菌分成43个带型(PTs),MLST将其分成53个ST型别(STs)。CITX01.CN0039是PFGE的优势带型,由2007-2008年间从食品和腹泻患者粪便分离的7株杨氏枸橼酸杆菌组成。53个ST型别分成5个ST序列群,ST序列群39个优势菌株来自腹泻患者粪便、食品和食品加工者肛拭分离的枸橼酸杆菌。从腹泻患者粪便、食品和食品加工者肛拭分离得到的枸橼酸杆菌具有相同的PTs和STs。结论 在食品和人群中监测枸橼酸杆菌对预防和控制枸橼酸杆菌引起的腹泻是必要的。
关键词: 枸橼酸杆菌, 马鞍山, 脉冲场凝胶电泳, 多位点序列分型
一株不产志贺毒素的肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株的鉴定
王蕾, 叶长芸, 赵爱兰, 许彦梅, 徐建国
2007,22(7) . doi: 10.3784/j.issn.1003-9961.2007.7.441
目的 对一株不产志贺毒素的肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株进行血清生化特征及毒力基因鉴定.方法 对154菌株进行常规血清生化鉴定,使用聚合酶链反应(PCR)方法检测该菌的志贺毒素基因及其他毒力因子,同时以southern杂交、Hela细胞毒实验进行证实.结果 菌株154的志贺毒素PCR检测、shouthern杂交为阴性,Hela细胞毒定量结果显示该菌株不产生志贺毒素,毒力因子eae,hly检测为阳性.结论 菌株154是不产志贺毒素的肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株,且具有O157:H7菌株特异性的毒力因子.
关键词: 肠出血性大肠杆菌O157:H7, 志贺毒素, 鉴定
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